安徽省池州市2014-2015年婴幼儿病毒性腹泻标本检测结果及杜宝拉疗效观察

杨晓光，羊礼荣，顾 倩

(安徽省池州市人民医院儿科 247100)

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安徽省池州市2014-2015年婴幼儿病毒性腹泻标本检测结果及杜宝拉疗效观察

杨晓光，羊礼荣，顾 倩

(安徽省池州市人民医院儿科 247100)

目的 观察安徽省池州市2014-2015年婴幼儿病毒性腹泻病原体的分布状况及杜宝拉治疗的疗效。方法 将该院2014-2015 年收治的病毒性腹泻婴幼儿183例作为研究对象，分为观察组和对照组，对照组采用普通止泻药物，观察组采用杜宝拉，对比两组治疗疗效。将183例患儿粪便样品送市疾病预防控制中心检测，采用ELISA检测人轮状病毒(HRV)抗原，RT-PCR法检测基因分型。结果 观察组总有效率为88.04%(81/92)，对照组总有效率64.84%(59/91)，差异有统计学意义(P<0.05)。病毒性腹泻的主要病原体是人杯状病毒(HuCV)和HRV，G血清型以G3、G9型为主，P基因型以P8、P4型为主。结论 池州市婴幼儿病毒性腹泻的主要病原体是HuCV和HRV，杜宝拉较普通腹泻药物疗效更好。

病毒性腹泻；杜宝拉；疗效观察

婴幼儿腹泻病是我国最常见的一组由多病原、多因素引起的消化道综合征，主要临床表现为大便次数增多、大便性状发生改变[1]。引起婴幼儿病毒性腹泻的主要病原有轮状病毒、杯状病毒、星状病毒和肠道腺病毒[2-5]。本文观察杜宝拉治疗病毒性腹泻婴幼儿的疗效，并对其粪便标本进行ELISA、RT-PCR检测[6-7]，观察病原体的分布状况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2014-2015年本院收治的病毒性腹泻婴幼儿183例为研究对象，患儿均为5 岁以下因腹泻住院的儿童，将其分为两组，对照组91例采用普通治疗腹泻用药，观察组92例采用杜宝拉。将183例患儿粪便样品送市疾病预防控制中心检测，收集并记录患儿基本信息于腹泻病例调查表，将腹泻粪便样品置于-20 ℃保存备用[8-9]。病毒性腹泻诊断标准：大便次数增加，每天3 次或者3次以上；大便性状发生明显改变。检测依据、检测项目及检测仪器依据《全国病毒性腹泻监测方案(2007修订版)》，检测项目为人轮状病毒(HRV)核酸、人杯状病毒(HuCV)核酸、星状病毒(AstV)核酸、腺病毒(AdV)核酸。

1.2 仪器与试剂 全自动核酸分离纯化仪(MagNA Pure 96，瑞士ROCHE)；病毒核酸提取试剂盒(RB050,VR100，Geneaid Biotech)；酶标仪(SM800，美国Thermo公司)；洗板机(Wellwash，美国Thermo公司)；生物安全柜(1374，美国Thermo公司)；荧光定量PCR仪(AriaMx，安捷伦公司)；PCR仪(ProFlex 3 x 32 well PCR system，ABI公司)；台式高速离心机(5427 R，德国Eppendorf公司)；Taq 酶(Promega M1665S，上海 Promega 公司)；ELISA试剂盒(DAKO，美国Proteintech公司)；引物合成(CX160106298-S，北京华大基因公司)；反转录试剂盒(K1622，美国Fermentas公司)；药物杜宝拉(国药准字H20050411，四川百利药业集团)。

1.3 方法

1.3.1 用药治疗 两组临床治疗中均给予静脉补液纠正脱水及退热等治疗[10]。观察组患儿服用杜拉宝，每次1袋，1日3次；对照组选用普通止泻药物。

1.3.2 病毒核酸的提取 加入适量磷酸盐缓冲液(PBS)于183份粪便标本，用台式离速离心机离心，制备出10% 的大便标本悬液上清备用。取 400 μL前期处理好的大便标本上清液，使用病毒核酸提取试剂盒和全自动核酸分离纯化仪进行核酸提取，按说明书进行操作[11]。

1.3.3 病毒检测 首先ELISA检测HRV，结果为阳性的标本进行RT-PCR基因分型，然后用RT-PCR检测粪便标本的HuCV、AstV，PCR检测AdV。

1.3.4 琼脂糖凝胶电泳 取10 μL产物在EB胶上进行电泳，依据有无目的条带判断结果是否为阳性，以及判别病毒株类型。

1.3.5 疗效标准 根据1998年全国腹泻病防治学术研讨会通过的急性腹泻病的疗效标准判定疗效[12]。治疗后3 d内患儿粪便性状及次数恢复正常，全身症状消失为显效；3 d时粪便性状及次数明显好转，全身症状改善为有效；粪便性状、次数及全身症状均无好转甚至恶化为无效。

1.4 统计学处理 采用SPSS21.0软件进行统计分析，两组疗效比较采用非参数/t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组疗效比较 观察组总有效为88.04% (81/92)，对照组总有效率64.84%(59/91)，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组疗效比较

2.2 患儿粪便病毒检测情况 见表2。

2.3 HRV G分型分布 183份标本中G血清型以G3(43.17%)、G9(33.88%)型为优势株。见表3。

2.4 HRV P 分型分布 183份标本中P基因型以 P8(54.1%)、P4 (18.03%)型为优势株。见表4。

表2 患儿粪便病毒检测情况

表3 HRV G分型分布

表4 HRV P分型分布

3 讨 论

病毒性腹泻是婴幼儿时期的常见病和多发病， 在我国是危害儿童健康的主要疾病[13-14]。导致婴幼儿病毒性腹泻的主要病原体有HRV、HuCV包括诺如病毒、沙波病毒，HRV与HuCV组成病毒性腹泻主要的病原体，此外还有AstV、AdV等。这些病毒在不同的地区、不同时期、不同人群中分布不同，且病毒性腹泻的病原体构成存在差异[15-16]。

为了探讨安徽省池州市婴幼儿病毒性腹泻的病原体分布状况，本研究对本院2014-2015年收治的病毒性腹泻婴幼儿的粪便标本进行检测，结果显示主要病原体是HRV和HuCV，且HRV所占比例最大，与其他地区检测结果相一致[17-18]。通过对所测病毒进行分型，结果显示G型的病毒株以G3(43.17%)、G9(33.88%)型为优势株，P型的病毒株以P8(54.1%)、P4(18.03%)型为优势株，血清型分布情况与文献[19]报道的亚洲地区HRV的主要分型相一致。

本研究结果显示，杜拉宝的有效率大于普通止泻药物，差异有统计学意义(P<0.05)。且临床反馈显示，患儿对杜拉宝的耐受性要比普通止泻药好，无明显不良反应，该药物临床上对症治疗婴幼儿腹泻安全有效。

本研究由于条件限制，没有对本地区其他医院在2014-2015年婴幼儿病毒性腹泻的检测和治疗资料进行收集，所选样本仅局限在本院，因此所得结论还需要进一步论证。

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杨晓光(1979-)，主治医师，本科，主要从事儿科重症患儿的诊治工作。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.11.035

R720.597

B

1671-8348(2017)11-1542-03

2016-10-24

2017-01-27)