景德镇地区妇女人乳头状瘤病毒感染与宫颈上皮病变关系的分析

刘小文，虞敏，欧阳冬英，祝笑秋，陈青霞，郑毅明

(1、景德镇市妇幼保健院检验科，江西景德镇333000；2、景德镇市疾病预防控制中心，江西景德镇333000；3、景德镇市卫生学校，江西景德镇333000；4、景德镇市妇幼保健院病理科，江西景德镇333000)

景德镇地区妇女人乳头状瘤病毒感染与宫颈上皮病变关系的分析

刘小文1，虞敏1，欧阳冬英2，祝笑秋3，陈青霞1，郑毅明4

(1、景德镇市妇幼保健院检验科，江西景德镇333000；2、景德镇市疾病预防控制中心，江西景德镇333000；3、景德镇市卫生学校，江西景德镇333000；4、景德镇市妇幼保健院病理科，江西景德镇333000)

目的通过对景德镇地区妇女生殖道人乳头状瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）感染的状况分析，探讨其高危型HPV感染与人宫颈上皮病变的相关性，为本地区妇女HPV感染与宫颈癌的发病关系及其防治提供相关依据。方法利用导流杂交基因芯片技术对本地区5605例妇女的宫颈上皮细胞行HPV基因分型，并同时对高危型HPV感染阳性患者行TCT细胞学或阴道镜下活检组织学确诊。结果人群高危型HPV阳性检出率为15.5%，15个亚型均有检出，排前五的亚型依次为HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV39，分布比例分别是20.70%、18.20%、12.40%、9.30%和7.70%；其阳性检出率有随宫颈上皮病变（CIN）程度加重而呈增高趋势，由正常组织～CINⅢ+宫颈癌的阳性率分别为10.98%、51.69%、90.36%和100%，组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论当地女性HPV感染状况的调查必将有助于临床开展宫颈癌的筛查，也为以后有针对性的使用HPV预防和治疗性的疫苗提供参考依据。

人乳头状瘤病毒；基因分型；宫颈上皮病变

妇女生殖道人乳头状瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）感染是宫颈癌和癌前病变的主要原因，中外文献资料均显示，持续的高危型HPV感染更是子宫颈癌的高风险因素[1-4]。随着分子生物学技术的不断改进与研究，HPV基因分型检测已成为宫颈癌临床筛查和防治的重要标志物。本文采用导流杂交基因芯片技术检测HPV亚型，通过分析本地区妇女高危型HPV感染状况与其宫颈上皮细胞发生病变的关系，为本地区宫颈癌的防治提供相关线索和依据，结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象景德镇市及周边地区2014年3月至10月来我院妇科就诊的女性病人共5605例，年龄17～78岁。

1.2 标本采集由妇科医生采用专用宫颈刷取得含有宫颈上皮细胞的标本置于装有细胞保存液的专用管中送检。

1.3 仪器与试剂TC-48/H基因扩增仪（博日），HHM-2型凯普医用核酸分子快速杂交仪和HPV基因分型检测试剂盒均由潮洲凯普生物化学有限公司提供。

1.4 检测方法

1.4.1 21型HPV基因分型严格按照试剂说明书操作，设置阴阳对照、先提取送检标本的HPVDNA，经过PCR扩增后，再采用导流杂交基因芯片技术进行HPV基因分型，结果以膜条上出现清晰可见的蓝紫色圆点判为阳性，不同位点代表不同亚型。21型包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68等15种高危型和6，11，42，43，44，CP8304等6种低危型，本文主要针对15种高危型进行分析。

1.4.2 HPV高危型阳性感染患者同时用TCT细胞学或阴道镜下活检组织学行病理确诊。

1.5 统计学处理数据输入SPSS软件数据库，用SPSS 21.0进行统计分析，阳性感染率比较采用Pearson's卡方统计量进行统计分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 869例高危型HPV阳性患者基因型分布情况5605例行宫颈癌筛查的妇女中高危型HPV阳性检出例数共869例，感染率为15.50%。在869例高危型HPV阳性患者中，15个亚型均有检出，分布比例排前五的亚型依次为HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV39，分别是20.70%、18.20%、12.40%、9.30%和7.70%，结果见表1。

2.2 HPV分布构成比病理结果为CINⅠ的患者高危型HPV感染主要见于HPV52（23.2%）、HPV16（21.3%）、HPV58（11.8%）、HPV18（8.5%）、HPV53（8.1%）；CINⅡ患者的高危型HPV感染主要见于HPV16（30.0%）、HPV52（19.1%）、HPV58（15.5%）、HPV51（6.4%）、HPV18（5.5%）；CINⅢ+宫颈癌患者的高危型HPV感染则主要见于HPV16（33.0%）、HPV58（13.6）、HPV18（12.6%）、HPV52（10.7%）、HPV39（6.8%）。结果见表2、3、4。

表1 869例高危型HPV阳性患者基因型分布情况

表2 CINⅠ患者的高危型HPV分布构成比（%）

表3 CINⅡ患者的高危型HPV分布构成比（%）

表4 CINⅢ+宫颈癌患者的高危型HPV分布构成比（%）

2.3 四种高危HPV亚型在不同宫颈病变组织中的分布比较选取在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ+宫颈癌三组患者中均占有较高比例的HPV16、HPV18、 HPV52和HPV58四种高危型HPV进行比较，发现容易感染的亚型还是HPV16和HPV52型，特别是随着组织学病变程度越严重，HPV16型的感染率见长，分别是21.3%、30.0%和33.0%（图1）。分析四种高危HPV亚型在不同宫颈病变组织中的分布，HPV16在CINⅠ～CINⅢ+宫颈癌的宫颈病变组织中占26.41%，HPV52占19.10%，HPV58占13.21%，HPV18占8.73%，各组之间比较，差异有显著性统计学意义（P＜0.05，见表5）。在CINⅡ+的各组病变中，HPV16占31.45%（67/213），HPV52占15.02%（32/213），HPV58占14.55%（31/213），HPV18占8.92%（19/213）。据表5，HPV16较HPV585218等亚型致CINⅡ+的发生率明显增高，经比较差异均有统计学意义（χ2值依次为16.12、17.18、33.57，均P＜0.001）；其它亚型之间相比，致CINⅡ以上病变的发生率差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.4 不同类型宫颈上皮病变患者的高危型HPV感染情况比较分析不同类型宫颈上皮病变患者感染高危型HPV的阳性率随着组织学改变的程度加重而逐渐升高，由正常组织～CINⅢ+宫颈癌的阳性率分别为10.98%、51.69%、90.36%和100%，组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05，见表6）。

图1 HPV四种亚型在CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ及宫颈癌患者的阳性感染状况

表5 四种高危HPV亚型在不同宫颈病变组织中的分布比较[n（%）]

表6 不同类型宫颈上皮病变患者的高危型HPV感染情况比较分析

3 讨论

HPV是一类广泛分布于人和动物的无包膜小型DNA病毒，通过直接或间接接触而传播扩散，人是唯一宿主。HPV具有嗜上皮性，感染后可引起人类黏膜组织良性增生及恶性肿瘤，1989年证实宫颈癌与HPV感染有直接关系。我们进行HPV基因分型检测目的之一是用于流行病学研究，了解地理分布人群的感染率以及各种型别的分布情况。本研究采用导流杂交基因芯片技术对景德镇地区的妇女宫颈上皮细胞进行HPV 15种高危型别的基因分型，阳性感染率15.50%，15个亚型均有检出，主要的几个亚型依次为HPV52（20.70%）、HPV16（18.20%）、HPV58（12.40%）、HPV53（9.30%）、HPV39（7.70%）、HPV51（6.60%）、HPV18（6.10%），这与广西地区和本省萍乡地区所做的研究略有差异，感染率低于他们，但亚型分布主要还是以HPV16、58、52为主[5，6]。这说明不同地区之间的HPV感染还是存在人群感染率与型别分布差异。

我们行HPV基因分型检测目的之二是用于临床宫颈癌筛查与治疗监测。2012年美国阴道镜检查与宫颈病理学会(ASCCP)指南明确高危型HPV检测用于宫颈癌筛查，目的是发现CINⅡ+的高风险人群。本研究显示，在CINⅡ+的各组病变中，HPV16、HPV52、HPV58和HPV18分别占31.45%、 15.02%、14.55%和8.92%。尤其HPV16较HPV585218等亚型致CINⅡ+病变的发生率明显增高（P＜0.001），而其它亚型之间相比差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究还表明，高危型HPV的阳性率随着组织学改变的程度加重而逐渐升高，由正常组织～CINⅢ+宫颈癌的阳性率分别为10.98%、51.69%、90.36%和100%（P＜0.05）。有文献指出，HPV检测CINⅢ和宫颈浸润癌以及总体检出率显著高于TCT[7]，这进一步证实欧洲和北美地区开展的大样本人群分析结果，HPV DNA检测用于宫颈病变筛查时，对于CINⅡ+以上病变的敏感性高达96%，而宫颈细胞学的敏感性仅为53%[8]。

总之，本组研究揭示了景德镇地区女性宫颈常见的HPV感染亚型以及在不同宫颈疾病中HPV感染的特点，这对当地女性HPV感染状况的调查必将有助于临床开展宫颈癌的筛查，也为以后有针对性的使用HPV预防和治疗性的疫苗提供参考资料和依据。

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A

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2016-11-28；

2017-06-15)