狂犬病活疫苗免疫后抗体检测结果及其分析

魏秋霞，杨 建，郭 莉，侯 巍，刘 梅

(1.四川省雅安市农业局动物疫病预防控制中心，四川 雅安 625000；2.四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610047；3.四川省芦山县农业局动物疫病预防控制中心，四川 芦山 625600)

狂犬病活疫苗免疫后抗体检测结果及其分析

魏秋霞1，杨 建1，郭 莉2，侯 巍2，刘 梅3

(1.四川省雅安市农业局动物疫病预防控制中心，四川 雅安 625000；2.四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610047；3.四川省芦山县农业局动物疫病预防控制中心，四川 芦山 625600)

为了解狂犬病活疫苗免疫效果，对雅安市8县(区)的农村犬(狂犬病活疫苗免疫后)进行随机抽样，用ELISA方法检测免疫抗体，对免疫抗体合格率及对免疫抗体合格率可能有影响的因素进行统计分析。结果发现，调查的犬抗体总合格率为77.68%，不同县(区)的犬血清免疫抗体合格率差异较大，最高的达到100%，最低的仅为40%；使用不同疫苗厂家疫苗、不同的免疫时间对狂犬病免疫抗体合格率均存在显著性影响。

狂犬病；免疫抗体；合格率；影响

狂犬病(Rabies)又称恐水症，是由狂犬病毒引起的一种人兽共患接触性传染病。我国是狂犬病疫情较严重的国家之一，人间病例数量一直位于各类传染病报告死亡数的前3位。感染犬仍是我国人狂犬病的主要传染来源，对犬只进行疫苗免疫是预防、控制狂犬病发生最有效的途径，而免疫后抗体水平的高低是评估实际免疫效果的重要指标。

我国狂犬病主要流行于农村，农村犬大多不进行拴养，犬之间以及犬与人的接触机会较多，存在较大的犬间狂犬病传播和人狂犬病发生风险。我市农村饲养犬占全市犬总数的80%以上，为了解农村犬狂犬病疫苗免疫效果，本试验对全市8县(区)农村犬随机抽样进行调查，以期为全市有效防控狂犬病提供一定的科学依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 试验疫苗 狂犬病活疫苗(Flury株)，分别来自国产疫苗厂家A、疫苗厂家B和疫苗厂家C。

1.1.2 血清样品 2016年7月4～12日，对我市8个县(区)内农村犬进行简单随机抽样，共计血清样品327份。按常规方法，采集犬血液进行血清分离(无严重溶血)，然后置于-20℃保存待用，使用前血清经56℃热灭活30min。

1.1.3 检测试剂 犬狂犬病毒抗体检测试剂盒(酶联免疫法)，购自深圳市康百得生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 犬只免疫时间和免疫剂量等情况 抽样犬只均为农村犬，所调查犬都进行了狂犬病疫苗免疫，且均为单联活疫苗，免疫时间均在2016年3～6月期间，免疫剂量严格按各厂家疫苗说明书使用，均免疫1次。

1.2.2 检测方法 严格按照厂家酶联免疫法试剂盒说明、检验方法操作，设置阳性、阴性及空白对照。

1.2.3 结果判定 只有阴性对照孔平均OD值≤0.15，临界对照平均OD值≥0.30，试验结果才有效。样本OD值≥临界对照OD值时，判为狂犬病毒抗体阳性，且抗体水平高于0.5IU/mL；样本OD值<临界对照OD值时，判为狂犬病毒抗体阴性,且抗体水平低于0.5IU/mL。

1.2.4 统计分析 所有数据用Microsoft Excel、SPSS19.0进行统计分析。

2 结果

2016年3～6月，全市各县(区)对辖区内犬只进行了摸底调查统计，并开展集中免疫。农村犬均采用单联活疫苗，农村犬免疫覆盖率达到了96.79%，本次调查采集的均为疫苗免疫后的犬血清样品。试验检测结果显示：阴性对照平均值<0.15(减去了空白对照)，临界对照平均值>0.70(减去了空白对照)，试验结果有效。

2.1 不同县(区)的犬狂犬病抗体检测情况

对327份犬血清样品进行狂犬病抗体的检测，结果有254份血清抗体水平合格，总合格率为77.68%。不同县(区)的犬血清抗体水平差异较大，最高的达到100%，最低的仅为40%。对不同区域犬的狂犬病抗体合格率进行分析，发现不同区域的犬抗体合格率存在差异，其中县E、县G与其它6个县(区)的合格率差异极其显著(P<0.01)。具体如表1所示。

表1 各县(区)狂犬病免疫抗体合格率比较

2.2 不同生产厂家的疫苗对免疫抗体合格率的影响

本次调查的犬免疫的均为狂犬病活疫苗，免疫程序均为1次/年，免疫保护期为1年。共采集了327只犬的血清样品。其中177只犬使用了国产疫苗A，62只犬使用了国产疫苗B，88只犬使用了国产疫苗C，抗体合格数、合格率如表2所示。经统计分析发现，3个厂家的疫苗免疫后抗体合格率均在70%以上，疫苗A、疫苗B免疫所产生的抗体合格率差异不大，但二者免疫抗体合格率与疫苗C差异极其显著(P<0.01)。

表2 不同疫苗厂家对狂犬病免疫抗体合格率影响

2.3 不同免疫时间对免疫抗体合格率影响

如表3所示，此次检测样品按这4个免疫时间段统计，每个时间段免疫的抗体合格率均大于70%，免疫时间与抗体合格率之间存在相关性，差异显著，尤其是6月以后免疫的抗体合格率(6月后免疫时间已达到狂犬病疫苗免疫后要求的监测时间间隔)与其它3组的合格率差异极其显著(P<0.01)。

表3 免疫时间对免疫抗体合格率影响

3 讨论

世界卫生组织(WHO)认为，预防人类狂犬病最具成本效益的战略是为犬类接种疫苗并消除犬类狂犬病。目前国际上公认犬有效免疫率达到70%以上，即可有效控制狂犬病的传播。因此，要控制狂犬病在人间传播，对本地区的犬类进行狂犬病疫苗的免疫及免疫效果评价尤为重要。本次监测调查结果显示，全市犬只免疫抗体总合格率为77.68%，达到了70%的标准，但不同区域之间存在较大差异，有两个县(区)合格率分别仅为40%、55%。现在农村犬大多不进行拴养，犬之间以及犬与人的接触机会较多，存在较大的犬间狂犬病传播和人狂犬病发生风险。检测结果经单因素统计分析发现，使用不同疫苗厂家疫苗、免疫时间不同对狂犬病免疫抗体合格率均存在显著性影响，这可能与采样方式、采样数量及疫苗效果等因素有关。

综上所述，本次免疫抗体检测对全市8个县(区)农村犬进行随机采样，发现不同区域之间狂犬病抗体合格率存在较大差异，免疫效果存在区域不均衡性；使用不同厂家同类型疫苗以及免疫时间两因素与犬的狂犬病抗体合格率存在统计学相关性。本次监测大部分县(区)免疫抗体合格率达到了世界卫生组织(WHO)推荐的70%的有效免疫保护率标准，结合近几年本市未出现狂犬病人间病例情况，总体认为雅安市对狂犬病的防控效果较好，但也存在个别县免疫抗体合格率较低的情况，说明部分区域仍存在发生狂犬病的风险。今后，应针对不同县(区)的实际情况，进一步查找原因，重点进行补免、监测等防控。

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2017-2-22

魏秋霞,硕士研究生,主要从事动物疫病预防控制工作。E-mail：weiqx905@163.com。