2013—2016年中国部分地区猪伪狂犬病野毒株感染血清学调查

赵 青，焦连国，王冬梅，闫国晖，王香玲，姬莹莹，王贵华，赵亚荣

（1.北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心，北京 100195；2.北京市畜禽生物制品工程技术研究中心，北京 100195）

2013—2016年中国部分地区猪伪狂犬病野毒株感染血清学调查

赵 青1，2，焦连国1，2，王冬梅1，2，闫国晖1，2，王香玲1，2，姬莹莹1，2，王贵华1，2，赵亚荣1，2

（1.北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心，北京 100195；2.北京市畜禽生物制品工程技术研究中心，北京 100195）

为了解2013-2016年中国部分地区猪伪狂犬病（PR）野毒感染及其分布情况，采用gE-ELISA方法对采自8个省市742个猪场16 675份血清样品进行了猪伪狂犬病野毒感染的血清学调查。结果表明：742个猪场中有549个PR野毒阳性场，猪场阳性率为73.99%；16 675份血清中有6 298份为阳性血清，血清阳性率为37.77%。在所检测的8个省市中以北京、天津、河北、河南的场阳性率和血清阳性率较高。说明我国部分地区普通存在PRV野毒感染，并呈散发性流行，提示我国规模化猪场的PR防治工作仍需加强。

猪伪狂犬病；gE 基因；gE-ELISA；血清学调查

猪伪狂犬病（pseudorabies）是由伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的猪和其他动物共患的一种急性传染病，以发热、脑脊髓炎等为主要特征[1]。1813年本病在美国首次发生，其临床症状与狂犬病很相似，所以称为伪狂犬病。1902年由匈牙利学者Aladar Aujeszky首次报道本病，因此该病又被称为Aujeszky’s disease（AD）[2]。猪是该病的主要宿主和传染源，该病的临床表现主要以妊娠母猪和哺乳仔猪最为严重：PRV导致妊娠母猪流产、产死胎以及木乃伊胎；仔猪常表现高热、食欲废绝、呼吸困难以及神经症状等[3]。自2011年在我国又暴发后，给我国养猪业造成极大的经济损失。

gE基因是PRV重要的毒力基因之一[4]，是至今发现的所有的野毒株都表达的一种糖蛋白，介导着病毒从细胞到细胞之间的扩散，对病毒侵染神经系统也具有重要作用。gE基因也是世界动物卫生组织所规定基因缺失疫苗的缺失基因[5]。因此gE基因缺失可作为标志基因，区别感染动物和接种动物，为剔除阳性的野毒感染动物，根除本病提供良好的方法，而且gE-ELISA具有高度的特异性和灵敏性，适合大范围的血清流行病学调查[6]。为了解中国部分地区猪伪狂犬病的野毒感染情况，现将2013-2016年规模化猪场的PRV野毒抗体监测报告如下。

1 材料与方法

1.1 待检血清

血清样品16 675份采自2013-2016年北京、天津、河北、河南、山东、山西、江苏、黑龙江8个省市742个规模化猪场。

1.2 检测试剂仪器

PRV gE-ELISA抗体检测试剂盒，购自西班牙HIPRA公司；检测仪器为酶标仪（Multiskan MK3)，购自美国Thermo公司。

1.3 检测方法

采用阻断ELISA方法来检测猪伪狂犬野毒抗体。

1.4 结果判定

结果判定依据试剂盒说明书，设2孔阴性对照和2孔阳性对照，其中设P=阳性对照OD450，N=阴性对照OD450，阻断率=（阴性对照OD450-样品OD450）/阴性对照OD450，当N-P＞0.6，(N-P)/N＞60%，试验成立，通过阻断率来判断结果。阻断率＞45%为阳性；阻断率＜40%为阴性；40%≤阻断率≤45%为可疑。

2 结果

2.1 2013-2016年不同年份部分地区猪场PRV野毒株抗体检测

如表1和图1所示，中国部分地区在2013-2016年检测的742个猪场中，有549个为PRV阳性猪场，猪场的总阳性率为73.99%；2013-2016年共检测16 675份血清，其中6 298份为阳性血清，总的血清阳性率为37.77%。2013年检测172个规模化猪场，阳性猪场为126个，猪场阳性率为73.26%；2013年检测2 877份血清样品，其中1 434份为阳性血清，血清样本阳性率为49.84%；2014年检测158个规模化猪场，阳性猪场为114个，猪场阳性率为72.15%；2014年检测3 091份血清样品，1 261份为阳性血清，血清样本阳性率为40.80%。2015年检测205个规模化猪场，阳性猪场为154个，猪场阳性率为75.12%；2015年检测5 185份血清样品，1 694份为阳性血清，血清样本阳性率为32.67%。2016年检测207个规模化猪场，阳性猪场为155个，猪场阳性率为74.88%；2016年检测5 522份血清样品，1 909份为阳性血清，血清样本阳性率为34.57%。结果表明，2013-2016年期间，猪场的PRV野毒感染率均在70%以上，血清样品阳性率在30%～50%，说明我国规模化猪场普遍存在PRV野毒株感染，猪场的PR防控及净化工作尤其重要。

2.2 2013-2016年部分地区猪场PRV野毒株抗体检测结果

2013-2016年对国内8个省市进行了PRV野毒抗体检测，如表2和图2所示，北京、天津、河北、河南的PRV猪场阳性率均高于平均水平（73.99%），其他省份的PRV猪场阳性率为37.01%～69.01%。北京、天津、河北、河南的PRV血清样本阳性率高于平均水平（37.77%），其他省份的PRV血清样本阳性率为8.57%～41.30%。结果表明，在检测的8个省市中，均存在PRV野毒感染，但是感染的程度有所差异，其中北京、天津、河北、河南的猪场阳性率与血清样本阳性率均高于平均水平，说明这4个省市的猪场PRV野毒感染率较高，PRV呈散发性流行。

3 讨论

目前，猪伪狂犬病在我国大部分省份均有发生，国内大部分猪场感染PRV野毒，是母猪繁殖障碍、断奶前仔猪死亡率高的主要原因之一。尤其是近几年，伴随着我国养猪业规模化的发展，猪伪狂犬病在不少地区时有暴发与流行，严重阻碍了养猪业的可持续发展。本调查研究结果显示：对2013-2016年期间8个省市，742个猪场，16 675份血清样本进行PRV野毒抗体检测，猪场阳性率为73.99%，血清样本阳性率为37.77%，说明我国普遍存在PRV野毒感染。叶晶等[7]对2010-2014年5个省份送检的猪血清进行检测，血清样本阳性率为20.3%；邹敏[8]等对2012-2013年18个省市，393个猪场进行PRV野毒抗体检测，猪场阳性率为22.02%，血清样品阳性率为16.13%；周绪斌[9]等对2007年11个省市的规模化猪场进行了PRV野毒监测，猪场阳性率为63.4%，血清样本阳性率为14.8%。表明近几年我国PR的发生地区迅速扩大，控制及净化PR对各大规模化猪场来说变得尤为重要。

国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）提出猪场疫病净化目标，但是我国还没有大规模全面实施PR根除计划，各大养殖场由于猪只的无序流通、猪群免疫密度与强度低、生物安全不到位、PRV毒力的增强等原因，造成我国猪场PR的再次流行[10]。所以国家主导，政府主管部门监督，猪场具体实施的PR根除计划，已经迫在眉睫。

欧美一些发达国家通过利用gE基因缺失疫苗免疫，并定期实施检测与淘汰，已经将PR成功的净化[11]。我们建议猪场使用优质的gE基因缺失疫苗强化免疫并定期对种猪群采血监测并淘汰阳性猪，注重后备猪的健康选择，逐渐建立阴性猪群，再加以配合相应的生物安全措施，使我国猪伪狂犬病的流行态势得到根本好转[12]。

表1 2013-2016年猪场PRV野毒株抗体检测

图1 2013-2016年猪场PRV野毒株抗体检测

表2 2013-2016年部分地区猪场PRV野毒株抗体检测

图2 2013-2016年部分地区猪场PRV野毒株抗体检测

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2017-02-24）