血清高尔基体膜蛋白73在原发性肝细胞癌早期诊断中的应用

陈 飞， 曾传琴， 欧 彬

(四川大学华西广安医院病理科， 四川 广安 638001)

血清高尔基体膜蛋白73在原发性肝细胞癌早期诊断中的应用

陈 飞， 曾传琴， 欧 彬

(四川大学华西广安医院病理科， 四川 广安 638001)

目的：探讨血清高尔基体膜蛋白73(GP73)诊断原发性肝细胞癌(HCC)的临床价值。方法：选取2014年7月至2015年7月期间我院接收的门诊、住院和健康体检人群300例，将其分为5组，分别为HCC组、乙肝后硬化组、其他恶性肿瘤组、乙型病毒性肝炎组、健康对照组，检测5组的血清GP73、甲胎蛋白(AFP)水平，绘制其诊断HCC的ROC曲线。结果：HCC患者中，不同年龄、肿瘤大小、性别及不同AFP浓度患者的血清GP73水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；HCC组血清AFP、GP73水平较其他各组人群差异具有统计学意义(P<0.05)，慢性乙型肝炎组、乙肝后肝硬化组及其他恶性肿瘤组患者AFP、GP73均较健康对照组差异具有统计学意义(P<0.05)；GP73诊断HCC的特异性、敏感性均高于AFP，P<0.05。结论：血清GP73对HCC的诊断敏感性、特异性优于AFP，可作为HCC早期诊断的血清标记物。

原发性肝细胞癌； GP73； 慢性乙型肝炎； 乙肝后肝硬化； 恶性肿瘤； 早期诊断

原发性肝癌(PHC)是发病率位列我国第三的恶性肿瘤，其中以肝细胞肝癌(HCC)最为多见，发病率占PHC的90%[1]。HCC的预后与其发现阶段密切相关，越早发现，治疗效果就越好，但多数肝细胞肝癌患者一经诊断基本已处于晚期，往往治愈率极低。因此尽早诊断HCC对临床医师制定治疗方案，提高治愈率具有重要意义。甲胎蛋白(AFP)是既往早期HCC监测的主要指标，其特异度为70%～92%，敏感性为39%～65%之间，但患有肝硬化活动期、肝炎、睾丸癌、生殖腺胎瘤、卵巢癌等疾病时，其水平也会出现升高，而影响其对HCC的诊断。近年来，随着蛋白质组学、基因技术、肿瘤免疫等研究的快速发展，一系列新的肝癌肿瘤学标准物，如甲胎蛋白异质体-3(AFP-3)、肝癌缺失基因-1(DLD-1)、高尔基体蛋白-73(GP73)相继被人们发现，其中GP73被认为是最值得期待的肝癌血清标志物[2]。本研究中观察GP73在不同人群血清中的表达水平及差异，判断其在HCC早期诊断中的应用价值，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料:选取2014年7月至2015年7月期间我院接收的门诊、住院和健康体检人群，共300例，将其分为5组，分别为HCC组，58例，女12例，男46例，年龄40～75岁，平均(51.8±3.3)岁；乙肝后硬化组60例，女15例，男45例，年龄20～68岁，平均(45.6±3.5)岁；乙型病毒性肝炎组65例，女20例，男45例，年龄20～68岁，平均(40.8±6.3)岁；其他恶性肿瘤组(均经病理血确诊)50例，其中胰腺癌8例，胃癌19例，食管癌10例，胆囊癌1例，结肠癌4例，十二指肠癌3例，直肠癌5例，其中女14例，男36例，年龄20～86岁，平均(63.8±5.3)岁，健康对照组67例，其中女25例，男42例，年龄20～68岁，平均(36.5±4.3)岁。

1.2 方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测GP73，采用武汉华美生物工程有限公司提供的试剂盒；采用电化学发光法测定AFP，采用Cobas6000全自动生化免疫分析仪(瑞士罗氏公司)，试剂盒为配套试剂。根据实体或影像学检查对肿瘤病灶打下进行测量，将HCC分为瘤体<5cm和≥5cm两组。

2 结 果

表1 HCC组中不同情况患者的GP73值差异

2.1 HCC组中肿瘤大小、性别、年龄及AFP浓度不同的GP73值差异:HCC患者中，不同年龄、肿瘤大小、性别及不同AFP浓度患者的血清GP73水平比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

2.2 各组AFP和GP73表达水平:HCC组血清AFP、GP73水平较其他各组人群均要高(P<0.05)，慢性乙型肝炎组、乙肝后肝硬化组及其他恶性肿瘤组患者AFP、GP73均较健康对照组要高(P<0.05)，见表2。

表2 各组AFP和GP73表达水平差异

注：与健康对照组比较，*P<0.05；与HCC组比较，#P<0.05

2.3 血清AFP和GP73的ROC曲线分析应用:GP73曲线下面积为0.862，其用于诊断HCC的临界值为150μg/L，诊断HCC的特异度和灵敏度达到最佳，AFP的曲线面积为0.758，其用于诊断HCC的临界值为200μg/L时，诊断HCC的特异度、灵敏度最佳。

2.4 血清GP73和AFP检测对HCC诊断效能差异:GP73诊断HCC的特异性、敏感性、准确度均高于AFP，P<0.05，见表3。

表3 血清GP73和AFP检测对HCC诊断效能差异

3 讨 论

HCC是一种恶性程度高、进展快、病死率高的恶性肿瘤，肝内小的恶性病变采用影像学检查仍较难发现，而肿瘤越小，则治愈率越高，因此对HCC早发现、早诊断尤为重要。AFP作为传统肝癌标志物，大量床病例及长期观察显示，AFP特异性为70%～92%，敏感性为39%-65%之间[3]。理想的肿瘤标记物应具有高度的特异性，能将肝脏病变，如肝脏再生结节、肝硬化、肝炎等与原发性肝癌进行鉴别。同时它还能在HCC早期提示诊断，需要有高度的敏感性，且具有可重复、易检测及取样简单、安全的特征。而AFP诊断HCC的敏感性不够。本研究中AFP诊断HCC的敏感性、特异性分别为60.3%、71.1%，诊断价值不高。因此，寻找新的更加敏感的血清标志物显得尤为重要。GP73是一种高尔基体跨膜蛋白，由美国学者Ⅺadney等最早发现，并指出GP73在健康人体肝组织中，主要由胆管上皮细胞表达，而很少在肝细胞内表达甚至不表达[4]。在受到非病毒原因(自身免疫性肝炎或酒精性肝病)或病毒性感染均可引起GP73的高表达，此项研究为GP73应用于肝脏疾病的诊断提供理论依据。李庆芝[5]通过研究发现，HCC患者血清中GP73呈高表达，是正常肝脏GP73表达量的数十倍，其早期发现HCC的敏感度高于AFP。在HCC患者中GP73在血清中含量升高的机制目前仍不清楚，研究指出其转录调控机可能与以下几方面有关[6,7]：①血液中雌激素及骨化三醇水平；②体内乙肝病毒的复制；③血液中TNF-α和TCF-α含量；④肝硬化患者(与病原学无关)；⑤急慢性肝细胞损伤；⑥机体内弗林含量的变化等。

研究发现[8,9]，在急慢性肝炎患者，大部分肝脏细胞GP73呈高表达，而肝硬化患者其血清内GP73水平又进一步升高，发展到HCC时，GP73的表达达到高峰。本研究中，笔者得出HCC患者血清中GP73表达与患者的年龄、肿瘤大小、性别及AFP浓度等无明显相关性。而HCC组血清GP73水平较慢性乙型肝炎组、乙肝后肝硬化组均要高(P<0.05)，提示GP73可能与肿瘤的发生、发展有关，随着病情的进展，其血清内水平不断增高。另外，研究发现，GP73的病理表达不止是在肝脏。最近研究指出，在各种类型的腺癌组织中可见高尔基磷酸蛋白呈高表达，包括肾上腺癌、前列腺癌、结肠癌腺癌等，这可能会影响GP73对HCC的特异性。而本研究中，HCC患者血清GP73含量高于其他肿瘤患者，可见GP73可作为HCC早期诊断的血清标记物。GP73对HCC诊断的敏感性、特异性上，研究结果显示，GP73诊断HCC的特异度达92.8%，敏感性80.2%，这项研究显示出检测HCC患者GP73的高特异性和高敏感性。本研究中，应用ROC曲线对GP诊断HCC的准确性进行客观地评价，结果显示，GP73诊断HCC的特异度、灵敏度均高于AFP(P<0.05)，说明GP73对HCC的早期诊断有重要的临床价值。

[1] 孙启明,陈海波,顾玉明,等.比较两种方法检测血清高尔基体膜蛋白-73诊断肝细胞肝癌的价值[J].徐州医学院学报,2014,34(6):364～367.

[2] 江均昌,周林福.高尔基体驻膜糖蛋白73的研究进展及其与肝癌等疾病的联系[J].浙江大学学报(医学版),2012,41(2):215～221.

[3] 陈海波,顾玉明,王洵,等.高尔基体膜蛋白73在原发性肝癌患者血清中的表达及其早期诊断价值[J].介入放射学杂志,2014,23(6):528～531.

[4] 郑盛,唐映梅,杨晋辉,等.血清GP73和AFP单项与联合诊断原发性肝癌的价值[J].肝脏,2013,18(3):164～166.

[5] 李庆芝.血清高尔基体膜蛋白73在原发性肝细胞癌早期诊断中的应用[J].中国中西医结合外科杂志,2016,22(5):435～437,438.

[6] 巢映晖,傅华群.肝癌新的血清标记物高尔基体蛋白73[J].中华肝胆外科杂志,2011,17(12):1027～1029.

[7] 蔡媛媛,徐霞.Ⅱ型高尔基体膜蛋白GP73的研究进展[J].中国实验诊断学,2012,16(7):1328～1331.

[8] 童海江,王亚玲.血清高尔基体蛋白73检测在肝病患者中的意义[J].放射免疫学杂志,2012,25(2):219～220.

[9] 聂东雷,陈亚晗.血清高尔基体蛋白73与肝脏疾病研究进展[J].中华实用诊断与治疗杂志,2016,30(8):735～737.

The Application of Serum Golgi Membrane Protein 73 in Early Diagnosis of Primary Hepatocellular Carcinoma

CHENFei,ZENGChuanqin,OUbin

(TheWestChinaGuang'anHospital,SichuanUniversity,SichuanGuang'an638001,China)

Objective: To investigate the clinical value of serum Golgi membrane protein 73 (GP73) in the diagnosis of primary hepatocellular carcinoma (HCC).Methods：300 people including healthy people, outpatient and inpatient in our hospital from July 2014 to July 2015 were divided respectively into five groups as HCC group, posthepatitic b cirrhosis group, other malignant tumor group, chronic hepatitis B group and healthy control group. The level of Serum GP73 and alpha fetoprotein (AFP) were determined and the ROC curve of its diagnostic HCC was drawn. Result: There was no significant difference in the level of serum GP73 of the patients with different age, tumor size, gender and concentration of serum AFP in the HCC group (P>0.05). The level of serum AFP and GP73 of the patients in the HCC group were significantly higher than that in the other groups(P<0.05), while the level of serum AFP and GP73 of the patients in the chronic hepatitis B, posthepatitic b cirrhosis group and other malignant tumor group were significantly higher than that of the healthy control group(P<0.05). The specificity and sensitivity of GP73 in the diagnosis of HCC were significantly higher than those of AFP, P<0.05. Conclusion: The sensitivity and specificity of serum GP73 in the diagnosis of HCC are better than those of AFP. GP73 can be a serum marker in the early diagnosis of HCC.

Primary hepatocellular carcinoma; GP73; Chronic hepatitis B; Posthepatitic b cirrhosis; Malignant tumor; early diagnosis

四川省科技厅科研课题，(编号：2013JY02541)

1006-6233(2017)02-0263-04

A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2017.02.026