AFP、AFU、GPC3及GP73联合检测对原发性肝癌的诊断意义

胡友明 张娟安 刘 军 陈汉东



AFP、AFU、GPC3及GP73联合检测对原发性肝癌的诊断意义

胡友明 张娟安 刘 军 陈汉东

目的 探讨AFP、AFU、GP73和GPC3联合检测对原发性肝癌(primary hepatic cancer，PHC)的诊断价值。方法 收集荆州市中心医院2013年12月至2015年3月收治的PHC患者血清标本45例，肝硬化患者血清标本36例，乙型肝炎患者血清标本54例和健康体检者血清标本50例，分别检测各组研究对象血清AFP、AFU、GP73和GPC3水平，采用ROC曲线分析各标志物诊断PHC的价值。结果 PHC组患者血清AFP、AFU、GP73和GPC3表达水平均显著高于肝硬化组、乙型肝炎组和健康体检组(P<0.05)。肝硬化组和乙型肝炎组患者血清AFP、AFU水平显著高于健康体检组(P<0.05)。肝硬化组患者血清GP73水平显著高于乙型肝炎组患者(P<0.05)，乙型肝炎组患者血清GP73水平显著高于健康对照组。联合AFP、AFU、GP73和GPC3检测的ROC曲线下面积为0.922，大于任何单一标志物检测。联合AFP、AFU、GP73和GPC3检测的敏感性、特异性和准确性分别为93.8%，81.5%和90.1%，其中敏感性和准确性明显高于任何单一标志物。结论 联合AFP、AFU、GP73和GPC3检测可以显著提高PHC的检出率和准确性，为临床早期诊断PHC提供可靠参考。

原发性肝癌；甲胎蛋白；高尔基体蛋白73；磷脂酰肌醇蛋白聚糖3；α-岩藻糖苷酶

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:375～377)

原发性肝癌(primary hepatic cancer，PHC)是我国常见恶性肿瘤之一，恶性程度高，5年生存率低。PHC起病较隐匿，早期临床症状不典型，诊断难度较大，大多数患者确诊时已是中晚期，失去最佳治疗时机。因此，PHC的早期诊断对治疗及预后至关重要。甲胎蛋白(alpha fetoprotein，AFP)是诊断肝癌的经典肿瘤标志物，但是单独使用AFP达不到理想的特异度和灵敏度。近年来，荟萃分析显示高尔基体蛋白73(golgi protein73，GP73)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3，GPC3)和α-岩藻糖苷酶(alpha fucosidase，AFU)在肝癌患者血清中出现高表达[1]。本研究联合检测AFP、GP73、GPC3和AFU 4种肿瘤标志物在PHC患者血清中的表达水平，旨在探讨4种标志物联合检测对PHC的诊断价值。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集荆州市中心医院2013年12月至2015年3月收治的PHC患者血清标本45例，肝硬化患者血清标本36例，乙型肝炎患者血清标本54例和健康体检者血清标本50例。PHC组男性29例，女性16例；年龄32～69岁，平均(43.2±7.5)岁。肝硬化组男性21例，女性15例；年龄35～72岁，平均(45.3±7.2)岁。乙型肝炎组男性28例，女性26例；年龄24～75岁，平均(40.6±8.1)岁。健康体检组男性26例，女性24例；年龄25～70岁，平均(42.9±8.0)岁。4组患者年龄，性别构成比无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

血清AFU试剂由宁波美康生物科技股份有限公司提供，仪器采用美国贝克曼库尔特公司LX-20型全自动生化分析仪；血清AFP测定仪器采用美国贝克曼库尔特公司DX1800全自动化学发光免疫分析系统，试剂和校准品采用其公司原装配套试剂。血清GP73和GPC3采用美国RD Biosciences公司提供的酶联免疫分析试剂盒检测。严格按照说明书操作。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 各组患者4种肿瘤标志物的表达水平

PHC组患者血清AFP、AFU、GP73和GPC3表达水平均显著高于肝硬化组、乙型肝炎组和健康体检组(P<0.05)。肝硬化组和乙型肝炎组患者血清AFP、AFU水平显著高于健康体检组(P<0.05)，但肝硬化组和乙型肝炎组比较无统计学差异(P>0.05)。肝硬化组患者血清GP73水平显著高于乙型肝炎组患者(P<0.05)，乙型肝炎组患者血清GP73水平显著高于健康对照组患者。血清GPC3水平在肝硬化组、乙型肝炎组患者和健康体检组患者间无统计学差异(P>0.05)。见表1。

表1 各组患者4种肿瘤标志物的表达水平

2.2 4种肿瘤标志物单独检测及联合检测的ROC曲线分析

联合AFP、AFU、GP73和GPC3检测的ROC曲线下面积为0.922，大于任何单一标志物检测。见表2。

2.3 4种肿瘤标志物检测对PHC诊断效能分析

联合AFP、AFU、GP73和GPC3检测的敏感性、特异性和准确性分别为93.8%、81.5%和90.1%，其中敏感性和准确性明显高于任何单一标志物，但是特异性有所降低。见表3。

3 讨论

肝癌是我国常见的消化系统恶性肿瘤，死亡率位居第二，并且近年来呈现出发病率和死亡率逐年上升的趋势。PHC患者早期多不呈现典型的临床表现，以致早期发现及诊断该病困难，因此对早期PHC患者寻求有效的检测方法，提高诊断水平就成为临床医生关注的焦点。血清肿瘤标志物是肿瘤细胞或是肿瘤相关组织产生的可在血液中呈现高表达的物质，与肿瘤的生长、扩散和发展有关[2-3]。AFP是胚胎发育早期形成的一种糖蛋白，是目前临床上诊断肝癌常用的肿瘤标志物，但是高分化或分化很差的肝癌细胞常不表达AFP，而在病毒性肝炎和肝硬化等慢性肝脏疾病中出现高表达，临床诊断PHC的灵敏度较低[4]。本研究中AFP诊断PHC的敏感性为78.6%，准确性为80.5%，可见单独的AFP检测诊断PHC的漏诊率和误诊率还是比较高的。AFU是存在于多种组织中的一种溶酶体酸性水解酶，几乎在所有的哺乳动物细胞中表达[5]。研究显示PHC患者中AFU呈现高表达，检测PHC时，可以与AFP互补，提高诊断的敏感性和特异性[6]。GP73是高尔基Ⅱ型跨膜蛋白，在正常肝脏细胞中，GP73主要是在汇管区的胆管上皮细胞中进行表达，在其他肝细胞中低表达或不表达[7]，在疾病状态时，GP73可从高尔基体顺面膜囊尚循环出来并到达胞内体及细胞表面[8]，研究显示GP73的特异度和灵敏度显著高于AFP，且在肝转移癌中尤其显著[9]。GPC3通过磷脂酰肌醇锚定在细胞膜上，属于分泌蛋白，介导多种信号传导途径，通过多聚阴离子GAG侧链或核心蛋白，与Wnt、胰岛素样生长因子-Ⅱ、转化酶等多种细胞因子发生作用，导致肝细胞增生与分化，参与肝细胞的癌变过程[10-11]。

表2 4种肿瘤标志物单独检测及联合检测的ROC曲线分析

表3 4种肿瘤标志物检测对PHC诊断效能/%

单一标志物对于肿瘤的检测往往存在敏感性和特异性的不足，而联合检测可以达到互补的作用。目前，对于PHC的诊断，众多学者采用联合检测的方法研究，结果几乎都显示出联合检测较单一标志物检测能获得较高的检出率和准确性。谢明水等[12]分析了AFP-L3、GP73和GPC3联合检测在PHC中的诊断价值，结果显示联合检测的ROC曲线下面积可达到0.960，远远高于单独检测的ROC曲线下面积，明显提高PHC的检出率。叶宏[13]联合AFP、AFU和β2-微球蛋白及透明质酸诊断PHC，结果显示联合这4种肿瘤标志物能显著提高早期诊断PHC的敏感性和诊断率。本研究联合AFP、AFU、GP73和GPC3 4种肿瘤标志物检测PHC，结果显示PHC患者血清中这4种肿瘤标志物均出现显著升高，其中肝硬化和乙型肝炎患者的血清AFP、AFU和GP73水平与健康体检者比较也出现了显著升高，而GPC3只在PHC患者血清中出现显著升高，可见GPC3诊断肝癌的特异性较高，可达到90.7%。ROC曲线分析的结果显示联合4种标志物检测的曲线下面积为0.922，高于任何单一标志物和其他任意组合检测，且联合检测的敏感性可达到93.8%，准确率可达到92.1%，相比于单独检测明显升高，特异性略有所降低，为81.5%。由此可见联合AFP、AFU、GP73和GPC3检测可以显著提高PHC的检出率和准确性，降低假阳性和假阴性结果的发生率，为临床早期诊断PHC提供可靠参考。

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(编辑：甘 艳)

The Significance of Combined Detection of AFP，AFU，GPC3 and GP73 in the Diagnosis of Primary Hepatocellular Carcinoma

HU Youming，ZHANG Juan'an，LIU Jun，et al.

Jingzhou Shashi District People's Hospital，Jingzhou，434000

Objective To investigate the value of combined detection of AFP，AFU，GP73 and GPC3 in the diagnosis of primary liver cancer.Methods Collected 45 cases of serum samples of PHC patients，36 patients with liver cirrhosis，54 patients with hepatitis B and 50 cases of healthy patients.Detected the levels of serum AFP，AFU，GP73 and GPC3 in each group respectively，and used ROC curve to analyze the diagnostic value of PHC.Results The expression levels of AFP，AFU，GP73 and GPC3 in the serum of patients with PHC were significantly higher than those in patients with cirrhosis，hepatitis B group and healthy control group (P<0.05).The serum AFP and AFU levels in liver cirrhosis group and hepatitis B patients were significantly higher than that in healthy control group(P<0.05).The serum level of GP73 in patients with liver cirrhosis was significantly higher than that of patients with hepatitis B(P<0.05)，the level of serum GP73 in patients with hepatitis B was significantly higher than that in healthy control group.The area under the ROC curve of the combination of AFP，AFU，GP73 and GPC3 was 0.922，larger than that of any single marker.The sensitivity，specificity and accuracy of the combined detection of AFP，AFU，GP73 and GPC3 were 93.8%，81.5% and 90.1%，respectively，and the sensitivity and accuracy were significantly higher than those of any of the markers.Conclusion Combined detection of AFP，AFU，GP73 and GPC3 can significantly improve the detection rate and accuracy of PHC，and provide a reliable reference for the early diagnosis of PHC.

Primary hepatic cancer；AFP；GP73；GPC3；AFU

434000 湖北省荆州市沙市区人民医院(胡友明，陈汉东)；434000 湖北省荆州市中心医院(张娟安，刘 军)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.03.008

R735.7

A

1001-5930(2017)03-0375-03

2016-05-04

2016-11-04)