温通膏薄层色谱鉴别标准提高研究

黄晓冰　陈金兴　潘弟仪　陈燕芬

摘要：目的优化和提高温通膏的定性鉴别质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别处方中补骨脂、蛇床子、薄荷脑等药材。结果补骨脂、蛇床子、薄荷脑的薄层色谱斑点清晰，分离度好，阴性无干扰。结论该实验方法操作简便，具有很好的重复性和耐用性，专属性强，用于控制温通膏的质量，结果准确可靠。

关键词：温通膏；薄层鉴别；标准提高

中图分类号：R284 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2017）03-0073-02

温通膏是广州中医药大学附属骨伤科医院注册中药制剂，主要由补骨脂、蛇床子、辣椒、远志、狗脊、高良姜、薄荷脑等药物组成，临床应用多年，使用方便，价格低廉，治疗肾虚腰痛、手足痿痹、跌打损伤等疾病相比于其他同类上市药品具有明显的优势。温通膏作为骨伤科医院的中医临床名医名方特色制剂，社会需求较大，应用前景广阔，将其进一步研究开发具有重要意义，目前，广州中医药大学附属骨伤科医院正对其进行深度开发研究。本研究对温通膏开展新的定性鉴别方法研究，建立了处方中补骨脂、蛇床子、薄荷脑等主药成分的薄层鉴别方法，提高了温通膏的质量标准，为其下一步开发研究奠定基础。

1仪器与材料

1.1仪器 DK-S26电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；KS-150EI型超声波清洗机（宁波海曙科生超声波设备有限公司）；MSEl25P电子分析天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；薄层色谱成像系统（上海科哲生化科技有限公司）。

1.2材料 补骨脂对照药材、蛇床子对照药材、薄荷脑对照品（批号：121056-200904、121030-201507、110728-200506，中国药品生物制品鉴定所提供）；硅胶G板（自制）；温通膏由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供；其余试剂均为分析纯。

2方法與结果

2.1补骨脂的鉴别 取本品5 g，加入30 mL乙酸乙酯，超声处理30分min，滤过后蒸干滤液，残渣加入1 mL乙酸乙酯溶解作为供试品溶液。另取补骨脂对照药材0.5 g，加入20 mL乙酸乙酯超声处理30 min，滤过后蒸干滤液，残渣加入1 mL乙酸乙酯制成对照药材溶液。吸取供试品溶液与对照药材溶液各10μL，分别点于同一硅胶G板上，展开剂为正己烷-乙酸乙酯（4：1），展开后取出晾干，薄层板喷10%氢氧化钾甲醇溶液，在365nm紫外光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图1。

2.2蛇床子的鉴别 取本品10 g，加入50 mL乙醇超声处理30 min，滤过后蒸干滤液，残渣加1 mL乙醇溶液溶解作为供试品溶液。另取蛇床子对照药材0.3 g，加乙醇5 mL，自“超声处理30 min"起，同法制成对照药材溶液。吸取供试品溶液与对照药材溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开剂为石油醚Ⅱ（60～90速度）-乙酸乙酯（7：3），展开后取出晾干，薄层板喷10%硫酸乙醇溶液后加热至斑点显色清晰，在紫外光（365 ml）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图2。

2.3薄荷脑的鉴别 取本品1 g，加乙醚20 mL，振摇使样品溶解均匀，过滤后取滤液挥干，加入2 mL甲醇溶解残渣作为供试品溶液。另取薄荷脑对照品加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G板上，展开剂为石油醚Ⅱ（60-90℃）-乙酸乙酯（5：1），展开，取出，晾干，薄层板喷以10%磷钼酸乙醇溶液后加热至斑点显色清晰，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图3。

3讨论

3.1蛇床子的薄层鉴别方法 笔者曾参照《中国药典》2010年版一部蛇床子项下收载有薄层鉴别方法进行鉴别，结果供试品与对照药材色谱没有相对应的斑点，在其基础上，将展开剂改为石油醚（60～90℃）一乙酸乙酯（7：3），展开后喷以显色液10%硫酸乙醇，结果供试品色谱与对照药材色谱斑点清晰，且对应良好，经方法学考察，具有良好的专属性和耐用性，故列入质量标准。

3.2温通膏处方中含有薄荷脑，薄荷脑具有消炎、止痛、止痒等药理作用，同时薄荷脑还是一种良好的透皮促渗剂，能够有效的促进处方中有效成分的透皮吸收，其作为促渗剂具有起效快，效果好，不良反应小等优点。由于薄荷脑的熔点较低，挥发性较强，为了保证产品质量，本研究建立了薄荷脑的薄层鉴别方法用于控制温通膏的质量，确保薄荷脑不因生产工艺过程中丢失而影响其药理作用和透皮促渗作用。

3.3本研究对以上鉴别方法进行了方法学考察研究，分别考察其专属性、耐用性（包括不同来源薄层板的比较、常温与低温的比较、高湿与低湿的比较），结果显示以上鉴别方法均具有良好的专属性与耐用性，可用于温通膏的质量控制。

（收稿日期：2016-11-05）