肺癌血清标志物PCNA及Bax的表达及与预后的关系

任 洁，程春来，芦 兰，杜 渊

(长江航运总医院肿瘤科,武汉 430010)

·经验交流·

肺癌血清标志物PCNA及Bax的表达及与预后的关系

任 洁，程春来△，芦 兰，杜 渊

(长江航运总医院肿瘤科,武汉 430010)

目的 观察肺癌血清标志物细胞增殖抗原(PCNA)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达及与预后的关系。方法 收集该院100例肺癌患者(肺癌组)及50例健康人血清标本(对照组)，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺癌组及对照组血清中PCNA及Bax表达量，同时探讨二者与肺癌病理参数的关系。结果 肺癌组PCNA表达高于对照组，低中分化组PCNA表达高于高分化组，Ⅲ～Ⅳ期PCNA表达高于Ⅰ～Ⅱ期，有淋巴结转移组PCNA表达高于无淋巴结转移组，差异均有统计学意义(P<0.05)。而肺癌组中Bax表达情况相反，并与PCNA表达负相关，同时肺癌组PCNA和Bax表达与患者性别、年龄、吸烟史、病理类型及肿瘤大小无关。结论 PCNA的表达对肺癌的发生发展起促进作用，并与Bax表达负相关，二者的表达可为肺癌的诊断及预后提供判断依据。

癌，非小细胞肺；细胞增殖抗原；Bcl-2相关X蛋白；预后

肺癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤之一，其病死率居世界首位，近年来其发病率及病死率呈上升趋势，给患者及社会带来沉重负担[1-2]。手术治疗是其目前主要治疗方式，但由于肺癌患者早期症状不明显，使得影像学表现不显著，同时肺癌与肺良性病变鉴别难度较大，导致当患者确诊时常处于晚期，所以寻找肺癌高效肿瘤标记物具有重要意义[3]。目前肺癌的确诊还是依靠组织病理学或细胞学检查，但由于医疗设备限制及患者因素，同时此技术取材不方便，不易反复获取，创伤较大，使得通过该技术获取标本受到限制。而血清肿瘤标记物由于取材方便，重复性好，创伤小，易于被患者接受，而且成本低廉，已逐渐广泛用于肺癌的诊断及治疗[4]。肿瘤标记物细胞增殖抗原(PCNA)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)是细胞增殖与凋亡相关蛋白，已被证实是胃癌及宫颈癌血清肿瘤标记物[5-6]，同时研究也表明其表达与肺癌的发生发展密切相关[7-8]，但未见二者在肺癌血清中的表达情况的报道，所以本研究将探讨PCNA与Bax在肺癌血清中的表达及与预后的关系，为肺癌的早期诊断及预后提高判断依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集本院2015年5月至2016年4月100例病理确诊为肺癌患者的血清标本(肺癌组)，所有患者均未接受化疗、放疗及手术治疗，且不患有哮喘、肺间质纤维、冠心病、糖尿病及其他恶心性肿瘤等疾病。其中男58例，女42例，年龄39～77岁，平均58岁；<60岁62例，≥60岁38例；有吸烟者(超过5支/天)62例，无吸烟者38例；小细胞肺癌(SCLC)44例，非小细胞肺癌(NSCLC)56例(包括腺癌29例，鳞癌20例，支气管肺泡癌7例)；临床分期(TNM)Ⅰ～Ⅱ期36例，Ⅲ～Ⅳ期64例；病理分化程度低中分化67例，高分化33例；有淋巴结转移59例，无淋巴结转移41例；肿瘤大小，<5 mm 72例，≥5 mm 28例。另外选择50例健康人作为对照组，其中男28例，女22例，年龄38～78岁，平均59岁；<60岁30例，≥60岁30例；有吸烟者28例，无吸烟者22例。本研究已通过本院伦理委员会审批，参与试验的患者及家属均签署知情同意书，参与试验的所有志愿者均被告知试验目的，且均同意试验要求后被采集标本。

1.2 方法 所有志愿者在知情同意并未接受任何治疗的情况下，空腹通过外周静脉采血5 mL置于无抗凝剂的干燥管中，室温放置30～60 min，并在2 h内2000 r/min离心10 min，然后小心吸取上层血清，置于干燥EP管中，并密封编号置于-80 ℃冰箱待测。采用ELISA法检测所有血清标本中PCNA及Bax水平，实验方法分别严格按照ELISA试剂盒说明书进行操作，试剂盒均有武汉博士德生物技术有限公司提供。

2 结 果

2.1 两组血清中PCNA和Bax水平的比较 肺癌组血清中PCNA水平显著高于对照组，而Bax水平显著低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 两组血清中PCNA和Bax水平的比较

2.2 肺癌血清中PCNA和Bax的表达与临床病理特征的关系 肺癌血清中PCNA和Bax表达与肿瘤的病理分化程度，TNM分期及淋巴结转移密切相关。即中低分化组血清中PCNA水平显著高于高分化组，Ⅲ～Ⅳ期患者血清中PCNA水平高于Ⅰ～Ⅱ期，有淋巴结患者血清中PCNA水平高于无淋巴结转移，差异均有统计学意义(P<0.05)。中低分化组血清中Bax水平显著低于高分化组，Ⅲ～Ⅳ期患者血清中Bax水平低于Ⅰ～Ⅱ期，有淋巴结转移患者血清中Bax水平低于无淋巴结转移，差异有统计学意义(P<0.05)。而肺癌血清中PCNA和Bax表达与患者性别，年龄，吸烟史，病理类型及肿瘤体积无关，见表2。

表2 肺癌血清中PCNA和Bax的表达与临床病理特征的关系

2.3 PCNA和Bax表达的相关性 经Pearson相关性分析，肺癌血清中PCNA和Bax表达呈负相关(r=-0.458，P<0.01)。

3 讨 论

PCNA是真核细胞DNA复制和核苷酸剪切过程所需要的辅助蛋白，是细胞增殖状态的评价指标之一。国内外研究已发现PCNA与肺癌的发生，临床分期，预后，复发，转移及肿瘤标记物密切相关[7]。而且刘辉琦等[4]的研究还表明血清中PCNA水平与胃癌的发生发展密切相关。所以本研究首先通过ELISA法检测肺癌组及对照组血清中PCNA水平，结果表明肺癌组血清中PCNA水平显著高于对照组，与Liu等[7]研究结果肺癌组织中PCNA表达量高于正常肺组织一致，从而说明血清中PCNA也与肺癌的发生密切相关。因此进一步检测肺癌血清中PCNA与临床病理参数的关系，结果表明肺癌血清中PCNA的表达与肿瘤分化程度，临床分期及淋巴结转移密切相关，而与性别，年龄，病理类型及肿瘤大小无关，与以往的研究结果类似[8-10]。从而说明随着肿瘤临床分期越晚，分化程度越低，肺癌血清中PCNA表达越高，细胞增殖越加活跃，肿瘤恶性程度加深，致使肺癌患者预后不佳。

另一方面检测肿瘤细胞凋亡相关基因的表达也成为肿瘤发现，诊断及预后的重要手段[11-12]。Bcl-2家族是最常被研究的一类细胞凋亡相关基因，Bax是Bcl-2家族的促凋亡蛋白。刘瑞芳等[12]研究表明肺癌组织Bax阳性表达低于正常组织，并与肿瘤分化程度及淋巴结转移负相关，且其阳性表达与细胞凋亡正相关。曹文荣等[13]研究表明肺癌组织中Bax表达量低于良性病变灶旁正常肺组织，并与TNM分期，淋巴结转移密切相关，与病理类型无关。本研究结果表明肺癌血清中Bax表达量显著低于对照组，此结果与于慧玲等[5]在宫颈癌血清中发现的Bax的表达趋势一致，也与刘瑞芳等[12]，曹文荣等[13]研究结果一致。从而说明肺癌血清中Bax表达量与肺癌的发生密切相关。此外本研究结果还表明肺癌血清中Bax的表达与肺癌肿瘤分化程度，TNM分期及淋巴结转移，而不与肺癌患者性别，年龄，肿瘤大小，病理类型及吸烟史相关，此结论与Sun 等[6]研究结果一致。从而说明Bax在肺癌的发生过程中起负调控作用，使细胞凋亡不足，进而使细胞过度增殖进而恶化。

另外通过Pearson相关性分析表明肺癌血清中PCNA与Bax表达量负相关。Xu等[14]研究发现通过RNA干扰抑制小鼠卵巢中PCNA表达，能显著的上调促凋亡基因Bax的表达，从而进一步诱导新生小鼠卵母细胞凋亡。说明通过靶向下调肺癌PCNA表达，进而上调Bax表达，能遏制肺癌细胞的过度增殖，促进癌细胞凋亡，最终可能避免癌细胞的转移扩散。

总之，PCNA的表达对肺癌的发生发展起着促进作用，而Bax对肺癌的发生发展起着抑制作用，二者的血清学联合检测对于肺癌的早期发现，诊断及预后具有重要意义。

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任洁(1964-)，副主任医师，本科，主要从事肺癌综合治疗的研究。△

，E-mail:22090947@qq.com。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.10.035

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1671-8348(2017)10-1399-03

2017-01-29

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