聚乙二醇干扰素α-2a联合ETV治疗HBeAg阴性CHB临床研究

李爱新，曹振环，汪雯，张宏伟，张彤，吴昊

(首都医科大学附属北京佑安医院感染科，北京 100069)

聚乙二醇干扰素α-2a联合ETV治疗HBeAg阴性CHB临床研究

李爱新，曹振环，汪雯，张宏伟，张彤，吴昊

(首都医科大学附属北京佑安医院感染科，北京 100069)

目的探讨聚乙二醇干扰素α-2a(Peg-IFNα2a)联合恩替卡韦(ETV)治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)48周的疗效及安全性。方法回顾性纳入2013年6月至2015年6月在首都医科大学附属北京佑安医院接受Peg-IFNα2a(135 μg/周)联合ETV(0.5 mg/d)治疗的50例初治HBeAg阴性CHB患者，收集基线和治疗过程中每12周的临床数据，包括HBV DNA和HBsAg水平等，分析48周HBV DNA不可检测率、HBsAg清除率及不良反应发生情况。结果Peg-IFNα2a联合ETV治疗48周，全部患者HBV DNA低于检测值(＜20 IU/mL)；HBsAg清除率及血清学转换率分别为24%和16%。不良反应主要表现为发热、乏力、脱发、食欲下降、皮疹和甲状腺功能减退，给予对症及支持治疗，均可继续原方案。结论Peg-IFNα2a联合ETV可提高HBeAg阴性CHB的HBsAg清除率，且安全性良好，是值得探索的优化治疗策略之一。

恩替卡韦；慢性乙型肝炎；联合治疗；HBsAg；聚乙二醇干扰素α-2a；血清学转换

我国由于肝炎疫苗免疫普及，急性HBV感染明显减少，以及感染HBV人口的老龄化，再加上抗病毒药物的广泛应用，近年HBeAg阴性慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)患者的比例有所上升[1]，约占40%，这是发展为肝硬化、肝癌的高危人群[2]，故针对此类患者开展有效的抗病毒治疗对于改善预后具有重要意义。

HBsAg清除被认为是HBeAg阴性CHB患者可靠的停药指标和理想的治疗终点[3]。我们此前的研究和近期一些研究显示了干扰素联合核苷(酸)类似物治疗可提升HBsAg清除率[4-5]。因此本研究回顾了我院既往应用PEG-IFNα2a联合ETV治疗HBeAg阴性CHB 48周的数据，旨在探讨此治疗方法的有效性及安全性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性纳入2013年6月至2015年6月在首都医科大学附属北京佑安医院接受PEG-IFNα2a联合ETV抗病毒治疗且定期随访的50例HBeAg阴性CHB患者。HBeAg阴性CHB诊断符合2015年中国《慢性乙型肝炎防治指南》[6]，基线符合：HBV DNA≥2 000 IU/mL、ALT≥60 IU/L，并排除肝硬化、肝癌及其他嗜肝病毒感染。平均年龄36岁，其中男性33例，女性17例。治疗前ALT平均水平为(84.6±11.8)U/L，HBV DNA为(5.1±1.6)IU/mL、HBsAg平均水平是(2 616±1 320)IU/mL。

1.2 治疗方法 所有患者均采用PEG-IFNα2a联合ETV治疗。PEG-IFNα2a 135 μg，皮下注射，1次/周；ETV 0.5 mg，口服，1次/d。疗程48周。

1.3 观察指标 所有患者均于基线和治疗后每12周检测肝功能、血常规、HBV DNA、HBsAg、腹部B超等指标。每6个月监测甲状腺激素、甲状腺抗体、自身抗体等。

1.4 实验室检测 (1)肝功能检测：采用脱氢酶法、溴甲酚绿法、循环酶法氧化酶法、肌氨酸氧化酶法等，仪器为Olympus AU5400全自动生物化学分析仪，试剂为上海科华东菱公司相关试剂盒。(2)HBV DNA定量：采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)，仪器为Roche Cobas/Taqman Real-Time PCR2.0 System，德国罗氏公司试剂盒，检测下限为20 IU/mL。(3)HBsAg、抗-HBs检测：应用HBsAg quantitative Elecsys(Roche Diagnostics GmbH,German)检测，HBsAg定量检测下限为0.05 IU/mL，抗-HBs＞10 IU/mL为阳性。

1.5 统计学方法 应用SPSS11.5统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示。48周与基线HBsAg定量的比较采用配对t检验。48周与24周的HBsAg清除率/转换率比较采用χ2检验。显著性标准为P＜0.05。

2 结果

2.1 HBV DNA不可检测率 PEG-IFNα2a联合ETV治疗24周，24/25(96%)患者HBV DNA低于检测值(＜20 IU/ml)、48周全部患者HBV DNA检测不到。

2.2 联合抗病毒治疗过程中HBsAg定量变化 PEG-IFNα2a联合ETV治疗期间，患者HBsAg水平持续下降，基线为2 616 IU/mL，48周HBsAg定量下降至较低水平(平均134 IU/mL)，差异具有统计学意义(t=8.093，P=0.001)，见图1。

图1 联合抗病毒治疗过程中HBsAg定量变化情况

2.3 HBsAg清除/血清学转换率 HBeAg阴性CHB患者接受联合治疗后，HBsAg清除及血清学转换率均随着疗程延长逐步升高，24周HBsAg清除率为4%，血清学转换率为0；48周分别为24%和16%，见图2。

图2 HBsAg清除及血清学转换率

2.4 不良反应 发生甲状腺功能减退的患者应用左甲状腺素钠片25 μg/d替代治疗，未停用或减少PEG-IFNα2a剂量，病情稳定。其他不良反应如发热、乏力、脱发、食欲下降、皮疹等可继续采用PEG-IFNα 2a联合ETV治疗，见表1。

表1 不良反应发生情况(n=50)

3 讨 论

HBeAg阴性CHB由于病毒变异导致疗效评估缺乏HBeAg血清学转换这个满意的停药终点，因此，目前对HBeAg阴性CHB的治疗大部分以获得病毒学抑制(HBV DNA低于检测下限)且ALT正常作为停药指标[7]，但这样的停药终点在临床中超过50%以上的患者会在1年内复发[8]，而只有获得HBsAg清除/转换者才是理想的、安全的停药指标。但目前核苷(酸)类似物治疗获得HBsAg清除率极低，且长期应用无法避免耐药；而普通干扰素单药治疗持续应答率仅为15%～25%[9-10]，聚乙二醇干扰素治疗1年，随访1～4年的HB-sAg清除率分别为3%、6%、8%和11%[11]。由此可见，单药治疗疗效有限。

核苷(酸)类似物和干扰素的作用靶位和作用机制均不同，联合使用可能存在互补或相加作用[12]。近期一些干扰素联合核苷(酸)类似物的研究初步显示出优势，如Tatulli等[13]研究提示聚乙二醇干扰素联合LAM治疗HBeAg阴性CHB，可提高患者生化学和病毒学应答率、改善肝脏组织病理学、防止YMDD的发生。Takkenberg等[4]研究38例HBeAg阴性CHB患者接受聚乙二醇干扰素联合ADV治疗48周，随访24周时发现5例患者获得HBsAg清除，其清除率为13%，提示联合治疗能够获得可靠的停药终点——HBsAg清除。

本研究中，HBeAg阴性CHB患者接受PEG-IFNα 2a联合ETV治疗后HBV DNA下降迅速，治疗48周全部患者HBV DNA检测不到，且无一例患者在治疗期间出现病毒学突破。而且PEG-IFNα2a联合ETV治疗可获得较高的HBsAg清除率及转换率，另外可以显著降低HBsAg定量水平。控制HBsAg定量水平至低水平的意义在于即使治疗未获得HBsAg清除，也可能会有利于实现停药后HBV DNA持久应答。

总之，本研究结果提示Peg-IFNα2a联合ETV可提高HBeAg阴性CHB患者的抗病毒疗效，尤其可以提高HBsAg清除率，是值得探索的优化治疗策略之一。本研究为回顾性临床研究，样本量偏少，疗程较短，因此还需要进一步行大样本前瞻性研究证实此种方法的有效性及持久性。

[1]Fung J,Seto WK,Lai CL,et al.Profiles of HBV DNA in a large population of Chinese patients with chronic hepatitis B:Implications for antiviral therapy[J].J Hepatol,2011,54(2):195-200.

[2]Bonino F,Brunetto MR.Chronic hepatitis B e antigen(HBeAg)negative,anti-HBe positive hepatitis B:an overview[J].J Hepatol,2003, 39 Suppl 1:S160-163.

[3]Papatheodoridis G.EASL clinical practice guideline:management ofchronic hepatitis B[J].J Hepatol,2013,58(1):201.

[4]Takkenberg RB,Jansen L,de Niet A,et al.Baseline hepatitis B surface antigen(HBsAg)as predictor of sustained HBsAg loss in chronic hepatitis B patients treated with pegylated interferon-α2a and adefovir[J].Antivir Ther,2013,18(7):895-904.

[5]Marcellin P,Ahn SH,Ma X,et al.Combination of tenofovir disoproxil fumarate and peginterferon α-2a increases loss of hepatitis B surface antigen in patients with chronic hepatitis B[J].Gastroenterology,2016,150(1):134-144.

[6]中华医学会肝病学分会,中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)[S].中华临床感染病杂志,2015,28(6): 321-340.

[7]Wursthorn K,Lutgehetmann M,Dandri M,et al.Peginterferon alpha-2b plus adefovir induce strong cccDNA decline and HBsAg reduction in patients with chronic hepatitis B[J].Hepatology,2006,44 (3):675-684.

[8]Manesis EK,Hadziyannis SJ.Interferon alpha treatment and retreatment of hepatitis B e antigen-negative chronic hepatitis B[J].Gastroenterology,2001,121(1):101-109.

[9]Zhang X,Zoulim F,Habersetzer F,et al.Analysis of hepatitis B virus genotypes and precore region variability during interferon treantment of Hbe antigen negtive chronic hepatitis B[J].J Med Virol,1996,48 (1):8-16.

[10]Lopez-Alcorocho JM,Bartolome J,Cotonat T,et al.Efficacy of prolonged interferon-alfa treatment in chronic hepatitis B patients with HBeAb:comparison between 6 and 12 months of therapy[J].J Viral Hepat,1997,1:27-32.

[11]Marcellin P,Bonino F,Lau GK,et al.Sustained response of hepatitis B e antigen-negative patients 3 years after treatment with peginterferon alpha-2a[J].Gastroenterology.2009,136(7):2169-2179.

[12]Chen X,Cao Z,Liu Y,et al.Potent hepatitis B surface antigen response to treatment of hepatitis-B-e-antigen-positive chronic hepatitis B with α-interferon plus a nucleos(t)ide analog[J].J Gastroenterol Hepatol,2012,27(3):481-486.

[13]Tatulli I,Francavilla R,Rizzo G,et al.Lamivudine and alpha-interferon in combination long term for precore mutant chronic hepatitis B [J].J Hepatol,2001,35(6):805-810.

Efficacy and safety of peginterferon alfa-2a combined with entecavir in treatment of HBeAg-negative chronic hepatitis B

LI Ai-xin,CAO Zhen-huan,WANG Wen,ZHANG Hong-wei,ZHANG Tong,WU Hao.Department of Infectious Disease,Beijing You'an Hospital,Capital Medical University,Beijing 100069,CHINA

ObjectiveTo investigate the efficacy and safety of peginterferon alfa-2a(Peg-IFNα2a)combined with entecavir(ETV)in treatment of patients with hepatitis B surface antigen(HBeAg)-negative chronic hepatitis B (CHB)for 48weeks.MethodsA total of 50 consecutive patients with HBeAg-negative CHB who received Peg-IFNα 2a(135 μg/weeks)combined with ETV in Beijing You'an Hospital,Capital Medical University from June 2013 to June 2015 were enrolled.Clinical data(including HBV DNA and HBsAg levels)were collected at 12-week intervals throughout the treatment course.HBV DNA undetectable rate,HBsAg clearance rate and adverse reactions were analyzed.ResultsFor all patients,the 48-week treatment of Peg-IFNα2a combined with ETV reduced the level of HBV DNA below the detection threshold(＜20 IU/mL).The rates of HBsAg clearance and seroconversion were 24%and 16%, respectively.Adverse reactions mainly manifested as fever,fatigue,hair loss,loss of appetite,skin rash and hypothyroidism,which were relieved after symptomatic and supportive treatment.ConclusionPeg-IFNα2a combined with ETV can improve the HBsAg clearance rate of HBeAg-negative CHB,and has a good safety,which appears to be a promising treatment strategy.

Entecavir(ETV);Chronic hepatitis B(CHB);Combination therapy;Hepatitis B surface antigen (HBsAg);Peginterferon alfa-2a(Peg-IFNα2a);Seroconversion

R512.6+2

A

1003—6350（2017）05—0712—03

2016-08-08)

吴昊。E-mail：whdoc@sina.com

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.05.008