URSA患者血清IL-2、IL-10及MCP-1与细胞免疫功能相关性研究

侯 俐，宋晓婕，印贤琴，张 清，田 萍，刘丽平，程 春

（武汉市妇女儿童医疗保健中心妇产科，武汉 430000）

URSA患者血清IL-2、IL-10及MCP-1与细胞免疫功能相关性研究

侯 俐，宋晓婕，印贤琴，张 清，田 萍，刘丽平，程 春

（武汉市妇女儿童医疗保健中心妇产科，武汉 430000）

目的：探究原因不明复发性流产（URSA）患者外周血中IL-2、IL-10及MCP-1与细胞免疫功能相关性。方法：选取2014年6月～2016年4月我院收治的71例原因不明复发性流产患者作为观察组，选取76例行人工流产的妇女作为对照组。结果：观察组患者E2水平明显高于对照组，差异具有统计学意义；观察组患者IL-2水平高于对照组，观察组患者血清IL-10、MCP-1水平低于对照组，差异均具有统计学意义；观察组患者CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平明显高于对照组，差异均具有统计学意义；观察组患者血清IL-2与CD4+/CD8+呈现正相关，IL-10、MCP-1与CD4+/CD8+呈现负相关。结论：URSA可能与体内Th1/Th2细胞因子失衡有关，IL-2，IL-10、MCP-1异常表达可能会引起免疫功能异常从而引发复发性流产。

原因不明复发性流产；白细胞介素-2；白细胞介素-10；单核细胞趋化蛋白

原因不明复发性流产（Unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA）是一种由于不明原因引起的妊娠28周内多于2次以上的自然流产，其病因较为复杂多样［1］，占复发性流产妇女的一般以上，对广大育龄期妇女的生殖健康危害较大，临床上难防难治。近年来有研究指出，引起妇女发生URSA的病因可能与母体免疫功能异常有关［2，3］，其中母体内免疫细胞异常分泌的大量细胞因子可能对胚胎的发育和生产产生不良的影响，这可能与Th1与Th2型细胞因子分泌失衡有关［4］。此外单核细胞趋化蛋白（MCP-1）具有趋化性，可激活体内中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞的活性，产生大量细胞因子，可能会对URSA的发生产生影响。本文主要通过探究URSA患者外周血中IL-2、IL-10及MCP-1与细胞免疫功能相关性，为URSA治疗和发病机制的研究提供参考。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2014年6月～2016年4月我院收治的71例原因不明复发性流产患者作为观察组，平均年龄（28.9±2.1）岁，平均停经时间（59.1±4.3）d。选取76例行人工流产的妇女作为对照组，其平均年龄（29.4±2.8）岁，平均停经时间（58.6±5.2）d。两组患者在年龄、体质指数（BMI）、停经时间、吸烟及饮酒史资料比较上，差异均无统计学意义（P＞0.05），组间具有可比性，详细情况见表1。

观察组患者诊断按照《实用妇产科学（第二版）》中URSA诊断标准［5］进行，观察组患者自然流产2次及以上，彩超提示有胎芽，无胎心搏动。排除性染色体异常、生殖器官病变及异常、高血糖、甲状腺激素异常、生殖系统细菌性感染、凝血功能障碍、自身免疫性疾病及长期服用化疗及免疫抑制剂的患者。

1.2 检测方法 抽取两组患者静脉血5mL，离心后（1500r/min）取其上层血清置于-20摄氏度环境下进行保存。采用性激素六项试剂盒分别测量两组患者促卵泡成熟激素（FSH）、催乳素（PRL）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、睾酮（T）水平。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法对两组患者血清中白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）及单核细胞趋化蛋白（MCP-1）水平进行测定。采用流体细胞仪测定两组患者外周血中CD4+、CD8+细胞亚群的百分率。

1.3 观察指标 两组患者性激素FSH、PRL、LH、E2、T水平比较；血清IL-2、IL-10及MCP-1水平比较；CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平比较；观察组患者血清IL-2、IL-10、MCP-1与CD4+/CD8+相关性分析。

1.4 统计学方法 采用SPSS21.0软件对收集的数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差表示，进行t检验。计数资料使用卡方（χ2）检验。相关性分析采用Pearson相关性检验。P＜0.05定义为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者性激素水平比较 观察组患者E2水平明显高于对照组，差异具有统计学意义（t=3.592，P＜0.001），两组患者在FSH、PRL、LH、T激素水平比较上，差异均无统计学意义（P＞0.05）。详细情况见表2。

表2 两组患者性激素水平比较

2.2 两组患者血清IL-2、IL-10及MCP-1水平比较

观察组患者IL-2水平高于对照组，差异有统计学意义（t=20.90，P＜0.001），观察组患者血清IL-10（t=21.68，P＜0.001）、MCP-1（t=6.037，P＜0.001）水平低于对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。详见表3。

表3 两组患者血清IL-2、IL-10及MCP-1水平比较

2.3 两组患者免疫功能相关指标比较 观察组患者CD4+（t=9.841，P＜0.001）、CD8+（t=2.305，P=0.023）及CD4+/CD8+（t=4.669，P＜0.001）水平明显高于对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。

表4 两组患者CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平比较

2.4 观察组患者血清IL-2、IL-10、MCP-1与CD4+/ CD8+相关性分析 经Pearson检验发现，IL-2、IL-10、MCP-1与CD4+、CD8+均无线性相关关系，而观察组患者血清IL-2与CD4+/CD8+呈现正相关（r=0.479，P＜0.001），IL-10、MCP-1与CD4+/CD8+呈现负相关（r=-0.512，-0.421；P＜0.001）。详见图1。

图1 观察组患者血清IL-2、IL-10、MCP-1与CD4+/CD8+相关性分析

3 讨论

导致复发性流产的病因较多，目前临床上认为与母体染色体异常、体内激素分泌异常、生殖系统感染、生殖器官病变与先天性异常等因素有关。可明确病因的复发性流产患者只占50%左右，另外50%的URSA的病因现如今尚未研究清楚［6］。但有学者认为可能与母胎界面免疫耐受、甲状腺抗体水平上调、胎盘血供不足等原因有关［7，8］。尽早明确URSA发病机制对其早期防治具有重要的临床价值与意义。

本研究发现，观察组患者E2水平明显高于对照组，差异具有统计学意义，说明体内E2水平异常升高可能会URSA的发生。E2是由卵巢成熟滤泡分泌的一种性激素，对妇女生殖器官的发育起到重要的作用，其异常上升高可能与卵巢早衰症状的出现有关［9］。IL-2主要由CD4 Th1型细胞产生，能够促进白血球的活性，此外还能诱导NK细胞的增殖，可与TNF-a因子协同作用产生细胞毒作用［10］。IL-10是一种负性调节因子，主要由Th2细胞产生，可以拮抗相关炎症介质，起到下调炎症反应的作用［5］。MCP-1对单核和淋巴细胞具有较强的趋化作用，此外妊娠反应中滋养叶细胞中也可分泌少量MCP-1，随着孕周的增加，孕妇MCP-1的水平上升明显，与胚胎的发育密切相关［11］。我们研究发现，观察组患者IL-2水平高于对照组，观察组患者血清IL-10、MCP-1水平低于对照组，差异均具有统计学意义，说明URSA可能与血清中IL-2上调，IL-10、MCP-1下调有关，可间接反映体内Th1/Th2型细胞因子分泌失衡，有研究表明，Th2型细胞及相关细胞因子异常表达可能会造成产妇发生自然流产［12］。与本研究结果一致。此外，观察组患者CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平明显高于对照组，提示USRA的发生与体内免疫功能异常有关，有研究指出，孕妇CD4+水平升高可能会引起排斥反应增强，CD8+上调可抑制体内细胞免疫，抑制超敏反应的发生［13］。观察组患者血清IL-2与CD4+/CD8+呈现正相关，IL-10、MCP-1与CD4+/CD8+呈现负相关，说明URSA的发生与体内免疫功能失衡有关，CD4+/CD8+比值上调可能与体内Th1/Th2细胞因子失衡有关，可为临床治疗提供依据。

综上所述，URSA可能与体内Th1/Th2细胞因子失衡有关，IL-2，IL-10、MCP-1异常表达可能会引起免疫功能异常从而引发复发性流产。

［1］ Talebi AR, Fesahat F, Mangoli E, et al. Relationship between sperm protamine deficiency and apoptosis in couples with unexplained repeated spontaneous abortions［J］. Int J Reprod Biomed (Yazd), 2016, 14(3): 199-204.

［2］ 陈广莉, 徐又先, 明芳. 血清脂联素和瘦素在原因不明复发性流产中的作用〔1〕［J］. 临床医药实践, 2013, 22(8): 574-575.

［3］ 黑江荣, 呼改琴. 早期妊娠性激素水平与先兆流产的关系研究［J］.湖南师范大学学报 (医学版), 2014, 11(3): 44-46.

［4］ 仇笑笑, 何泽现, 王健, 等. hmgb1与原因不明复发性流产的关系.免疫学杂志.2016.32(4): 346-350.

［5］ 路祥会, 王绍娟. ursa患者外周血细胞因子il-10、rantES的研究［J］.齐齐哈尔医学院学报, 2015, 0(28): 4223-4225.

［6］ 庞丽红,李敏清,杨冬梅,等.可溶性血管内皮生长因子受体-1(sflt-1) 与不明原因复发性流产的相关性研究［J］. 生殖与避孕, 2011, 31(1): 58-61.

［7］ 谢晓芳, 张静. mif与vegf在原因不明早期复发性流产患者血清和蜕膜中的表达及意义［J］. 南昌大学学报: (医学版), 2013, 53(7): 36-39.

［8］ 袁秀红, 罗晓梅, 薛娟, 等. 血清β-HCG 及孕酮检测在先兆流产的临床应用研究［J］. 湖南师范大学学报 (医学版), 2015, (4): 49-51.

［9］ 姚婷, 金志春. 不明原因复发性流产的研究进展［J］. 中西医结合研究, 2014, 6(4): 208-210.

［10］ 伍金华, 谢志威, 车小群, 等. 原因不明复发性流产患者外周血pd-1、th1/th2型细胞因子水平测定及其相关性研究［J］. 中华临床医师杂志 (电子版), 2014, 8(9): 1-4.

［11］ 杨素娟, 赵志明, 王玮, 等. 趋化因子与复发性流产相关性的临床研究［J］. 河北医药, 2016, 38(9): 1403-1404.

［12］ 邱佩佩, 李小英. 原因不明复发性流产患者th1/th2型细胞因子的表达分析［J］. 中国妇幼保健, 2015, 30(9): 1414-1416.

［13］ 王芳, 刘瑞霞, 王英兰, 等. 低分子肝素对ursa患者外周血免疫细胞的影响［J］. 中国优生与遗传杂志, 2014, (6): 66-68.

The study on correlation of serum IL-2, IL-10, MCP-1 with cellular immune function in URSA patients

Hou Li, Song Xiao-jie, Yin Xian-qin, Zhang Qing, Tian Ping, Liu Li-ping, Chen Chun
(Women and Children Health Care Center In Wuhan City, Wuhan, 430000 China)

Objective To investigate correlation of serum IL-2, IL-10, MCP-1 with cellular immune function in URSA patients. Methods 71 cases of unexplained recurrent spontaneous abortion were selected as the observation group from April 2016 to June 2014, 76 women with artificial abortion were selected as the control group. Results The level of E2 in the observation group was significantly higher than control group, the difference was statistically significant; IL-2 of the observation group was higher than the control group, serum IL-10, MCP-1level is lower than the control group, the differences were statistically significant; CD4+, CD8+and CD4+/CD8+ levels in observation group were significantly higher than the control group, the difference was statistically significant; IL-2of observation group showed positive correlation with CD4+/CD8+, IL-10, MCP-1 showed a negative correlation with CD4+/CD8+. Conclusions URSA may be related to the imbalance of Th1/Th2 cytokine in vivo, IL-2, IL-10, MCP-1 abnormal expression may cause abnormal immune function and thus lead to recurrent abortion.

unexplained recurrent spontaneous abortion; IL-2; IL-10; MCP-1

R714.21

A

1673-016X（2017）02-0122-03

2017-01-21

侯俐，E-mail:chen1juan2@163. com