宁夏部分地区规模化奶牛场4种疫病的血清学调查分析

郭亚男，曹思婷，何生虎，王 爽，张 鑫，孙 鹏，雷元元，马 烨

(宁夏大学农学院，宁夏银川 750021)



宁夏部分地区规模化奶牛场4种疫病的血清学调查分析

郭亚男，曹思婷，何生虎*，王 爽，张 鑫，孙 鹏，雷元元，马 烨

(宁夏大学农学院，宁夏银川 750021)

为了解宁夏主要奶牛养殖区规模化奶牛场牛传染性鼻气管炎(IBR)、牛病毒性腹泻(BVD)、新孢子虫抗体和布鲁菌病原的流行状况，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对未接种过IBR、BVD、新孢子虫疫苗、接种过布鲁菌疫苗的奶牛群体进行血清抗体检测，并对银川、吴忠和青铜峡地区的阳性状况进行分析。结果发现，76份流产牛血清中，IBR抗体阳性率为50.00%(38/76)，BVD抗体阳性率为19.74%(15/76)，新孢子虫抗体阳性率为27.63%(21/76)，布鲁菌阳性率为19.74%(15/76)，4种病原均感染的阳性率为34.21%(26/76)，IBR和新孢子虫混合阳性率占总阳性率的34.62% ；408份非流产牛血清中，BVD抗体阳性率为12.75%(52/408)，IBR抗体阳性率为21.08%(86/408)；IBR和BVD在宁夏的3个主要养殖区均有不同程度的流行，其中以银川地区阳性率最高。说明宁夏部分地区IBR和BVD在不同的地区存在着不同程度的感染，流产牛中普遍存在上述4种疫病的感染并且IBR和BVD阳性率明显高于非流产牛。

奶牛；牛传染性鼻气管炎；牛病毒性腹泻；新孢子虫病；布鲁菌病

随着集约化、规模化饲养的快速发展，牛传染性鼻气管炎(Infective bovine rhinotracheitis，IBR)、牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhoea，BVD)、新孢子虫和布鲁菌等感染引起的疾病逐渐成为影响奶牛饲养的重要疾病， 此类疾病传播快、治愈率低、危害性大。IBR、BVD、新孢子虫、布鲁菌不仅导致牛群出现群发性临床症状，影响牛群的生长发育和生产性能，而且也可导致不孕、流产等繁殖性症状。BVD阳性可导致牛群的免疫抑制，继而造成疾病高发，给集约化生产造成巨大的经济损失[1]。研究表明，IBR常常与BVD同时发生[2]。近年已有北京、上海、河北、安徽、山东、河南、重庆、广西、辽宁、新疆、内蒙古等地对这4种疾病调查的相关报道，但尚未见宁夏主要奶牛养殖区对这4种病原流行状况和非流产牛IBR与BVD发病状况的相关报道[2-6]。为了调查宁夏地区流产奶牛群中IBR、BVD、新孢子虫、布鲁菌感染的流行状况及非流产牛IBR与BVD的流行情况，对宁夏主要奶牛养殖地区规模化养殖场进行抽样调查，为宁夏地区奶牛场IBR、BVD、新孢子虫病、布鲁菌病的防控及净化提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样本 从宁夏银川、吴忠、石嘴山市周边的14个规模化奶牛场随机采集的408份非流产牛血清；从吴忠地区3家奶牛场采集具有流产史的奶牛血清样本76份。采样牛群未接种过IBR、BVD、新孢子虫疫苗，接种过布鲁菌疫苗。

1.1.2 主要试剂 牛新孢子虫抗体(N.caninum-Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒、牛病毒性腹泻抗体(BVD Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒、牛传染性鼻气管炎抗体(IBR Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒、牛布鲁菌病(Brucellosis)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒均为武汉基因美生物科技有限公司产品。

1.2 方法

采用ELISA对宁夏吴忠地区3个规模化奶牛场有流产史的奶牛血清样品进行IBR、BVD、新孢子虫抗体和布鲁菌抗原检测，宁夏主要奶牛养殖区规模化奶牛场的408份非流产牛血清进行IBR和BVD抗体检测。IBR、新孢子虫、BVD检测：采用双抗原夹心ELISA检测相关病原特异性抗体，用于诊断血清中是否存在IBR、新孢子虫、BVD抗体，具体参考武汉基因美生物科技有限公司试验操作说明书。布鲁菌检测：用双抗夹心ELISA法检测布鲁菌的特异性抗原，用于布鲁菌的定性诊断，具体步骤参考武汉基因美生物科技有限公司试验操作说明书。

2 结果

2.1 流产牛血清样品检测结果

由表1可知，对吴忠地区的76份流产牛血清进行了BVD、IBR、新孢子虫抗体和布鲁菌检测， IBR抗体阳性血清38份，阳性率为50.00%，强阳性血清2份，强阳性率为2.63%；BVD抗体阳性血清15份，阳性率为19.74%，强阳性血清2份，强阳性率为2.63%；新孢子虫抗体阳性血清21份，阳性率为27.63%，强阳性血清1份，强阳性率为1.32%；布鲁菌阳性血清15份，阳性率为19.74%，强阳性血清4份，强阳性率为5.26%；4种疫病混合阳性的阳性血清26份，阳性率为34.21%。因此，在76份流产牛血清中，阳性血清总数量为44份，总阳性率为57.89%。

由表2和图1可知，在26份混合阳性的阳性血清中，IBR和新孢子虫混合阳性的阳性率占总阳性率的34.62%，4种疫病都阳性的阳性率占总阳性率的23.08%，IBR、BVD和布鲁菌混合阳性的阳性率占总阳性率的11.54%，其余的混感阳性率在总阳性率中所占的比例均在8%以下。

2.2 非流产牛血清样品检测结果

由表3可知，在检测的408份非流产牛血清中，BVD抗体阳性血清52份，阳性率为12.75%，强阳性血清14份，强阳性率为3.43%；IBR抗体阳性血清86份，阳性率为21.08%，强阳性血清13份，强阳性率为3.19%；IBR和BVD混合阳性的阳性率为9.56%。

表1 流产牛血清样本BVD、IBR、新孢子虫抗体和布鲁菌检测结果

表2 流产牛血清样本4种疫病混合阳性统计结果

表3 非流产牛血清样品BVD和IBR抗体检测结果

1.IBR和新孢子虫混合阳性；2.IBR和BVD混合阳性；3.IBR和布鲁菌病混合阳性；4.新孢子虫和BVD混合阳性；5.新孢子虫和布鲁菌病混合阳性；6.BVD和布鲁菌病混合阳性；7.IBR、新孢子虫和BVD混合阳性；8.IBR、新孢子虫和布鲁菌病混合阳性；9.IBR、BVD和布鲁菌病混合阳性；10.新孢子虫、BVD和布鲁菌病混合阳性；11.新孢子虫、IBR、BVD和布鲁菌病混合阳性

2.3 IBR和BVD地区流行情况

在调查宁夏银川、吴忠和青铜峡的12个规模化奶牛养殖场中，IBR最高阳性率为53.75%，最低阳性率为0，BVD的最高阳性率为23.75%，最低阳性率为0；3个地区的IBR的平均阳性率为21.08%，BVD的平均阳性率为12.75%。说明银川、吴忠和青铜峡地区均存在IBR和BVD病原，其中银川地区较为严重。

3 讨论

临床上可引起孕牛流产的病因很多，主要由传染性因素造成，如布鲁菌、BVDV、IBRV、衣原体、牛沙门菌、李斯特菌、牛弯曲菌、中山病原、赤羽病原、新孢子虫、弓形虫等病原。一般情况下，妊娠奶牛有3%～8%的流产率是正常现象[7-9]。本研究对BVD、IBR、新孢子虫病和布鲁菌病4种疾病进行了血清学检测，在对吴忠地区具有流产史的76份奶牛血清进行BVD、IBR、新孢子虫抗体和布鲁菌检测发现，BVDV、IBRV、新孢子虫抗体和布鲁菌病原检测为阳性的流产牛血清份数占总血清份数的57.89%，其中混合阳性的流产牛血清份数占流产牛血清总份数的34.21%，IBR和新孢子虫混合阳性的流产牛血清份数占混合阳性总血清份数的34.62%。以上数据可以表明， BVD、IBR、新孢子虫病和布鲁菌病等疾病在具有流产史奶牛群中发病率较高，其中具有两种以上病原阳性史的奶牛为主，并且在混合感染的奶牛中以IBR和新孢子虫感染率较高。故在牛场应针对BVD、IBR、新孢子虫病和布鲁菌病进行重点预防，及早采取净化处理措施。

表4 银川、吴忠和青铜峡地区IBR、BVD流行情况

在检测BVD和IBR的 408份血清中，BVD和IBR抗体阳性率分别为12.75%和21.08%， 低于流产牛的BVD阳性率(19.74%)和IBR阳性率(50.00%)；银川、吴忠、青铜峡3个地区12个奶牛场中有9个奶牛场检出了BVD和IBR阳性血清，并且在不同的奶牛场阳性率不同，其中银川地区BVD和IBR阳性率相对高，BVD和IBR在同一场区均可检测到。说明BVD和IBR在流产牛中发病率高于非流产牛，可能是引起奶牛流产的原因，但抗体阳性只能说明该牛曾感染过或正在感染该病原，要确定BVD和IBR是否是引起奶牛流产的病因还需进行病原学调查；银川、吴忠、青铜峡3个地区均有BVD和IBR抗体阳性，其中银川地区较为严重，可能与近年来宁夏地区大力发展奶牛业，从甘肃、内蒙、新疆等地大量购买奶牛，没有进行BVD和IBR等疫病的检疫之故。BVDV感染牛主要引起肠炎、腹泻、呼吸综合征、先天性缺陷、免疫抑制、繁殖障碍、急性和慢性黏膜病以及母畜流产、产死胎和畸形胎等症状[10]。BVDV急性和持续性感染可导致牛群体液和细胞免疫机能受到抑制，造成感染性疾病高发[11-12]；IBRV侵入牛体后，潜伏在三叉神经节等部位，病牛长期甚至终生带毒，且可经空气和接触传染，经过产道传染给犊牛使新生犊牛带毒，给本病的控制和净化带来了困难[13-15]。因此，养殖中应做好对IBR和BVD两种疫病的检疫，并采取相应的措施进行防控。目前国内尚缺乏这两种疫病的疫苗及有效的治疗药物，应以预防为主，提高饲养管理水平，定期检疫，发现病牛及时隔离并淘汰带毒牛。

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Parts of Ningxia Large-Scale Dairy Farm Four Kinds of Disease Serological Survey Analysis

GUO Ya-nan,CAO Si-ting,HE Sheng-hu,WANG Shuang,ZHANG Xin,SUN Peng,LEI Yuan-yuan,MA Ye

(CollegeofAgronomy,NingxiaUniversity,Yinchuan，Ningxia，750021，China)

In order to investigate the prevalence of Bovine infectious rhinotracheitis (IBR), Bovine viral diarrhea (BVD),Neosporacaninumand Brucella in large-scale dairy farming in Ningxia, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the serum of cows without inoculation of IBR, BVD,Neosporacaninumand inoculated caninum Brucella vaccine, and the prevalence of Yinchuan, Wuzhong and Qingtongxia areas were analyzed. The results showed that; in the serum of 76 abortive cows, IBR positive rate was 50.00% (38/76), BVD positive rate was 19.74% (15/76),Neosporacaninumpositive rate was 27.63% (21/76),Brucellapositive rate was 19.74% (15/76), the positive rate that four kinds of pathogenswhich wasinfected was 34.21% (26/76), the mixed positive rate of IBR andNeosporacaninumaccounted for 34.62% of the total positive rate. In the serum of 408 non-abortive cows, BVD positive rate was 12.75% (52/408), IBR positive rate was 21.08% (86/408). In three major dairy farming areas in Ningxia, IBR and BVD had different prevalence, and highest positive rate was in Yinchuan.In summary, the IBR and BVD pathogens were different in different regions of Ningxia. There were 4 kinds of pathogen infection and IBR and BVD positive rate in abortive cows was significantly higher than thenon-abortive cows.

Dairy cow;IBR; BVD;Neosporacaninum;Brucella

2016-04-13

郭亚男(1991-)，男，河南南阳人，硕士研究生，主要从事兽医临床诊断基础研究。*通讯作者

S852.4

B

1007-5038(2017)05-0123-04