张砚亮 (山东省安丘市畜牧局 262100)
简述鸡大肠杆菌病的诊治
张砚亮 (山东省安丘市畜牧局 262100)
为减少鸡大肠杆菌病对禽类养殖产业造成危害,通过对鸡感染大肠杆菌发生的临床症状,剖检变化的进行分析,并采用药敏试验和其他实验室诊断技术,对大肠杆菌病进行确诊,并根据其发病情况及耐药情况制定相应的预防和治疗措施,以达到减轻大肠杆菌病危害的目的。
鸡大肠杆菌病,是一种由致病性大肠埃希杆菌引起的一类感染鸡的急性或慢性传染病,是一种多病型的家禽疾病的总称,大肠杆菌属于革兰氏阴性菌,通常在鸡群中表现出的症状有输卵管炎,败血病,卵黄性腹膜炎,肉芽肿等一系列的疾病,且该病易于其他疾病并发或被其他疾病继发,易导致鸡群发生大规模的死亡,死亡率高达70%~90%,对养殖行业造成巨大的经济损失。该病在各个年龄段的鸡群中均有易感性,其中在雏鸡阶段最容易感染,因此需要在各个时期做好鸡群大肠杆菌病的诊断与防治,以减少大肠杆菌病对禽类生养殖行业造成的损失。
该病易感于大部分禽类,一年四季都容易发生,其中春季和冬季最易感,主要原因是春冬季节寒冷,鸡舍内通风环境不良,空气环境污浊,粪便清理不及时等原因引起的鸡群呼吸道疾病的发生,使鸡群对疾病的抵抗能力下降,易继发引起禽流感或新城疫,同时并发大肠杆菌病。同时该病通常会通过垂直传播的方式,由上一代的发病个体传播到下一代,在种蛋运输过程中污染也容易引起大肠杆菌病,加之,近年来养殖户以抗生素作为防控大肠杆菌病的唯一措施,导致大肠杆菌对部分药物的耐药性不断提高,使部分免疫程序失去作用。
大肠杆菌病一般分为急性大肠杆菌病和亚急性或慢性大肠杆菌病,急性大肠杆菌病一般已发生在雏鸡阶段,主要表现出来的症状为急性败血症,发病时表现出的症状为,体温异常,在较短的时间内升至41~43 ℃,鸡群精神状态较差,精神萎靡,食欲减退乃至废绝,腹泻,粪便呈黄白色,如不及时治疗,将在3-5天内死亡,有部分鸡不表现上述症状,突然死亡,但死亡数量相对较少。亚急性或慢性鸡大肠杆菌病一般在150日龄左右的成年鸡中发生,一般表现出的症状为,鸡群精神沉郁,对外界刺激反应弱,行走不稳,羽毛蓬乱无光泽,肛门污秽,食欲废绝,口渴,但饮水量减少,体形消瘦,生长发育迟缓,下痢等,蛋鸡还表现为产蛋量下降,产蛋质量差,易出现软壳蛋,沙皮蛋。
通过剖检通常可发现以下症状,剖开腹腔后,有强烈的恶臭,心包有淡黄色的液体淤积,部分鸡出现心包膜与心外膜发生粘连;肝脏淤血,呈紫黑色,表面出现黄色纤维性渗出物;肺部淤血,肿大;胆囊、脾肿大,输卵管扩张;卵泡软化、坏死,容易产生腹膜炎;肠道黏膜充血,出血,水肿[1]。
通常可以在实验室内采用细菌分离培养和革兰氏染色镜检以及细菌学鉴定的方法来进行实验室诊断。
4.1 细菌分离培养 将采集样品的病变组织分别接种于不同培养基中(包括LB肉汤,LB琼脂培养基,SS琼脂培养基,伊红-美蓝培养基,麦康凯培养基),放置于37℃恒温培养箱中培养20~24h,通过观察细菌生长情况来确定是否是大肠杆菌。大肠杆菌在LB肉汤中生长情况良好,均匀生长,液体浑浊;在LB琼脂培养基上形成圆形、表面光滑、半透明的灰白色菌落;在麦康凯琼脂培养基上形成圆形、大小均一、光滑的粉红色菌落;在伊红美蓝培养基上呈现深紫黑色、光滑、湿润、带有金属光泽的圆形菌落[2]。
4.2 革兰氏染色镜检 直接将不同部位的病料涂片,然后进行革兰氏染色,观察显微镜下是否会出现,两端钝圆的杆菌,无芽孢和荚膜形成,能运动,周身鞭毛。
4.3 细菌学鉴定 综合多种试验方法对细菌做出的详细而准确的鉴定方法,首先对菌株进行分离纯化,再进行染色、镜检,观察菌落的培养性状,进行菌落荧光性检查以及生化鉴定,对所分离纯化的细菌进行生化鉴定。大肠杆菌能分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、不分解蔗糖,不产生硫化氢;利用枸橼酸盐阴性,不液化明胶,甲基红试验为阳性,V-P试验为阴性[3]。
采用美国临床实验室标准化委员会推荐的微量稀释法,分离纯化大肠杆菌进行以下几种常规药物敏感试验,测定其抑菌圈直径[4]。例如硫酸阿米卡星,硫酸链霉素,氟苯尼考,盐酸沙拉沙星,硫酸庆大霉素,硫酸粘霉素,盐酸恩诺沙星,氨苄西林钠,强力霉素,青霉素,复方甲砜霉素,多粘菌素等药物进行药敏试验,步骤:(1)菌悬液的制备:将分离的菌株三区划线接种于脑心浸液琼脂上,37°恒温培养过夜后,使用接种环或者高压过的牙签挑取单个菌落接种于2ml的MH肉汤中,在37°摇床振荡培养5~6h后。用空白肉汤稀释培养菌液,使其比浊0.5麦氏比独标准,此时菌液浓度约1~2×108 CFU/ml,再将其稀释1000倍,作为测试菌液,终浓度为1~2×105 CFU/ml。(2)用肉汤将各种测试抗菌药物旳储备液作倍比稀释成个梯度,分别为256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5ug/ml。用微量加样器将稀释好的药物从低浓度到高浓度依次加入96孔细菌培养板1~10排的孔内,每孔100ul。然后将测试菌液从低浓度到高浓度依次加入孔1~10内,每孔100ul。第11孔加测试菌液作为阳性对照(有菌无药);第12孔加200ul空白肉汤作为阴性对照(无菌无药)。整个孔细菌培养板加好药液、菌液并合上盖后,在桌面螺旋推动以充分混匀孔内液体,放37℃培养18~24h后置黑色桌面观察结果。细菌生长时孔内呈弥散状混池或孔底有圆形或丝网状沉淀。无细菌生长孔内所含最低抗菌药物浓度即为测试菌株对该药物的MIC值[5]。
6.1 预防 为提前减少疾病的发生,通常提前采取常规的预防措施。(1)做好厂区选址并设立隔离区,厂区应当在地势高的下风口、水源良好,充裕、排水方便,并远离其他禽类养殖场,屠宰场及禽类产品加工工厂。(2)保持鸡舍内环境良好,增加通风,保证空气质量,减少鸡舍内有害气体的浓度和粉尘,及时清理鸡粪,定期对鸡舍和周边环境进行消毒。(3)加强饲养员对鸡舍饲养管理的意识,及时淘汰和处理病、残、弱、死鸡,保证鸡舍内的饲料、垫料、饮水干净,无污染,同时可在水中加入氯制剂,保证水质清洁,也可起到防治大肠杆菌病的作用。(4)做好日常的病毒病如新城疫、禽流感、传染性法氏囊病、传染性支气管炎、马立克氏病等的免疫工作,制定科学的免疫程序,合理免疫,同时也要控制好支原体、传染性鼻炎、等细菌病的发生和传播,定期进行免疫监测,保持良好的免疫水平[6]。(5)种蛋鸡场和孵化场同时要加强对种蛋、孵化器、运输车辆的消毒,在运送过程中注意做好种蛋的防护和清洁,保证周围环境卫生。同时对死亡的雏鸡,废蛋进行无害化处理,深埋并在周围撒石灰消毒。
6.2 治疗 当疾病发生时,要考虑使用药物治疗的方式来对发病群体进行治疗。通常来说能够通过大肠杆菌病的药物很多,例如庆大霉素,氧氟沙星,氟苯尼考,土霉素,复方新斯的明,强力霉素等,但由于近年来抗生素的滥用和过度使用,导致大肠杆菌对大量的抗生素产生耐药性,为了避免因细菌产生耐药性而导致的错误用药,应根据药敏试验得出的结果,得出该厂治疗大肠杆菌的药物的耐药性和敏感性的详细报告,并根据报告内容,对已经产生耐药的药物停止使用,以免用到无效药物。在实际用药的过程中,应尽量选择敏感性较高的药物,但不能连续使用同一种药物,应该采取交替用药或轮换用药的方式。在用药时要保证药物的剂量充足,在发病后应进行紧急治疗。
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1007-1733(2017)08-0062-02
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