老年糖尿病合并高血压患者血清网膜素水平与氧化应激的关系

王红，岳伟，孙薇，李兆雷，崔秋子，柴国禄

(佳木斯市骨科医院内科，佳木斯154002)

高血压是老年糖尿病(diabetes mellitus，DM)患者常见的心血管合并症，是导致老年人心、脑、肾等器官损害和功能障碍的主要原因，其发病机制至今仍不完全清楚。近年来，脂肪组织分泌的细胞因子与高血压发病的关系引起了人们的关注。网膜素(omentin)是新发现的特异表达于腹部网膜脂肪组织的细胞因子，具有抗炎症、调节脂代谢、舒张血管及增强胰岛素敏感性等作用，是血管内皮功能障碍的标志物，参与高血压发病的病理过程［1］。研究表明［2］，氧化应激是高血压发病的重要原因，目前有关老年DM合并高血压患者血清网膜素与氧化应激关系的研究报道尚少。本研究旨在探讨老年DM合并高血压患者血清网膜素与氧化应激的关系及其可能作用。

1 对象与方法

1．1 研究对象

入选2015年6月至2016年12月期间在我院内科治疗的老年2型DM患者127例。纳入标准:(1)年龄＞60岁;(2)符合1999年世界卫生组织对DM的诊断标准。排除标准:(1)炎症感染、酮症酸中毒等急性并发症;(2)心、脑、肝、肾等脏器损伤及功能不全。依据是否合并高血压分为2组:高血压组(n=69)和非高血压组(n=58)。高血压的诊断标准符合2010年中国高血压防治指南规定［3］，均为初治或停用降血压药2周以上者，排除肾脏、内分泌等疾病所致的继发性高血压。另选取我院同期体检的健康老年人30名作为对照组，其中男性16名，女性14名，年龄61～68(65．64±5．13)岁。本研究经过佳木斯市骨科医院伦理委员会批准，批准文号20150011。

1．2 方法

对两组患者给予DM教育，控制饮食，适当体育锻炼，口服瑞格列奈(江苏豪森药业股份有限公司，国药准字 H20103637，1 mg，3次/d)，血糖未达标者加服二甲双胍(上海信谊天平有限公司，国药准字H31020246，0．5 g，3 次/d)。高血压组患者入院采血后，口服依那普利(上海现代制药有限公司，国药准字H31022198，10 mg，1次/d)。治疗4周。

1．3 研究指标及检测方法

清晨平卧位测右上肢肱动脉血压3次，间隔5 min/次，取均值，平均动脉压(mean artery presure，MAP)=舒张压+1/3脉压差。空腹≥12 h后，清晨采取肘静脉血5 ml，离心分离血清，－70℃保存用于血清网膜素、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物岐化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-px)的测定。应用双抗体夹心酶联免疫吸附法，采用美国RD公司试剂盒测定网膜素。采用南京建成生物工程研究所试剂盒，应用硫代巴比妥酸法测定MDA，黄嘌呤氧化酶法测定SOD，二硫代二硝基苯甲酸法测定GSH-px。

1．4 统计学处理

采用SPSS 20．0统计软件进行统计学分析。计量资料用均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用t检验。两组指标间的相互关系采用Pearson直线相关分析。P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 两组患者基线资料比较

高血压组男性38例，女性29例，年龄61～78(65.37±7.86)岁，DM 病程5～11(6.97±3.23)年，高血压病程3～12(6．69±3．84)年。非高血压组男性37例，女性31例，年龄60～79(65．89±7．56)岁，DM 病程5～10(6．21±3．46)年。两组患者年龄、性别和DM病程间差异均无统计学意义(P＞0．05)。

2．2 治疗前后各组检测指标水平比较

治疗前的组间比较结果显示:与对照组相比，两组患者的网膜素、SOD和GSH-px均显著降低，而MDA水平均显著增加，差异均具有统计学意义(P＜0．01);与非高血压组相比，高血压组患者的网膜素、SOD和GSH-px均进一步显著降低，而MDA水平进一步显著增加，差异均具有统计学意义(P＜0．01)。组内比较结果显示:与治疗前相比，高血压组患者的血清网膜素、SOD、GSH-px均显著升高，而血清MDA和MAP均显著降低，差异均具有统计学意义(P ＜0．01;表1)。

2．3 治疗前各组血清网膜素与其余各指标间相关性分析

在对照组和非高血压组中，血清网膜素与MDA(r对照= －0．062，r非高血压= －0．098)、SOD(r对照=0．104，r非高血压=0．101)、GSH-px(r对照=0．078，r非高血压=0．086)水平均无明显相关性(P＞0．05)。在高血压组中，血清网膜素水平与血清MDA(r=－0．587)和MAP(r= －0．542)水平呈显著负相关(P ＜0．01)，与SOD(r=0．683)和 GSH-px(r=0．596)水平呈显著正相关(P ＜0．01)。

3 讨论

随着社会进步和人们生活水平的不断提高，DM的发病逐年增加，DM合并高血压导致的心、脑血管事件与死亡严重威胁老年人健康。揭示老年DM合并高血压的发病机制已成国内外学者关注的热点。近年研究发现，脂肪组织产生的细胞因子脂联素、内脂素、瘦素在高血压发病中发挥重要的作用。网膜素是近年发现的由腹部网膜脂肪组织分泌的细胞因子。本研究结果显示，治疗前，合并高血压的老年DM患者血清网膜素水平较血压正常老年DM患者明显降低，合并高血压的老年DM患者血清网膜素水平与患者MAP呈明显负相关;治疗后，合并高血压的老年DM患者的血清网膜素水平升高、血压降低。提示血清网膜素水平降低参与了老年DM合并高血压发病的病理生理过程。

表1 治疗前后各组检测指标水平比较Table 1 Comparison of levels of indices before and after treatment among groups(±s)

表1 治疗前后各组检测指标水平比较Table 1 Comparison of levels of indices before and after treatment among groups(±s)

MAD:malondialdehyde;SOD:superoxide dismutase;GSH-px:glutathione peroxidase;MAP:mean artery pressure．Compared with control group，＊＊P ＜0．01;compared with non-hypertension group，##P ＜0．01;compared with before treatment，△△P ＜0．01

Control group(n=30)Non-hypertension group(n=58)Hypertension group(n=69)Index Before treatment After treatment Omentin(ng/ml) 57．63 ±5．28## 58．17 ±5．84## 45．96 ±4．87＊＊ 47．64 ±5．16＊＊ 32．48 ±3．52＊＊## 43．17 ±4．06 Before treatment After treatment Before treatment After treatment＊＊△△MDA(nmol/ml) 8．12 ±1．24## 8．64 ±1．56## 13．65 ±2．81＊＊ 12．16 ±3．05＊＊ 19．84 ±3．26＊＊## 12．65 ±2．74＊＊△△SOD(U/ml) 98．47 ±5．36## 97．69 ±5．28## 82．35 ±6．64＊＊ 84．28 ±7．36＊＊ 70．47 ±5．08＊＊## 89．52 ±6．31＊＊△△GSH-px(U/ml) 137．84 ±8．12## 138．76 ±9．07## 112．58 ±6．34＊＊ 115．37 ±7．68＊＊ 88．83 ±4．57＊＊## 110．48 ±6．12＊＊△△MAP(mmHg) 93．6 ±4．1 92．8 ±4．3 94．7 ±4．6 94．7 ±4．6 136．2 ±8．4＊＊## 97．5 ±5．2△△

网膜素水平降低导致老年DM患者血压升高的可能机制如下。(1)网膜素通过蛋白激酶介导的一氧化氮(nitric oxide，NO)合酶第1117位丝氨酸的磷酸化，增强NO合酶活性，促进血管内皮细胞NO合成［4］。NO是内皮舒张因子，具有扩张血管的作用［3］，网膜素水平降低使NO合成减少，从而促进血管收缩、增加外周循环阻力，最终导致血压升高。(2)网膜素可促进胰岛素介导的脂肪细胞摄取葡萄糖，增强胰岛素受体后信号通路中Akt B的磷酸化，从而增强胰岛素敏感性。血清网膜素水平降低导致胰岛素活性降低，引起高胰岛素血症和胰岛素抵抗［5］，而胰岛素抵抗又是引发高血压的重要原因。(3)网膜素通过抑制血小板生长因子BB和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH)氧化酶活性，阻断 P38/热休克蛋白27信号通路，抑制平滑肌细胞增殖迁徙和血管重塑［6］。血清网膜素水平降低引起血管平滑肌细胞增殖、血管壁重构、管腔变狭、外周循环阻力增加，从而导致老年DM患者发生高血压。

MDA是自由基攻击细胞膜多价不饱和脂肪酸过氧化的终产物，血清MDA水平反应机体氧化应激损伤的严重程度。SOD和GSH-px是人体内最主要的抗氧化酶，其水平高低反映机体清除自由基抗过氧化损伤的能力［7］。本研究结果显示，合并高血压老年DM患者血清MDA水平升高，SOD和GSH-px水平降低，表明该类患者的抗氧化能力降低，体内过氧化损伤增强，发生了氧化应激。

本研究结果显示，合并高血压的老年DM患者血清网膜素水平与血清MDA水平呈显著负相关、与血清SOD和GSH-px水平呈显著正相关。合并高血压的老年DM患者经过治疗后，血清网膜素、SOD和GSH-px水平升高，MDA水平降低，提示血清网膜素降低可能是发生氧化应激的重要原因，其可能机制如下。(1)胰岛素通过抑制NADPH氧化酶抑制体内脂质过氧化反应［8］，胰岛素能提高机体SOD水平并增强其活性，提高机体抗氧化能力［9］。网膜素降低，胰岛素活性降低，机体抗氧化能力减弱，发生氧化应激。(2)NO水平降低，激活核转录因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB)诱导自由基产生，导致氧化应激［10］。网膜素激活腺苷一磷酸(adenosine monophosphate，AMP)依赖的蛋白激酶使NO合酶磷酸化，促进血管内皮细胞合成NO［11］。网膜素水平降低，NO合成减少，导致合并高血压的老年DM患者发生氧化应激。(3)胰岛素抵抗是机体发生氧化应激的重要原因［12］。网膜素水平降低，胰岛素敏感性降低，加重胰岛素抵抗，导致合并高血压老年DM患者发生氧化应激。(4)网膜素可通过抑制平滑肌细胞中肿瘤坏死因子－α介导的自由基生成抑制氧化应激［13］。

本研究采用依那普利治疗老年DM合并高血压，结果表明其可提高患者网膜素水平，抑制氧化应激，可能机制如下。(1)依那普利通过降低血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)水平，改善胰岛素抵抗，促进网膜素生物合成［14］。(2)AngⅡ可通过激活NF-κB引起肾小管上皮等组织的炎症反应［15］。依那普利通过抑制AngⅡ产生，抑制炎症反应，提高血清网膜素水平。

总之，由血清网膜素水平降低引起的氧化应激反应增强，可能是老年DM患者合并高血压发病的重要原因之一。因此，提高血清网膜素水平，抑制氧化应激反应，可能成为防治老年DM合并高血压的一条新途径。

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