细胞色素氧化酶CYP1A2基因多态性与利培酮治疗汉族精神分裂症患者疗效的关联研究

元静，卫芋君，曾雷， 张艳，徐莉，周芳，冯国华，杨建中

·论著·

细胞色素氧化酶CYP1A2基因多态性与利培酮治疗汉族精神分裂症患者疗效的关联研究

元静，卫芋君，曾雷， 张艳，徐莉，周芳，冯国华，杨建中

目的：探对细胞色素氧化酶CYP1A2基因多态性与利培酮治疗汉族精神分裂症患者疗效的相关性。 方法：给予93例汉族精神分裂症患者单一利培酮治疗12周；治疗前后阳性与阴性症状量表(PANSS)、个人和社会功能量表(PSP)及认知功能评估；采用微测序分型技术(SNaPshot SNP)检测患者及100名汉族正常对照者(对照组)CYP1A2基因5个位点(rs2069514,rs2472304,rs35694136,rs4646427,rs762551) 多态性，分析CYP1A2基因多态性与利培酮疗效的关系。 结果：两组间5个多态性位点的基因型、等位基因频率及SNPs单倍型比较差异无统计学意义；5个多态性位点不同基因型患者间的临床疗效比较差异无统计学意义；多重线性回归分析发现部分多态性位点与利培酮治疗精神分裂症后阴性症状、一般病理学症状、PANSS总分、注意转移力、注意集中力的疗效有关。 结论：未发现细胞色素氧化酶CYP1A2多态性是汉族精神分裂症的易感基因相关证据；CYP1A2基因多态性与利培酮治疗的疗效相关。

细胞色素氧化酶； CYP1A2基因多态性； 精神分裂症； 利培酮

利培酮属于苯丙异噁唑衍生物，是常用的第2代抗精神病药之一，其在体内被细胞色素氧化酶P450系统的CYP2D6、CYP3A4代谢为药理作用相近的9-羟利培酮[1-2]，它们一起作为该药抗精神病的活性成份发挥作用[2]。有报道CYP1A2、CYP2D6 及CYP3A4基因多态性与抗精神病药疗效有重要关联[3]。本研究探讨CYP1A2基因多态性与利培酮治疗汉族精神分裂症疗效的关联关系。

1 对象和方法

1.1 对象

患者组：为2015年3月至2016年1月本院住院治疗的汉族精神分裂症患者93例；入组者均符合《美国精神障碍诊断与统计手册》第4版(DSM-IV)诊断标准；均为首次发病或既往未经过任何形式治疗；阳性与阴性症状量表(PANSS)>70分；排除患有严重脑器质性或躯体疾病、物质滥用者；其中男52例，女41例；年龄13～63岁，平均(37.7±12.2)岁；受教育年限0～16年，平均(7.7±3.6)年；病程0.5～44年，平均(6.4±7.4)年。患者或其监护人对本研究知情同意。对照组：为同期在我院进行健康体检的100位汉族成年人，其中男79人，女21人；年龄27～70岁，平均(51.4±7.7)岁。入组者无严重躯体疾病、酒精和/或药依赖史及精神病史，且自愿参加本研究并签署知情同意书。

两组间性别、年龄比较差异均无统计学意义。

1.2 方法

1.2.2 临床评估方法 治疗前后应用 PANSS评估患者的临床症状；个人和社会功能量表(PSP)评估社会功能；认知功能评估：瑞文标准推理测验测试观察力及思维能力，韦氏智能测验中数字识记法测验即刻记忆，数字划消测验测评注意力(数字划消-1:测试注意集中力，数字划消-2:测试注意转移力，数字划消-3:测试注意选择性)。

1.2.3 CYP1A2基因多态性检测方法 采集所有入组者的静脉血。通过haplpoview和hapmap软件对CYP1A2基因进行tag SNP筛选，根据最小等位基因频率(MAF)>10%，连锁不平衡参数D’=1，r2>0.8 (D’为连锁不平衡程度随距离的改变程度，r2为遗传标记与致病位点间的连锁不平衡系数)的单核苷酸(SNPs)多态性选取rs2069514(-2964G/A和 3860G>A或 CYP1A2*1C)、rs2472304、rs35694136(-2467delT或 CYP1A2*1D)、rs4646427和rs762551(C734A或-163C/A或CYP1A2*1F)5个SNP位点。利用基于荧光标记单碱基延伸原理的基因分型技术(SNaPshot SNP)[4]对入组者进行rs2069514、rs2472304、rs35694136、rs4646427和rs762551共5个SNP位点分型。

1.2.4 统计学方法 应用SHEsis在线软件检测Hardy-Weinberg平衡、成对多态位点连锁不平衡分析、基因频率及单倍型等分析。应用SPSS 17.0统计软件包进行统计分析，不同基因型之间测验量表得分采用方差分析或t检验、秩和检验;影响因素分析采用多重线性回归分析。

2 结果

2.1 患者组治疗情况

患者组均完成12周疗程；利培酮平均剂量为(3.12±1.12)mg/d。患者组中较常见的不良反应有便秘、体质量增加，极少数出现静坐不能、口干，经过对症处理或随治疗时间延长而消失。无严重不良反应发生。

2.2 患者组治疗前后各量表评分比较

治疗后患者组PANSS评分较治疗前明显减少；PSP、瑞文标准推理、数字识记、数字划消测验-2评分较治疗前明显升高(P均<0.01)。见表1。

表1 患者组治疗前后各量表评分比较±s)

注：**P<0.01

2.3 两组 CYP1A2基因型、等位基因频率及基因单倍型比较

两组 5个多态性位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡；两组间5个多态性位点基因型、等位基因频率比较差异无统计学意义。见表2。运用SHEsis软件对rs2069514、rs2472304、rs35694136、rs4646427、rs762551 SNP位点分别构建5位点、4位点、3位点、2位点的单倍型，未发现有统计学差异的单倍型。

2.4 各基因型患者治疗前后各量表评分差值比较

rs2069514、rs2472304、rs35694136、rs4646427、rs762551这5个多态性位点不同基因型患者治疗前后PANSS、PSP、数字记忆广度值、数字划消、瑞文推理评分差值比较差异无统计学意义。

2.5 基因多态性与利培酮疗效相关分析

分别以患者rs2069514基因型、rs2472304基因型、rs35694136基因型、rs4646427基因型、rs762551基因型以及基线评估分数为自变量(X)，不同症状治疗前后差值为因变量(Y)，进行逐步回归分显示，部分多态性位点与利培酮治疗精神分裂症后阴性症状、一般病理学症状、PANSS总分、注意转移力、注意集中力的疗效有关。见表3。

表2 两组 CYP1A2基因基因型及等位基因频率比较(例，%)

表3 4个位点基因型治疗前后部分量表评分差值比较±s)

表4 影响利培酮疗效的多因素分析

注：PANSS阳性差值的决定系数R2=0.510， PANSS阴性差值的决定系数R2=0.637， 精神病理分差值的决定系数R2=0.789， PANSS总分的决定系数R2=0.686， PSP差值的决定系数R2=0.418， 瑞文推理差值的决定系数R2=0.134，瞬时记忆差值的决定系数R2=0.173，数字划消-1净分差值的决定系数R2=0.330，数字划消-2净分差值的决定系数R2=0.545，数字划消-3净分差值的决定系数R2=0.215

3 讨论

肝脏微粒体细胞色素P450酶(CYP450)系统是促进药物生物转化的主要酶系统；在已经鉴定的多个P450同工酶中，CYP1A2为“增毒”同工酶，主要存在于肝脏中[5]。人类CYP1A2基因位于15号染色体[5-6]，长约718 kb，包含7个外显子和6个内含子。由其转录的mRNA总长3121 bp，mRNA翻译起始密码子从第2个外显子的第10位核苷酸开始。

通过同工酶活性测定得出CYP1A2基因有2处易发生移位，分别是5＇侧翼区-3860位点的G→A突变(rs2069514或-2964G/A或 CYP1A2*1C)和内含子1的-163位点的C→A突变(rs762551或C734A或CYP1A2*1F)。有研究[7]发现在吸烟人群中，5＇侧翼区-3860位点的G→A突变可降低CYP1A2酶的可诱导性，内含子1的-163位点突变纯合子的酶活性为其他基因型的1.6倍。本研究所筛选出的Taq SNPs中，也包含了上述两个位点；结果显示在汉族患者组和对照组中该基因5个SNP位点基因型、等位基因频率以及构建的单倍型比较差异无统计学意义；未发现CYP1A2基因多态性是精神分裂症易感基因的证据；此与Rodrigo等[8]、陈柯霖等[9]研究结果不一致，可能与患者病情、地域及人种等因素有关。

CYP1A2是多种抗精神病药的代谢酶，有研究[3]发现CYP1A2、 CYP2D6、CYP3A4基因多态性与抗精神病药疗效有关。Yan等[10]研究表明，CYP1A2基因的rs762551位点C等位基因频率在发生迟发性运动障碍的精神分裂症患者中明显高于未发生迟发性运动障碍的精神分裂症患者。多项研究[11-14]探讨了CYP1A2基因多态性与氯氮平、奥氮平所致不良反应的关联研究，但尚未得到统一结论。本研究对CYP1A2基因多态性与利培酮疗效的关系进行分析，未发现不同位点基因型患者在治疗前后PANSS总分、阳性症状分、阴性症状分及认知功能改善的比较存在差异性。CYP1A2基因多态性与抗精神病药疗效，特别是与认知功能变化之间是否有关?目前此类研究较少。通过对利培酮治疗精神分裂症疗效的影响因素进行分析，发现rs762551、rs2472304、rs2069514、rs35694136均参与了影响PANSS阴性症状、一般病理学症状、PANSS总分、注意转移力、注意集中力等疗效的回归方程。虽然不同基因型之间症状评分差值无明显差异，但在rs762551中，C/C基因型PANSS阴性症状分差值变化相对较大，A/A基因型变化相对较小，综合考虑，A/A基因型的精神分裂症患者可能为利培酮治疗阴性症状改善的危险因素；同理，在rs2472304中，A/G基因型在一般精神病学症状评分差值变化、PANSS总分差值变化较A/A相对大，A/G可能为利培酮治疗精神分裂症改善一般精神病学评分、PANSS总分的保护因素；在rs2069514中，G/G型PANSS总分差值变化、数字划消-2净分差值较A/A、A/G两型相对较大，G/G型可能为利培酮治疗精神分裂症改善PANSS总体以及注意转移力的保护因素；在rs3569413中，-/-型数字划消-1净分差值变化较T/T、T/-两型相对较大，-/-型可能为利培酮治疗精神分裂症改善注意集中力的保护因素。目前已有大量研究证实精神分裂症患者存在明显的注意损害，尤其对注意的选择、转移、控制和保持等方面有缺陷[15]。Sumiyoshis[16]综述中指出利培酮可以改善注意力这一结果与多数研究报道一致，也与本研究结果相符。此外，还发现部分多态性位点与利培酮治疗精神分裂症后PANSS总分、阴性症状分、一般病理学得分、注意集中力、注意转移力的改善有关。本研究样本量少，因此，这些结果还需要进一步扩大样本量，再次进行重复验证。

综上， 虽未发现CYP1A2基因是精神分裂症易感基因的相关证据，但精神分裂症患者经利培酮治疗后，其临床症状及认知功能改善可能与CYP1A2基因多态性相关。

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Association between cytochrome oxidase CYP1A2 gene polymorphisms and effecacy of risperidone in Chinese Han patients with schizophrenia

YUANJing，WEIYu-jun，ZENGLei，ZHANGYan，XULi，ZHOUFang，FENGGuo-hua，YANGJian-zhong.

DepartmentofPsychiatric,theSecondAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity,Kunming650101,China

Objective：To explore the association between cytochrome oxidase CYP1A2 gene polymorphisms and effecacy of risperidone in Chinese Han schizophrenia. Method：Ninty-three Chinese Han patients with schizophrenia (cases group) received 12-week risperidone treatment. And they were evaluated by positive and negative symptoms scale (PANSS),personal and social performance scale (PSP) and cognitive function before and after risperidone treatment，respectively. Using micro sequencing-genotyping technology(SNaPshot SNP) the CYP1A2 gene including 5 tags of single nucleotide polymorphisms (rs2069514,rs2472304,rs35694136,rs4646427,rs762551) in the patients and 100 Chinese Han normal controls (control group) were detect and compared. The correlation of CYP1A2 gene polymorphism and the efficacy of risperidone was analyzed. Results：The frequencies of genotype, allele and SNPs haploid type of the 5 tags of CYP1A2 gene between the two groups showed no significant difference. Multiple linear regression analysis indicated that partial polymorphism loci were correlated with PANSS scores (including negative symptoms, pathological symptoms commonly, PANSS total scores), attention transfer, attention concentration through risperidone treatment. Conclusion：There is no evidence that the cytochrome oxidase CYP1A2 gene is a susceptibility gene of schizophrenia. The effecacy of risperidone is related to CYP1A2 gene polymorphisms.

cytochrome oxidase； CYP1A2 gene polymorphisms； schizophrenia； risperidone

国家自然科学基金(81160170)

650101 昆明医科大学第二附属医院精神科

杨建中，E-Mail：:jzhyang2004@163.com

R749.3

A

1005-3220(2017)01-0004-05

2016-05-27

2016-10-18)