桑白皮中摩鲁新L的含量测定方法研究

2017-03-15 01:50薛天乐

宿州学院学报 2017年1期

关键词：桑白皮亳州测定方法

薛天乐，丁锐

亳州职业技术学院，亳州，236800

桑白皮中摩鲁新L的含量测定方法研究

薛天乐，丁锐

亳州职业技术学院，亳州，236800

为探索桑白皮中摩鲁新L含量的测定方法，利用高效液相色谱法对桑白皮中摩鲁新L含量进行了测定(色谱条件：Alltima C18色谱柱：4.6 mm×250 mm,5μm，流动相乙腈:水:乙酸=50∶50∶0.1，检测波长270 nm)，结果表明：摩鲁新 L在3.6～18 μg/mL之间线性良好(R2= 0.9993)，平均回收率为100.2%，RSD=1.1%。

桑白皮；摩鲁新L；高效液相色谱法

桑白皮是桑科植物桑(MorusalbaL.)的干燥根皮，是常用的中药材之一，有利水消肿、泻肺平喘的功效。近年来，有研究表明桑白皮还具有降血糖、降血压、降血脂、抗病毒、抗炎、止咳平喘等多种药理活性[1-6]，极具开发潜力。但是，2015年版的中国药典中还未给出桑白皮中有效成分含量的测定方法，限制了其应用。桑白皮中黄酮类化合物含量丰富，其中摩鲁新L的含量较大且和多种药理活性有关[7-8]，因此，本文拟建立桑白皮中摩鲁新L的含量测定方法，希望能为桑白皮的二次开发提供参考。

1 仪器与试剂

Agilent1100液相色谱仪(美国Agilent)，KQ2200超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司)，摩鲁新L(自制，经多种方法检测均为单体，高效液相色谱归一化法检测其纯度达到99.76%)，桑白皮饮片(亳州同仁堂饮片厂)，乙腈(色谱纯)，实验室用水为双蒸水，乙酸(色谱纯)，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 确定提取溶剂

分别采用氯仿，乙酸乙酯，40%、80%和无水甲醇等溶剂超声处理40min，结果显示氯仿和乙酸乙酯的提取效率差，而40%、80%及无水甲醇提取效率相当。无水甲醇无需配置，且提取物水溶性杂质小，因此以无水甲醇作为提取溶剂。

2.2 确定提取方法与时间

将桑白皮粉碎成粗粉，取6份，每份1.0g，分别加入无水甲醇50.0mL，用超声提取法和加热回流提取法分别提取20、40和60min，结果显示两种提取方法效率相当，均为处理60min提取率最高。与回流法相比，超声提取法具有不加热、有效成分损失少的优点，因此以超声提取60min作为制备方法。

2.3 对照品溶液的制备

准确称取经105℃干燥至恒量的摩鲁新L4.5mg，置于容量瓶中，用无水甲醇定容至25.0mL, 摇匀得0.18mg/mL对照品溶液，微孔滤膜(0.45μm)滤过，备用。

2.4 供试品溶液的制备

将桑白皮饮片粉碎成粗粉，精密称取1.0g，加无水甲醇50.0mL，超声提取60min，提取液浓缩，置于容量瓶中，再用无水甲醇定容至25.0mL，作为供试品溶液。

2.5 色谱条件

AlltimaC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)，流动相乙腈-水-乙酸(50∶50∶0.1);检测波长270nm，柱温室温，流速1.0mL·min-1。在此条件下摩鲁新L与其他组分均能达到基线分离(图1、2、3)。

2.6 标准曲线的绘制

精密吸取摩鲁新L对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分别置于10.0mL容量瓶中，以无水甲醇定容至刻度线，按“2.5”的色谱条件，进样量为20μL，以峰面积为纵坐标，对照品的质量浓度为横坐标，制定标准曲线，结果显示摩鲁新L在3.6～18μg/mL浓度之间线性良好，曲线方程为：y=112193x+26335，R2=0.9993。

2.7 精密度试验

精密吸取浓度为7.2 μg/mL对照品溶液，连续进样5次，结果如表1。