HPLC法测定苯磺酸氨氯地平分散片的含量

孟祥宇

摘 要：目的：使用HPLC法测定苯磺酸氨氯地平分散片的含量。方法：使用ODS色谱柱、甲醇-磷酸二氢钾溶液为流动相，比例是65：35，使用的检测波长是237nm。结果：苯磺酸氨氯地平在溶度为49.34μg°ml-1-91.62μg°ml-1这一范围内的浓度进行相应的分析，使得浓度与峰面积有着较好的相关性，而且相关系数达到了0.9996，平均价的回收率是99.91%，RSD是0.76%。

关键词：HPLC法；苯磺酸氨氯地平；含量测定

苯磺酸氨氯地平是一种治疗心律失常的药物，这种药物在临床中主要是应用于心绞痛和高血压等病症，苯磺酸氨氯地平分散片的主要原料就是苯磺酸氨氯地平，向里面加入一系列的辅料就构成了相应的分散片，在含量测定的过程中，使用的是高效液相色谱法来进行测定的，使用的色谱柱是ODS，并且使用磷酸二氢钾溶液和甲醇按照相应的比例来进行配比溶液作为流动相，本品参考的是2004版药典来进行高效液相色谱法的测定，由于紫外分光光度法会受到空白辅料的影响，在这样的情况下，就使用了高效液相色谱法来进行测定。

1 仪器和试药

1.1 仪器

LC-10A液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器（日本岛津）；7125定量进样阀（Rhedyne）；HW色谱工作站。

1.2 试药

苯磺酸氨氯地平对照品（苏州东瑞制药有限公司，批号031240012，纯度100%，）；苯磺酸氨氯地平分散片（江苏省药物研究所，批号：041101、041105、041108）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：C18（4.6mm×250mm，5μm，ph-nomenex）；流动相：甲醇-0.03mol·L-1磷酸二氢钾溶液（65∶35）；流量：1ml·min-1；检测波长：237nm。含量测定色谱图见图1。

2.2 线性关系

称取苯磺酸氨氯地平对照品约34mg，置50ml量瓶中，加流动相适量，振摇使溶解，并加流动相至刻度，摇匀，精密量取3.5、4.0、5.0、6.0、6.5ml，分别置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别取上述对照品溶液20μL注入色谱仪，记录色谱图，并以浓度C（μg·ml-1）为横坐标，峰面积A为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：A=5.3857×103+8.5547×103C（n=5，r=0.9996）。

结果表明苯磺酸氨氯地平在49.34μg·ml-1～91.62μg·ml-1浓度范围内，峰面积与其浓度呈线性关系。

2.3 空白辅料的干扰性试验

要取适量的本品处方量的空白辅料，根据实际的“含量测定”项目下的方法来进行干扰性试验的操作，根据“含量测定”项目下的方法操作可以获得相应的空白辅料溶液，之后取相应的溶液注入到相应的色谱仪中，需要空白辅料溶液大约20μL，还要对色谱图进行相应的记录，得到的结果说明了空白辅料对于整个实验是没有任何的干扰的。

2.4 回收率试验

在进行回收率试验的过程中，要分别的按照120%、100%和80%这一浓度梯度，分别的称取苯磺酸氨氯地平的对照品84mg、70mg和56mg，從苯磺酸氨氯地平的含量来看，分别为60mg、50mg和40mg，与此同时，要精密的称取相应的空白辅料，按照处方的比例进行混匀处理，空白辅料大约1.0g，混匀之后进行精密的称取，大约为苯磺酸氨氯地平的8.4mg、7.0mg和5.6mg，并且将其分别的放在量瓶中，并且加入适量的流动相进行振捣处理，使得苯磺酸氨氯地平能够充分的被溶解，之后加入流动相到相应的刻度，进行摇匀和过滤处理，之后取相应的滤液进行测定，计算相应的回收率，具体的结果如表1所示：

通过表1可以得知高浓度、中浓度和低浓度溶液的平均回收率是99.91%，而RSD是0.76%，根据这一结果来看，苯磺酸氨氯地平分散片的含量测定有着较高的准确率。

2.5 精密度试验

在同一品号的样品中选择6份样品，对这6份样品进行含量的测定，在含量测定的过程中，含量测定的平均值是101.6%，RSD是0.56%，根据这一试验结构可以看出，这一试验有着较好的重复性。

2.6 稳定性试验

要取供试品溶液20μL，这一供试品溶液是在含量测定情况下的供试品溶液，之后在常温的条件下分别的按照0、2h、4h、6h和8h注入到色谱仪中，对于色谱图进行记录，并且进行峰面积的计算，在计算峰面积的过程中，必须要充分的考虑到流动相溶液的稳定性，实际的结构如表2所示：

根据表2可以得知，平均的含量是101.4%，RSD是0.18%，根据相关的测定结构可以得知，本品的流动相是在8h内稳定的。

2.7 含量测定

在含量测试的过程中，要取本品10片，对其进行称定，将其研细进行精密的称取，之后取适量放到100ml的量瓶中，向里面加入适量的流动相进行振摇，在这样的情况下，就可以使苯磺酸氨氯地平被较快的溶解，之后像立面加入适量的流动相直到相应的刻度，进行摇匀与过滤处理，并且取相应的滤液20μL，将其注入到准备好的色谱仪中，对于色谱图进行相应的记录。除此之外，还要称取苯磺酸氨氯地平的对照品，精密的称取，使用流动相将其溶解，之后将其制成每毫升都含有50μg的氨氯地平的溶液，这一溶液就是对照品溶液，根据同样的方法进行测定，通过计算可以得知，在对于三批样品的含量进行测定的过程中，具体的含量分别是100.5%、99.60%和101.2%，具体的色谱图如图1所示。

3 讨论

苯磺酸氨氯地平化学名3-乙基-5-甲基-2-（2-氨基乙氧甲基）-4-（2-氯苯基）-1，4-二氢-6-甲基-3，5-吡啶二羧酸酯苯磺酸盐，具有半衰期长，作用持久等特点。目前，国内外关于苯磺酸氨氯地平含量测定的方法主要有高效液相色谱法、电位滴定法、气相色谱法等，本文使用的是高效液相色谱法进行含量的测定。

本文使用的是HPLC法对于苯磺酸氨氯地平分散片的含量进行测定，这种方法有着一定的优点，结构准确可靠，符合苯磺酸氨氯地平的特点，可以被用于苯磺酸氨氯地平含量的测定，目前已经有许多的学者来进行相应含量的测定，而且这一试验有着精密度高、灵敏度高、方法准确的特点，在医学领域被广泛的应用。

参考文献

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