麻醉剂对小鼠非手术胚胎移植效果的影响

薛如冰

（河北农业大学动物科技学院 河北 保定 071000）

麻醉剂对小鼠非手术胚胎移植效果的影响

薛如冰

（河北农业大学动物科技学院 河北 保定 071000）

胚胎移植是将着床前的早期胚胎利用器械移植到同种的生理状态相同的动物子宫内，使之继续发育为新个体的技术，是动物克隆、转基因动物以及试管婴儿等领域非常重要的一个环节。目前胚胎移植技术主要应用于4个物种：小鼠、人类、牛、羊。其中人类和牛主要采用非手术法胚胎移植，小鼠和羊主要采用手术法胚胎移植。小鼠手术法胚胎移植操作繁琐、费用高、难度大、易感染，且不符合实验动物福利原则。因此，建立高效简易的非手术胚胎移植技术迫在眉睫。

我们研究发现麻醉状态下与非麻醉状态下相对比，在麻醉状态下进行非手术胚胎移植对小鼠子宫内膜的损伤更小，移植效果更好。

1 试验动物

实验小鼠CD-1品系，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。所有小鼠均采用12 L∶12 D循环光照(6：00～18：00光照)，清洁级小鼠房，温度22℃～25℃，湿度50%～60%，小鼠自由采食和饮水。

2 麻醉方式

我们采用两种不同的麻醉方式进行非手术胚胎移植。

2.1 阿佛丁全身麻醉

2.2 利多卡因或丁卡因子宫颈局部麻醉

3 试验方法

我们将小鼠分为四组来进行对照试验。第一组，在不麻醉状态下对其进行非手术法胚胎移植。第二组，利用丁卡因子宫颈局部麻醉法对其进行非手术法胚胎移植。第三组，利用利多卡因子宫颈局部麻醉法对其进行非手术法胚胎移植。第四组，利用阿佛丁全身麻醉法对其进行非手术法胚胎移植。

小鼠在麻醉期间代谢微弱，体温下降严重，因此移植后最好将小鼠放于热台上待体温回升后放回笼中。

4 试验结果

在非麻醉状态下，小鼠子宫颈口接受刺激后会发生肿胀且子宫收缩加剧，这可能会导致移入的胚胎被挤出子宫角。而在麻醉状态下，子宫的收缩活动相对减弱，有利于胚胎在子宫内的沉积，降低了胚胎由于子宫收缩而被挤出子宫角的可能性。同时，子宫颈口松弛、子宫平滑肌的张力和强度降低，也会减少移植器械对子宫内膜的损伤。

表1 麻醉剂对小鼠非手术法胚胎移植的影响

由试验结果可知，麻醉组的移植效率显著高于不麻醉组，且阿佛丁组的移植效率最高，为67.1%，不同的麻醉方式之间没有显著差异(P＞0.05)，说明小鼠在全身麻醉的状态下进行胚胎移植，子宫损伤最小，移植效率最高。

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