郝文君 张子川 李岩峰 王 欣
老年复发性阿弗他溃疡患者唾液和血清中硫氰酸盐离子浓度的研究
郝文君 张子川 李岩峰 王 欣
目的:探讨硫氰酸盐离子(SCN-)与复发性阿弗他溃疡发病机制间可能存在的关系。方法:随机选取60名(男28,女32)确诊为轻型复发性阿弗他溃疡的老年患者和同期来我院体检的60名(男性30名,女性30名)同龄的健康人为研究对象。分别在患者发病期(A1组)和无症状期(A2组)收集5m l空腹静脉血和3m l非刺激性唾液,以健康人为对照组(B组)。采用吡啶-巴比妥酸分光光度法检测SCN-浓度。结果:A1、A2组唾液SCN-浓度分别为0.61±0.29mmol/L、0.64±0.31mmol/L,组间无统计学差异(P=0.052>0.05)。而A2组SCN-血清浓度(24.06±10.31μmol/L)显著高于A1组(20.39±8.85μmol/L;P=0.000<0.05)。B组的唾液和血清SCN-浓度分别为1.05±0.61mmol/L、36.60±14.81μmol/L,均显著高于A1、A2组(P=0.000<0.05)。结论:作为一种机体非酶类抗氧化剂,SCN-可能与复发性阿弗他溃疡存在着某种相关性。
复发性阿弗他溃疡;硫氰酸盐离子;氧化应激;分光光度法;老年
复发性阿弗他溃疡(Recurrent aph thous ulcer, RAU)是一种临床常见病因不明的口腔黏膜炎症性疾病。其典型的临床表现为溃疡边界清晰,形态为圆形或卵圆形,周围粘膜充血呈红晕状,患者常有烧灼痛感觉,周期性发作,具有自愈性[1]。流行病学调查显示在60岁以上的老年人群中,RAU患病率高达25%-30%,本病的确切病因至今尚不清楚,近年来有报道提出,影响发病的因素有:病毒或细菌感染、免疫功能异常、胃肠功能失调、内分泌因素、口腔局部损伤、精神因素、微量元素缺乏等[2]。
有研究显示,吸烟有利于预防RAU,降低RAU的发生率,但其作用机制尚存有争议[3]。烟草中含有氢氰酸,吸入体内后,经肝脏代谢生成硫氰化合物,广泛分布于脑脊液、血液、唾液、胃液、泪液及尿液中。故而,吸烟者体内的硫氰酸盐离子(Thiocyanate,SCN-)浓度要显著高于不吸烟者[4]。本研究通过测定老年RAU患者发病期与无症状期时唾液和血清SCN-浓度,并与同龄健康人群的SCN-进行比较,旨在探讨SCN-与RAU发病机制间可能存在的关系,为预防和治疗RAU提供理论依据。
1.1 研究对象 选取2016年3月至2017年2月来我科就诊的患有轻型复发性阿弗他溃疡的老年患者60名,其中男性28名,女性32名,年龄61岁-68岁,平均65.38±4.13岁,所有患者均由同一名口腔黏膜病专业的主治医师确诊。以同期来我院体检的同龄健康人60名,(男性30名,女性30名)为对照组,年龄62岁-69岁,平均66.35± 4.44岁。两组人群具有相似的年龄,性别构成,经济条件和社会地位。纳入标准:①血常规、血压、血糖、肝功能、肾功能均无明显异常。②无酗酒、吸烟、吸毒者。③女性受试者均绝经。④无急性炎症、肝肾疾病、心血管系统疾病、消化系统疾病、血液系统疾病、呼吸系统疾病、内分泌系统疾病。⑤无天疱疮、白塞病、红斑狼疮、风湿性关节炎等免疫系统疾病。⑥无白斑、红斑、疱疹性咽峡炎、单纯疱疹病毒感染、手足口病、扁平苔癣等口腔黏膜疾病。⑦3个月内未服用维生素类、甾类化合物、免疫调节类等药物。⑧患者无明显原因的口腔溃疡年发病次数为3-12次。本研究获得白求恩国际和平医院临床研究医学伦理委员会批准(批准号:2015-12-8号),所有受试者均签署了临床科研知情同意书。
1.2 研究方法 所有受试者禁食10-12小时,未吸烟、未刷牙、未喝水及任何可食性液体。收集无刺激性唾液前,先用无菌蒸馏水漱口,静坐5m in后,由受试者自行向无菌试管内吐唾液3m l,2-3次/m in;由相同的护士抽取受试者空腹肘前静脉血5m l。室温4℃条件下,分别对唾液和静脉血进行离心处理,3000r/m in离心10m in,取上层清液(或血清)置于-40℃冰箱保存。所有操作均在上午7-9点完成。
采用吡啶-巴比妥酸分光光度法[5]测定唾液和血清中SCN-浓度。其原理为:SCN-与氯胺丁反应生成氯化氰,致使吡啶环裂开,生成戊烯二醛。而戊烯二醛与巴比妥酸反应,可生成紫红色染料,其色度值与SCN-浓度成正比。室温环境下,在波长为580nm处,1cm光径比色杯,蒸馏水调零,测定吸光度值。实验分组如下:发病期的M iRAU患者为实验1组(A1组);无症状期的同批M iRAU患者为实验2组(A2组);无M iRAU的健康人为对照组(B组)。
1.3 统计学分析 采用SPSS19.0统计软件进行数据处理。计量资料均以均数±标准差(x±s )表示,组间比较采用独立样本t检验和配对t检验;计数资料采用χ2检验。检验水准为双侧α=0.05。
两组受试者的一般临床资料见表1。A组和B组的性别及年龄均无统计学差异(P>0.05);图1、图2分别为A1组、A2组和B组的唾液和血清SCN-浓度。其中,A1组唾液SCN-浓度为0.61± 0.29mmol/L,与 A2组(0.64±0.31mmol/L)相比,无统计学差异(P=0.052>0.05)。但均显著低于B组唾液SCN-浓度(1.05±0.61mmol/L;P= 0.000<0.05)。A1、A2、B组的血清SCN-浓度分别为20.39±8.85μmol/L、24.06±10.31μmol/L、36.60±14.81μmol/L,组间差异显著(P=0.000< 0.05)。
表1 A、B组受试人群的一般临床资料
复发性阿弗他溃疡是一种临床常见的口腔黏膜疾病,好发于唇、颊、舌等部位,牙龈及硬腭少见。多年来,国内外的学者们进行了大量的实验研究,但仍未能明确其发病机制[2]。目前临床医师只能依据患者口腔溃疡的临床表现实施对症治疗[6]。
图1 A1、A2、B组的唾液SCN-浓度(**表示组间差异显著)
图2 A1、A2、B组的血清SCN-浓度(**表示组间差异显著)
临床流行病学研究显示,吸烟者患复发性阿弗他溃疡的机率显著低于非吸烟者[7],且吸烟者戒烟后RAU的患病机率明显增加[8]。而Saw air[3]等对1000名在校大学生问卷调查的结果却显示,吸烟者和非吸烟者RAU患病率无统计学差异,但是吸烟量大、吸烟时间长的学生其RAU患病率显著小于吸烟量小、吸烟时间短的人群。也就是说,吸烟预防RAU是具有剂量和时间依赖性的。但是当口腔内出现溃疡后,吸烟对RAU临床症状的严重程度无明显影响。
氧化应激(Oxidativestress;OS)是指机体受到多种因素刺激后,导致体内活性氧(Reactive oxygen species;ROS)增多,抗氧化能力降低,打破了机体正常的氧化还原动态平衡,造成蛋白质、脂质、核酸等生物大分子的氧化损伤,而形成的一种严重的应激状态[9]。ROS是机体内最常见的自由基,已有研究证明ROS是癌症、心血管疾病、免疫系统疾病等多种慢性疾病发病机制的关键因素。Gurel等[10]认为,ROS增多所导致的氧化应激反应与复发性阿弗他溃疡具有一定的相关性。
硫氰酸盐离子(SCN-)作为一种抗氧化剂已被认为在心血管方面具有十分重要的意义[11]。近年来,人们对参与机体氧化应激反应的酶类物质(超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、髓过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶等)和非酶类物质(尿素、维生素A、维生素C、锌离子、硒离子、铜离子等)与RAU相关性的研究较多[12-14],但是SCN-在RAU发病机制中的作用目前研究很少,且国内尚无相关报道。唾液中的SCN-与血液中的SCN-可在过氧化物酶(CAT)或髓过氧化物酶(MPO)的催化作用下形成OSCN-,从而减小了过氧化氢(H2O2)对机体的损害,降低了宿主体内的ROS[15,16]。有研究显示[17],OSCN-具有改变还原型和氧化型谷胱甘肽比率(GSH/GSSG)的作用,而该比率是反应机体氧化应激状态的重要指标。
本研究中,老年RAU患者发病期和无症状期时唾液中的SCN-浓度分别为0.61±0.29mmol/L和 0.64±0.31mmol/L,两者间无统计学差异(P>0.05),这与Cherubini等[15]的研究结果相似。本研究所测定的健康人群唾液中SCN-浓度为1.05±0.61mmol/L,虽略大于Cherubini测得的结果(0.96±0.77mmol/L),但与Glatz等[18]的研究结果相似,这可能与所选受试人群的种族、年龄、性别构成及研究方法不同有关。
本研究不仅对唾液SCN-浓度进行了研究,还比较分析了各组受试者的SCN-血清浓度。结果显示,老年RAU患者发病期的SCN-血清浓度显著低于无症状期(P<0.05);同龄健康人的SCN-血清浓度为36.60±14.81μm ol/L,低于以往研究的结果[19]。Assaf[20]等测得的不吸烟的健康男性SCN-血清浓度为60.6μmol/L,不吸烟的健康女性为43.0μmol/L,且女性SCN-血清浓度显著低于男性。而本研究中女性受试者多于男性,这也可能是本研究所得结果小于以往研究结果的原因。
尽管Saw air[3]认为,吸烟对RAU的预防效果是由于①粘膜的角化程度增加,角质蛋白层增厚,对外界的物理和化学刺激抵抗力增强。②尼古丁可诱导肾上腺类固醇激素增多,减少TNF-α、IL-1、IL-6,从而影响机体的炎症性免疫应答。但是本研究的结果显示SCN-水平与RAU是存在一定相关性的,这也可能是吸烟降低RAU发病机率的一个重要因素。
机体获取SCN-的途径包括吸烟和食物,大白菜、萝卜等根茎类蔬菜为其主要来源。故而,作者认为适量的食用该类蔬菜,提高机体的SCN-血清浓度,可能会减少RAU的发病机率,有助于RAU的预防和治疗。
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A study of the concentrations of salivary and serum thiocyanate in elderly patients w ith recurrent aphthous ulcer
HAO Wen-jun,ZHANG Zi-chuan,LI Yan-feng,WANG Xin
(Department of Stomatology,First Affiliated Hospital of PLA General Hospital,Beijing 100048,China)
Objective:The aim of this study was to investigate the possible relationship between thiocyanate(SCN-)and the pathogenesis of recurrent aphthous ulcer(RAU).M ethods:Sixty elderly patients(28 males,32 females)having been diagnosed with minor recurrent aphthous ulcer(M iRAU)and sixty age-matched healthy persons(30 males,30 females) being taken normal medical examination in our hospital were enrolled.After an overnight fast,5 m l venous blood and 3m l of unstimulated saliva samples were obtained from the patients w ith current active lesion of RAU(Group A1),the same patients in the rem ission phase of RAU(Group A2),healthy persons(Group B),respectively.The concentrations of saliva and serum SCN-were measured by the spectrophotometric method.Results:A1,A2group saliva SCN-concentration were 00.61±0.29mmol/L、0.64±0.31mmol/L,and there was no significant difference between the groups(P=0.052>0.05). The serum thiocyanate concentration of group A2(24.06±10.31μmol/L)was significantly higher than that of group A1(20.39±8.85μmol/L;P=0.000<0.05).The concentrations of salivary and serum thiocyanate of group B were 1.05± 0.61mmol/L、36.60±14.81μmol/L,which were significantly higher than those values of group A1and group A2(P=0.000<0.05).Conclusion:As a kind of nonenzymatic antioxidant,SCN-may have some relevance to recurrent aphthous ulcer.
recurrent aphthous ulcer;thiocyanate;oxidative stress;spectrophotometric method;elderly
R781.5
A
1672-2973(2017)03-0149-04
2017-01-25)
郝文君 解放军总医院第一附属医院口腔科 硕士生北京 100048解放军政治工作部黄寺第一干休所 主治医师北京 100120
张子川 解放军白求恩国际和平医院口腔科 主治医师石家庄 050082
李岩峰 通讯作者 解放军总医院第一附属医院口腔科主任医师 教授 北京 100048
王 欣 解放军总医院第一附属医院口腔科 硕士生北京 100048