浅谈接种疫苗动物和感染动物的区分

王 乐

（辽宁省朝阳市动物疫病预防控制中心 122000）

浅谈接种疫苗动物和感染动物的区分

王 乐

（辽宁省朝阳市动物疫病预防控制中心 122000）

1 关于口蹄疫的基本情况

关于疑似口蹄疫的最早描述是由意大利修道士希罗尼穆斯弗拉卡斯于1514年在威尼斯提出。患病的动物拒绝饮食，口腔黏膜呈红色，在口腔及脚上有水泡，而且大多数患病动物最终能够康复。这500多年前的描述与目前流行的口蹄疫具有很强的相似性。口蹄疫是影响偶蹄动物最重要的疾病之一，涉及到的动物包括牛、水牛、猪、绵羊、山羊等大约70种左右的野生动物[1]。这种疾病几乎在世界上每一个养殖家畜的地方都有存在。全世界超过100个国家仍然受口蹄疫疾病的影响。一些经济比较发达的国家已经根除了这种疾病。然而，一些无疫病的国家一旦遭受口蹄疫的入侵，将会引发巨大的经济损失。

2 口蹄疫症状及其感染

口蹄疫是一种发病和传播都极为迅速的传染病,主要临床表现包括口炎、心肌炎、心机功能衰退、口腔及脚上有水泡或者腐烂等，在我国被列为一类动物疫病，目前采取注射口蹄疫疫苗的方式来预防猪群感染。对于无口蹄疫和口蹄疫零星爆发的国家检测已感染FMDV的动物是极其重要的。以前感染过口蹄疫病毒的动物和接种疫苗的动物血清中都存在相应血清型的血清中和抗体，在贸易动物的流通中，区分以前受FMDV感染的动物和刚刚接种疫苗的动物十分关键[2]。这些动物的口咽部在感染后28天仍然携带着具有传染性的病毒。这些感染动物虽然在临床症状上是正常的，但是可能长期携带病毒，对于牛来说，可能继续携带病毒2～3年，这样的动物将成为一个传染源，将病毒传染给其他动物。事实上，这一过程已在非洲水牛身上得到证实，但在单独对黄牛进行的试验中并没有发现上述过程。动物感染病毒后，会产生具有免疫原性的结构蛋白(SP)和非结构蛋白(NSP)。由纯化灭活病毒146S作为疫苗诱导的抗体几乎完全是针对病毒的SP。因此，关于如何区分感染动物和接种疫苗的动物的问题，可以通过对NSP抗体的检测进行解决。

3 关于NSP抗体的检测

检测NSP抗体可以区分感染和免疫动物以及另外一些已报道的使用蛋白质包括单个蛋白2C或3ABC。早期检测使用放射免疫沉淀和酶联免疫电转移印迹分析技术检测NSP抗体。但是，面对大量血清样品时，放射免疫沉淀和酶联免疫电转移印迹分析技术无法进行快速检测，因此酶联免疫吸附试验(ELISA)作为一种替代技术被开发。目前，已经建立了一些检测FMDV NSP抗体的ELISA。然而，这些ELISA实验中使用了具有特异性的结合物，为同时检测来自不同物种的血清造成了困难。利用杆状病毒表达FMDV NSP作为抗原，将豚鼠体内产生相应的多克隆抗体作为捕获和检测抗原的结合物，从而，开发了具有独立性的阻断ELISA。后来多克隆抗体被替换为高通量的单克隆抗体。

4 NSP抗体检测的局限性

由于NSP抗体的长期存在[3]，阳性动物可能是病毒的携带者，但是不一定仍然处于感染状态。然而，检测NSP抗体并不能用于检测动物是否携带病毒，因为一些持续感染动物的血清没有对NSP的抗体[4]。在以前接种过疫苗的动物体内可能存在较少病毒的复制，使得动物处于带毒状态。目前，没有血清学试验是可以区分口蹄疫病毒携带者和具有血清学反应的动物。此外，如果疫苗来自没有纯化的细胞培养上清液和/或含有不同程度病毒NSP蛋白的污染，尤其是多种疫苗重复接种时，很难区分疫苗接种和先前感染的动物。

[1] 卢曾军, 刘在新. 口蹄疫病毒研究概况[J]. 中国兽医科技, 2003(2): 69-74.

[2] 吉艳红, 刘艳红. 用口蹄疫病毒非结构蛋白鉴别感染动物与疫苗免疫接种动物[J]. 动物医学进展. 2009, 30(10):101-104.

[3] Paton DJ, Ferris NP, Hutchings GH,.2009. Investigations into the cause of foot-and-mouth disease virus seropositive small ruminants in Cyprus during[J]. Transbound Emerg Dis, 2007, 56: 321–328.

[4] Brocchi E, Bergmann I, Dekker A, et al. Comparative evaluation of six ELISAs for the detection of antibodies to the non-structural proteins of foot-and-mouth disease virus[J]. Vaccine, 2006. 24: 6966–6979.

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