阿奇霉素不同剂型的溶出度方法学研究

李娇娜+顾先志

摘 要：建立反相高效液相色谱法测定阿奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的含量并考察溶出度。方法：采用安捷伦C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），磷酸盐缓冲液（取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%的磷酸溶液调节pH至8.2）-乙腈（45∶55），检测波长为210nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。阿奇霉素在6～72μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。结论：本法简便、准确，可用于阿奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的溶出度方法学研究。

关键词：阿奇霉素；含量；测定

阿奇霉素为半合成的十五元环大环内酯类抗生素。白色或类白色结晶性粉末；无臭，味苦；微有引湿性。阿奇霉素适应沙眼衣原体及非多种耐药淋病奈瑟菌所致的尿道炎和宫颈炎；化脓性链球菌引起的急性咽炎、急性扁桃体炎；肺炎链球菌、流感嗜血杆菌以及肺炎支原体所致的肺炎；敏感细菌引起的鼻窦炎、中耳炎、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作；敏感细菌引起的皮肤软组织感染等。溶出度是指药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。本实验采用高效液相色谱法对阿奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片中的阿奇霉素的进行了含量测定并考察溶出度。

1 仪器与试药

1.1 仪器：756PC紫外可见分光光度计（四川汇巨仪器设备有限公司）；KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；实验室高纯水机（上海技舟化工科技有限公司）；LC-4000单泵液相色谱仪（山东金普分析仪器有限公司）；FA1204CFAC型全自動內校電子分析天平（北京同德创业科技有限公司）；HH-601超级恒温水浴（北京富瑞恒创科技有限公司）；RCZ-8智能溶出试验仪（北京新诺立华仪器有限公司）。

1.2 色谱柱：安捷伦 C18 色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。

1.3 对照品：阿奇霉素 购自中国药品生物制品检定所。

1.4 试剂：磷酸氢二钾（北京亚太龙兴化工有限公司）、磷酸（北京亚太龙兴化工有限公司）、乙腈（北京亚太龙兴化工有限公司）、三乙胺（南京大唐化工有限公司）、甲醇（北京亚太龙兴化工有限公司）。水为纯化水。

1.5 试药：阿奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片

2 测定方法确定

2.1 色谱条件

分别考察甲醇-水（80∶20），磷酸盐缓冲液（取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%的磷酸溶液调节pH至8.2）-乙腈（45∶55），甲醇-0.1moloL-1磷酸二氢钾-三乙胺（50∶50：0.01），甲醇-水（92∶18）不同比例的流动相，结果以磷酸盐缓冲液（取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%的磷酸溶液调节pH至8.2）-乙腈（45∶55）为流动相为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用磷酸盐缓冲液（取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%的磷酸溶液调节pH至8.2）-乙腈（45∶55）为流动相为流动相。依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。流动相：磷酸盐缓冲液（取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用20%的磷酸溶液调节pH至8.2）-乙腈（45∶55），检测波长：210nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按阿奇霉素峰计算应不得低于2000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取阿奇霉素对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含10μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取装量差异项下的供试品精密称定，精密称取，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相10mL，密塞，精密称定重量，超声处理10分钟，放冷，精密称定，用流动相补足重量，摇匀，滤过。取续滤液，即得。

2.4 精密度试验

精密称取阿奇霉素对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为10μg·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.63%，表明本方法精密度良好。

2.5 对照品的线性考察

精密称取阿奇霉素对照品15mg，置25ml容量瓶中，加入流动相溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.1、0.2、0.4、0.6、1.2mL，置于10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，阿奇霉素在6～72μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

2.6 重现性试验

称取同一批的阿奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.93%、0.67%、0.96%，结果表明此方法的重现性良好。

2.7 准确度试验

精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的阿奇霉素对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.1%、99.2%、99.5%，RSD=0.56%、RSD=0.63%、RSD=0.81%。结果表明此方法的回收率良好。

2.8 样品稳定性试验

取同一批阿奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片样品，按2.3项下的供试品制备方法制备供试品，将供试品置室温下放置，分别于第0、2、4、6、8、10小时，精密吸取供试品溶液10？l注入液相色谱仪中，记录色谱图。测定阿奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的RSD=0.73%、RSD=0.71%、RSD=0.69%。结果表明供试品10小时内稳定。

2.9 溶出度测定

照溶出度测定法（中国药典2015版二部附录ⅩC第二法）[1]及《中国药品检验标准操作規程》对奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片溶出度进行测定。

3 讨论

本实验表明此方法可用于阿奇霉素片、阿奇霉素胶囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的含量测定。溶出度实验结果表明，三种剂型体外溶出度均符合有关规定，三种剂型之间有一定差异。

参考文献

[1]刘红梅，李欣，方光娟.反相高效液相色谱法测定乳糖酸阿齐霉素注射剂的含量[J].哈尔滨医科大学学报，2000（03）.

[2]纪标，王东凯，薛梅妍，李志强，徐飒.HPLC法测定注射用门冬氨酸阿奇霉素的含量和有关物质[J].中国抗生素杂志，2005（06）.

[3]黄蓓琳，吴涓，王国平.高效液相色谱法测定阿奇霉素普通片和分散片含量[J].中国医院药学杂志，2005（03）.

[4]纪标，王东凯，薛梅妍，李志强，徐飒.HPLC法测定注射用门冬氨酸阿奇霉素的含量和有关物质[J].中国抗生素杂志，2005（06）.

[5]易秋艳，范时根，杨梁.HPLC法测定注射用阿奇霉素的有关物质[J].西南国防医药，2008（05）.