张 青 ,傅卫红△ ,张国强,陈芦斌 ,冯 青 ,赵晓余,王永兴
1.解放军第四五一医院 (西安710054),2.解放军93801部队(咸阳712200)
中药与矿物盐微粉对急性血瘀模型小鼠耳廓微循环的影响*
张 青1,傅卫红1△,张国强2,陈芦斌1,冯 青1,赵晓余1,王永兴1
1.解放军第四五一医院 (西安710054),2.解放军93801部队(咸阳712200)
目的:探讨中药与矿物盐微粉对急性血瘀模型小鼠耳廓微循环的影响。方法:采用皮下注射盐酸肾上腺素与冰水浴的方法制作急性血瘀小鼠耳廓微循环障碍动物模型,观察中药与矿物盐微粉对小鼠耳廓微动脉血液流速及微动脉血液输入管径、输出管径的影响。结果:中药与矿物盐微粉各剂量组给药10、30、60min后血液输入管径、输出管径、微动脉血流速均增加,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:中药与矿物盐微粉具有改善急性血瘀模型小鼠耳廓微循环的作用。
中药与矿物盐微粉系专利产品多功能外用热疗包的内容物微粉混匀而成,主要成分包括没药、川芎、花椒、羌活、透骨草等十八味中药和矿物盐,具有活血祛瘀、温经通络、消肿止痛的功效,对多种病因引起的颈肩腰腿痛有较好的临床疗效[1-2]。本研究采用肾上腺素加冰浴法复制小鼠耳廓微循环障碍模型,研究中药与矿物盐微粉对小鼠耳廓微循环障碍的影响,探讨中药与矿物盐微粉的作用机制。现将结果报告如下。
1 材 料
1.1 实验动物:5-6周龄昆明种小白鼠,雌雄各半,体重18-22g。由第四军医大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK(军)2012-0007。饲养于空调恒温室内,室温24±2℃,相对湿度40%~60%,过滤送风,自动控制昼夜各12 h。自由摄氏和饮水,灭菌全价营养颗粒饲料(由第四军医大学试验动物中心提供)喂养。实验开始前饲养观察2周,选择健康动物用于试验。
1.2 药物和试剂:多功能外用热疗包批号:20130305。称取其内容物适量,先粉碎成棕色粗粉,后微粉,收集微粉( 300目筛通过率≥95%),室温保存备用。红花油(广州泰恩制药厂有限公司出品,批号140101);盐酸肾上腺素(西南药业股份有限公司出品,批号1310151)。
1.3 实验仪器:FW-177型中草药粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司生产);BFM-6型超微粉碎机(济南倍力粉技术工程有限公司生产);AF-100制冰机(美国IMI CORNELIUS.INC);WX-9B微循环仪(徐州光学仪器总厂生产)。
2 方 法
2.1 动物分组及剂量:将动物随机分为6组,分组及给药如下:正常对照组(未加药处理组)、血瘀模型组、正红花油阳性对照组(0.1 ml/只)、中药与矿物盐微粉高剂量组(150 g/kg)、中剂量组(90 g/kg)、低剂量组(30 g/kg)。剂量设置依据临床拟用剂量。
2.2 实验方法:血瘀模型组、阳性药物对照组、中药与矿物盐微粉高、中、低剂量组小鼠给予皮下注射盐酸肾上腺素(8 ml/kg),2 h后放入0℃冷水浸泡2 min,取出后再次按8 ml/kg的量皮下注射盐酸肾上腺素,2 h后再次放入0℃冷水浸泡2 min后取出。12 h后各组动物分别给药,正常组、模型组动物耳廓外滴温热蒸馏水0.1ml/只,阳性对照组动物给予耳廓外涂正红花油0.1 ml/只,中药与矿物盐微粉低、中、高剂量组动物颈背部及耳廓热敷微粉治疗包10 min,然后采用1%的戊巴比妥钠0.1 ml/10 g腹腔注射麻醉小鼠,在其耳廓表面涂上香柏油,置两块玻片间,在微循环显微镜下,观察耳廓边缘平行的1.5-2 mm微血管的变化情况,测定给药后10、30、60 min微血管的输入管径、输出管径与血液流速的情况。
1 对血瘀模型小鼠耳廓微动脉血液流速的影响 模型组动物耳廓微动脉血液流速较正常组显著减缓,具有统计学差异(P<0.01),提示小鼠耳廓微循环障碍造模成功;中药与矿物盐微粉低、中、高剂量组给药10、30、60 min后,小鼠耳廓微动脉血液流速与模型组比较明显加快(P<0.05,P<0.01),说明中药与矿物盐微粉能明显增加小鼠耳廓微循环障碍中微动脉的血液流速,见表1。
表1 中药与矿物盐微粉对血瘀模型小鼠微动脉血液流速的影响(μm/s)
注:与正常组相比,△P<0.01;与模型组相比,*P<0.05,**P<0.01
2 对血瘀模型小鼠耳廓血液输入管径的影响 与正常组相比,模型组动物耳廓根部的血液输入管径显著减小(P<0.01);中药与矿物盐微粉低、中、高剂量组给药10、30、60 min后,该血管管径增大,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),说明中药与矿物盐微粉能扩张小鼠耳廓微循环障碍血液输入管径,见表2。
表2 中药与矿物盐微粉对血瘀模型小鼠微动脉血液输入管径的影响(μm)
注:与正常组相比,△P<0.01;与模型组相比,*P<0.05,**P<0.01
3 对血瘀模型小鼠耳廓血液输出管径的影响 模型组小鼠耳廓根部的血液输出管径较正常组显著减小(P<0.01);中药与矿物盐微粉低、中、高剂量组给药10、30、60min后,微动脉血液输出管径有不同程度增大,与模型组相比有显著性差异(P<0.05,P<0.01),说明中药与矿物盐微粉能明显扩张小鼠耳廓微循环障碍血液输出管径,见表3。
表3 中药与矿物盐微粉对血瘀模型小鼠微动脉血液输入管径的影响(μm)
注:与正常组相比,△P<0.01;与模型组相比,*P<0.05,**P<0.01
血瘀证是中医临床常见的证候类型,也是许多临床疾病的基本病理机制[3]。现代医学研究表明,血瘀证与微循环障碍、血液流变学异常、血液凝固性增高或纤溶性降低、血小板聚集性增高或释放功能亢进、血流动力学障碍、血管狭窄、阻塞等因素有关[4]。其中微循环异常改变常作为血瘀证诊断及血瘀程度判断的客观指标[5-6]。耳廓微循环法具有简便、经济的优点,多被用于观察药物对微循环影响[7]。
临床上各种原因导致的颈肩腰腿痛多因肌肉、肌腱、韧带、关节、神经、血管等组织急慢性损伤及无菌性炎症引起,属中医“痹证”范畴,多因外受风寒湿邪,或因劳伤起病,或跌扑闪挫,致经脉气血阻滞不通,瘀血留注而致疼痛;或先天禀赋不足,后天失调,久病体虚,年老体衰,以致气血不足,肾经亏损,筋脉、骨骼失去濡养而发生疼痛[8]。中医理论认为:瘀血在骨关节疾病的发生发展中起着关键作用,血脉瘀滞,气血不行,而致筋骨失养发病。王清任在《医林改错》中有“痹证有瘀血”的论述,主张活血化瘀治疗痹证。活血通络祛瘀、改善微循环可达到镇痛的作用,贯穿于各种疾病急慢性颈肩腰腿痛的治疗过程中[9]。
本研究治疗组所用中药矿物盐微粉系专利产品多功能热疗包中的中药与矿物盐按比例混合,经粉碎、研磨、过筛后的微粉。其组方包括没药、川芎、花椒、羌活、透骨草等十八味中药和矿物盐,其中乳香、没药、延胡索相协活血祛瘀、行气止痛;羌活、当归和五灵脂共奏散寒活血止痛之效;透骨草、生川乌、防风、川芎和花椒可祛留滞经络的风寒湿邪;当归、川芎养血兼活血。综合全方,祛邪扶正,标本兼顾,发挥活血化瘀、祛湿散寒、通经通络的功效,使局部瘀血消散,受损伤的气血得以濡养,达到通则不痛的疗效[10]。同时加入了矿物盐,引药下行,入肾软坚,增补肝肾,缓和药材辛燥之性,增进药材疗效,并能促进渗液吸收,达到消炎、消肿、止痛作用。
本研究采用肾上腺素加冰水刺激的方法复制急性血瘀证模型,皮下注射肾上腺素模拟应激时机体分泌大量肾上腺素的状态,以冰水浸泡动物,模拟外寒侵袭,两种因素的综合作用复制出急性寒凝血瘀型大鼠模型,并对专利产品多功能外用治疗包内容物的活血化瘀作用进行了探讨。实验结果表明:中药与矿物盐微粉治疗组血液输入管径、输出管径、微动脉血流速均增加。提示中药与矿物盐微粉具有活血化瘀,改善微循环障碍的作用,其具体作用机制尚需进一步研究。
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(收稿:2016-11-09)
Effect of traditional Chinese medicine and mineral salts micropowder on ear microcirculation in mice of acute blood stasis model
Zhang Qing,Fu Weihong,Zhang Guoqiang, et al.
The 451st Hospital of PLA(Xi’an 710032)
Objective: To explore the effects of external application of the traditional Chinese medicine and mineral salts(TCM-MS)micropowder on ear microcirculation in acute blood stasis model of mice. Methods: Sixty mice were randomly divided into the normal group, the model group, the positive control group, and low dose (30g/kg),middle dose (90g/kg) and high dose (150g/kg) of TCM-MS micropowder group, with 10 mice in each group. The TCM-MS micropowder groups were administered with external application of TCM-MS micropowder. The models of mouse ears microcirculatory disturbance were established by means of subcutaneous injection of adrenaline and ice water bath after treatment for 6 days. The instrument of microcirculation were used to observe the ear venule, arteriole diameter and the blood flow speed of mouse.Results: The ear venule, arteriole diameter and the blood flow speed were obviously increased in different doses of TCM-MS micropowder group (P<0.05,P<0.01). Conclusion: The TCM-MS micropowder could significantly expand the capillary vessels and promote the microcirculation on acute blood stasis model of mice.
Acute blood stasis Animal experimentation Mice
*全军保健专项课题(12BJ207)
血瘀证 动物实验 小鼠
R247.9
A
10.3969/j.issn.1000-7369.2017.04.061
△通讯作者