新疆乌鲁木齐市牛羊流产原因分析

王 涛，李爱巧，吴星星，蔡扩军，杨启元，马卫平，王文秀，王六合，陈发喜，季新成，史 茜，钟 旗

（1. 乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心，新疆乌鲁木齐 830063；2. 新疆进出口检疫检验局技术服务中心，新疆乌鲁木齐 830063；3. 新疆畜牧科学院兽医研究所，新疆乌鲁木齐 830063）

新疆乌鲁木齐市牛羊流产原因分析

王 涛1，李爱巧1，吴星星1，蔡扩军1，杨启元1，马卫平1，王文秀1，王六合1，陈发喜1，季新成2，史 茜2，钟 旗3

（1. 乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心，新疆乌鲁木齐 830063；2. 新疆进出口检疫检验局技术服务中心，新疆乌鲁木齐 830063；3. 新疆畜牧科学院兽医研究所，新疆乌鲁木齐 830063）

[目的]确定引发牛 羊流产的主要原因，从而提出科学有效的综合防控措施。[方法]采用疫病监测和流行病学调查方法，从饲养管理、疫病流行、流产情况、疫苗免疫等方面进行分析。[结果]分析认为：疫病是造成牛羊流产的主要原因，其中引发羊流产的主要是布鲁氏菌病和衣原体病，而引发牛流产的疫病具有多样性；饲养管理不善、饲草缺乏、环境条件差、消毒和卫生清扫不彻底、疫苗免疫应激等非疫病性因素也是引起牛流产的重要原因。[结论]分析结果提示：对羊应实施布鲁氏菌病、衣原体病免疫，对牛应加强饲养管理和卫生消毒；减少疫病的发生是防控牛羊流产的有效措施。

牛羊；流产原因；流行病学调查；布鲁氏菌病；衣原体病；Q热；新孢子虫；弓形虫

流产是指妊娠中断，其危害甚大，不仅使胎儿夭折或发育不良，而且常损害母畜健康，影响繁殖能力，甚至导致不育，严重时还会危及母畜生命。引起牛羊流产的原因非常复杂，主要分为疫病性因素和非疫病性因素。由非疫病性因素引起的流产主要包括饲料性流产、损伤及管理性流产、药物性流产、中毒性流产，以及疫苗免疫注射等引起的应激反应导致的流产等[1]。由疫病性因素引起的流产包括：寄生虫病性流产，如新孢子虫、弓形虫引起的流产；传染性疫病性流产，如口蹄疫、小反刍兽疫、布鲁氏菌病、衣原体病、Q热、蓝舌病等引起的流产[2-6]。

近几年，在春冬产羔季节，新疆乌鲁木齐市天山一带牧区的牛羊频繁发生流产事件，为查清流产原因，减少农牧民损失，通过开展疫病监测和流行病学调查，从饲养管理、疫病流行、流产情况、疫苗免疫等[7-10]方面进行分析，了解引发牛羊流产的主要原因，并提出防控措施，供同行借鉴。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 布鲁氏菌病、衣原体病、牛Q热检测所用试剂。Taq DNA聚合酶（2.5 U/μL ）、DNA纯化回收试剂盒、质粒小提试剂盒、血液基因组DNA提取系统和DNA Zol，购自天根生物技术（北京）有限公司；DL 2000 DNA Maker，购自鼎国昌盛生物技术（北京）有限责任公司；dNTP、限制性内切酶 EcoR I、pMD18-T载体等，购自宝生物工程（大连）有限公司。引物由上海生工生物有限公司合成。

1.1.2 试剂盒。布鲁氏菌普通PCR检测试剂盒，北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产；弓形虫检测试剂盒，北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产，批号20140311；新孢子虫检测试剂盒，瑞典Svanova公司生产，批号P06137。

1.2 方法

1.2.1 疫病监测。收集乌鲁木齐市2012—2016年流产胎儿和对应母畜的全血、血清样品和奶样，针对可能引起牛羊流产的疫病开展病原学监测。检测由新疆进出口检疫检验局技术服务中心实施。检测疫病种类包括：布鲁氏菌病、衣原体病、牛Q热、新孢子虫病、弓形虫病等。布鲁氏菌病、衣原体病、牛Q热检测方法为新疆进出口检疫检验局技术服务中心自行研发的多重PCR诊断技术；对新孢子虫病、弓形虫病的检测，按照相关试剂盒操作说明进行。

1.2.2 流行病学调查。采取问卷调查和与养殖户访谈相结合的方式，随机选取乌鲁木齐市养殖大区的达坂城区12个街道、居委会，4个乡、镇，1个管委会的21个行政村的牛羊养殖户开展调查，了解牛羊饲养管理状况、种畜管理情况、近3年来牛羊流产情况，以及采取相应防控措施后的流产情况变化；采取现场流行病学调查方法，对流产率高的乌鲁木齐县和米东区进行调查；在全市开展紧急免疫对流产影响的流行病学调查，评估免疫对牛羊流产的影响，进一步分析流产原因。

2 调查结果

2.1 问卷调查结果

2.1.1 家畜饲养管理特点

2.1.1.1 动物来源、饲喂方式及牧场类型。达坂城区牛羊养殖以自繁自养为主，占77.5%，其中“自繁自养+外购牲畜”的占10.5%，全部外购的占14.8%；饲养方式中，以放牧为主的占84.7%，舍养为主的占15.0%；使用公共牧场的占61.5%，自有牧场的占38.5%（图1）。

图1 达坂城区动物来源、饲喂方式及牧场类型占比

2.1.1.2 外购牲畜进场前是否开展布鲁氏菌病检疫。在存在外购牲畜的饲养场（户）中，所有牲畜检疫合格后进场的占19%，抽样检疫合格后进场的占10%，不检疫直接进场的占67%，不检疫但隔离观察后进场的占4%（图2）。

2.1.2 种公畜管理情况。65.5%的养殖户自己饲养种公畜，34.5%的是租用或共用村里的种公畜。种公畜布鲁氏菌病检疫情况见表1。

图2 外购牲畜进场前布鲁氏菌病检疫情况

表1 种公畜管理及布鲁氏菌病检疫情况

2.1.3 流产情况

2.1.3.1 牛羊流产率。通过询问达坂城区200户养殖户2012—2015年的牛羊流产情况，并根据调查问卷中的调查数据，利用SSPS软件进行分析，得出在95%CI内，2012—2015年达坂城区牛羊流产率的年平均值（图3）。

图3 2012—2015年达坂城区调查户牛羊流产率

2.1.3.2 发生流产的时间。发生流产较为集中的季节为秋冬季，占94.3%；在清楚牛羊流产情况的养殖户中，89%的养殖户观察发现流产多发生在母羊怀孕后期。

2.2 现场流行病学调查结果

对羊流产率高的乌鲁木齐县和米东区进行现场流行病学调查，剖检流产胎儿，观察其病理剖检变化；采集血清学样品 345 份，检测布鲁氏菌和衣原体，同时对采集的15份组织样品，用荧光多重PCR和普通PCR方法检测，结果检出布鲁氏菌病阳性5份，其中4份为布鲁氏菌病和衣原体病的混合感染。其他6种可能引起流产疫病的病原学检测结果均为阴性（表2）。细菌病病原学检测发现最多的是大肠杆菌和葡萄球菌。

表2 现场流行病学调查的病原学检测结果

2.3 紧急免疫弱毒疫苗对流产影响的流行病学调查结果

为观察疫苗免疫对羊流产的影响，对全市实施小反刍兽疫强制免疫的母羊开展统计和调查。统计结果显示，乌鲁木齐市在春秋两季共免疫羊55万只，在开展小反刍兽疫紧急强制免疫后的一个孕期（150 d）内，全市出现死亡羊369只，流产羊羔1 669只，共计2 038只，死亡率为0.06%，流产率为0.3%。

2.4 疫病检测结果

2.4.1 布鲁氏菌病检测

2.4.1.1 羊布鲁氏菌病病原学检测。采用分离疑似病原菌的方法，5年来在全市8个区县的羊养殖场/户收集羊流产胎儿298份，开展布鲁氏菌病病原学检测，共分离出16株布鲁氏菌，经PCR鉴定均为羊种布鲁氏菌（表3）。全市流产胎儿中的布鲁氏菌个体阳性检出率为5.36%（16/298），场群阳性检出率为5.44%，表明羊群中的羊种布鲁氏菌病感染率较高。

表3 羊流产胎儿分离布鲁氏菌结果（单位：个/份/%）

2.4.1.2 牛布鲁氏菌病病原学检测。应用布鲁氏菌病分型多重PCR方法，对发生过流产的牛场和养殖户，采集疑似布鲁氏菌病所致流产的奶牛组织15份、全血101份、奶液样品 40 份，进行布鲁氏菌病病原学检测。结果显示：组织样品中共检出阳性4份，全血样品中共检出阳性42份，奶液样品中共检出阳性21份，总计67份。其中牛种布鲁氏菌病阳性53份，羊种布鲁氏菌病阳性10份，混合感染阳性4份，牛布鲁氏菌病的个体阳性检出率为42.9%，场群阳性检出率为31.4%（表4）。

表4 牛布鲁氏菌病病原学检测结果（单位：份/%）

2.4.2 衣原体病检测。在流产率高的乌鲁木齐县和米东区83个场群，采集羊血清学样品 345 份，羊流产胎儿组织样品15份。样品经普通PCR检测发现，羊衣原体病个体阳性检出率为55.8%，场群阳性检出率为14.4%；对衣原体病阳性样品，经多重PCR检测发现，布鲁氏菌病和衣原体病混合感染3份，占阳性样品的75%（表5）。运用常规PCR和多重PCR技术，对172份临床疑似牛布鲁氏菌样品进行检测，结果显示，鹦鹉热衣原体感染阳性2份，个体阳性检出率为2.1 %，场群阳性检出率为5.2%，布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体混合感染阳性样品2份，混合感染个体阳性检出率为2.1 %，场群阳性检出率为10.2%（表6）。

表5 羊衣原体病阳性检出率统计结果 （单位：%）

表6 牛衣原体病阳性检出率统计结果（单位：%）

2.4.3 其他引起牛羊流产的疫病检测。运用常规PCR对172份临床疑似牛布鲁氏菌样品进行Q热检测，结果共发现阳性样品10份，包括全血样品5份、血清样品1份、流产胎儿样品4份，个体阳性检出率为5.8%，场群阳性检出率为8.6%；同时运用多重PCR技术，检测出2份布鲁氏菌和Q热混合感染阳性样品，阳性检出率为1.2 %；用ELISA方法对 28个牛群的45头牛进行新孢子虫病检测，结果检出阳性16份，阳性检出率为35.5 %，场群阳性检出率为21.4%；用ELISA方法对不同区县的羊血清样品进行弓形虫抗体检测，未发现阳性（表7）。

表7 其他引起牛羊流产的疫病检测结果（单位：份/%）

3 结论

3.1 引起羊流产的疫病主要为布鲁氏菌病和衣原体病

通过问卷调查发现，乌鲁木齐市牧区的牛羊饲养方式仍然以自繁自养的流动放牧为主，放牧草场以公共草场为主。大多数外购牲畜不进行布鲁氏菌病和衣原体病检疫而直接入场，对种公畜的管理存在漏洞，不能定期开展疫病检疫。对流通环节牛羊和种公畜的监管不严，由此增加了乌鲁木齐市布鲁氏菌病和衣原体病感染的风险。流行病学调查结果证实了高流产率区县的布鲁氏菌病和衣原体病的病原阳性率很高，进一步验证了引发羊流产的疫病主要为布鲁氏菌病和衣原体病。同时，因饲养管理不当、圈舍消毒较差而出现的大肠杆菌和葡萄球菌混合感染病例也较多。

3.2 引起牛流产的疫病具有多样性

经疫病检测发现，引起牛流产的疫病，如布鲁氏菌病、鹦鹉热衣原体病、新孢子虫病、Q热等均被检出。布鲁氏菌病病原学分型检测结果显示，从流产胎儿组织样品中检测出的羊种布鲁氏菌阳性最多，由此可推断羊种布鲁氏菌对牛流产的影响最大。在鹦鹉热衣原体和Q热病原学检测中，也发现了与布鲁氏菌病混合感染样品[2]；新孢子虫的检测阳性数也较高[3]。因此可见引发牛流产病原复杂，具有多样性。

3.3 疫苗免疫导致的不良反应是引起羊流产的原因之一

2015年乌鲁木齐市曾对母羊开展小反刍兽疫强制免疫。初产羔季节来临时，免疫后的羊只陆续出现流产，产死胎和弱胎现象，而且多发生在引进的湖羊、小尾寒羊和杂交的高产多胎羊。通过流行病学调查和问卷调查发现，强制免疫注射的小反刍兽疫疫苗为弱毒疫苗，湖羊、小尾寒羊和杂交的高产多胎羊对此较敏感。另外在免疫时，操作人员抓羊时，牵扯后腿，用力粗暴，造成羊群惊吓过度，也是导致流产的原因之一。

3.4 春季饲草缺乏，导致羊营养不良，促使部分羊只发生流产

春季饲草缺乏，导致部分羊的营养状况不良。春季牧区气温低，积雪融化慢，羊群食用霉败、冰冻、含霜露和雪的饲料，使胎儿营养物质代谢障碍或引起孕羊子宫强烈收缩，促使部分羊发生流产[1]。

3.5 布鲁氏菌病阳性率高的区县实施布病免疫后，流产数量明显减少

2012年达坂城区实施了牛羊布病免疫。为了解免疫实施1年后的效果，通过问卷调查，对牛羊布鲁氏菌病S2疫苗免疫前后的流产情况进行了对比，发现自2012年达坂城区实施了1年的牛羊布鲁氏菌病免疫后，2013年牛羊的流产率明显下降，采用χ2检验对数据进行统计学分析，发现牛羊布鲁氏菌病疫苗免疫前后的流产数量差异显著（P＜0.001），免疫后流产数量明显减少。

4 防控建议

对由疫病引起的流产畜，应及时进行隔离或扑杀，对污染的用具和场地进行彻底消毒，对流产的胎儿、胎衣和产道分泌物作深埋处理。必要时开展布鲁氏菌病基线调查，对个体阳性检出率超过2%或群体阳性检出率超过5%的羊群，开展布鲁氏菌病免疫。同时，采取衣原体病免疫也可对减少羊流产起到一定的防控效果。此外，应加强疫病检疫，特别是种公畜的年检以及引种前的检疫，对普通畜做好每年的疫病检测工作，及时淘汰阳性畜。对非疫病性流产的防治，建议做好牛羊的日常清洁消毒工作，在产羔季节增加场内外的消毒次数，避免饲喂带有冰碴和发霉的饲草。避免在产羔期开展疫苗免疫，同时做好人员培训，规范免疫操作，禁止采用粗暴方式抓羊、赶羊。

[1] 杨玲，郭亚军. 乌鲁木齐地区羊流产原因及防治对策[J].新疆畜牧业，2015（5）：47-54.

[2]彭武丽，季新成，于学辉，等. 多重PCR检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体[J]. 畜牧兽医学报2014，45（1）：123-128.

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[9]李建玲，李爱巧，杨启元，等. 乌鲁木齐牛羊布鲁氏菌疫苗免疫效果对比试验[J]. 中国动物检疫，2013，30（4）：47-50.

[10]王涛，马卫平，李爱巧，等. 新疆达坂城区家畜布鲁氏菌病免疫效果评估[J]. 中国动物检疫，2016，33（4）：6-9.

（责任编辑：朱迪国）

Reason Analysis on Abortion of Cattle and Sheep in Urumqi City of Xinjiang

Wang Tao1，Li Aiqiao1，Wu Xingxing1，Cai Kuojun1，Yang Qiyuan1，Ma Weiping1，Wang Wenxiu1，Wang Liuhe1，Chen Faxi1，Ji Xincheng2，Shi Qian2，Zhong Qi3
（1. Urumqi Animal Disease Control and Diagnosis Center，Urumqi，Xinjiang 830063；2. Technology Service Center of Xinjiang Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Urumqi，Xinjiang 830063；3. Veterinary Research Institute，Xinjiang Academy of Animal Husbandry and Science，Urumqi，Xinjiang 830000）

[Objective] In order to determine the main reasons of the cattle and sheep abortion，so as to put forward scientifi c and effective comprehensive prevention and control measures for reducing economic loss. [Methods]Through disease surveillance and epidemiological investigation，an analysis was made from the fi elds of feeding management，prevalence of diseases，abortion and vaccination. [Results] Results showed the main reasons causing abortion of cattle and sheep were some animal diseases. Sheep abortion were mainly caused by Brucellosis and Chlamydia. For cattle，various diseases could result in abortion，in addition，other non-disease factors also played important role in cattle abortion，such as improper breeding management，lack of forage grass，poor environmental conditions，incomplete disinfection and cleaning，as well as adverse reactions of vaccination. [Conclusion]Results indicated that sheep should be immunized with vaccines against Brucellosis and Chlamydia. For cattle，feeding management and disinfection should be strengthened. Besides，reduction of disease outbreaks could effectively avoid abortion of cattle and sheep.

cattle and sheep；abortion reason；epidemiological investigation；Brucellosis；Chlamydiosis；Q fever；Neospora；Toxoplasma

S851.3

：B

：1005-944X（2017）05-0004-05

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.05.002

乌鲁木齐市科技局现代服务业促进计划项目（Y141310002）；重庆市社会民生科技创新专项援疆项目（cstc2016shmszx80121）

李爱巧