金银忍冬腋芽离体培养技术研究

张健+建德锋

摘要：以金银忍冬腋芽作为外植体进行离体培养技术研究，得出：把消毒后的腋芽切割成0.3毫米转入MS+KT 0.5 毫克/升+NAA 0.2 毫克/升培养基，分化率达到100%；然后将分化后的不定芽切割成1厘米小段转入MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升培养基，增殖效果最好；将增殖的大量茎段切割成2 厘米小段转入1/2 MS+IBA 0.8 毫克/升生根培养基中，生根效果最佳。

关键词：培养基配方；金银忍冬；腋芽

基金项目：吉林省高等学校大学生创新创业训练项目（2015004）

中图分类号： S567.7 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.01.017

金银忍冬（Lonicera maackii（Rupr.） Maxim.）又叫金银木，为落叶灌木，其多个器官均可入药，根可解毒截疟，茎叶祛风解毒，活血祛瘀，花淡、平，可祛风解表，消肿解毒，完全可代替金银花入药。目前，金银忍冬常用繁殖方法为播种和扦插。播种繁殖过程复杂且萌发率不高，扦插繁殖季节限制嚴格，管理方面要求较高，这些都影响到金银忍冬苗木的快速、大量、优质繁殖。随着器官离体培养技术的发展，利用其快速、高效、去毒的优点，本试验尝试采用离体培养技术进行金银忍冬繁殖。

1材料与方法

1.1试验材料

2016年6月20日于吉林农业科技学院校园挑选生长良好、无病虫害的金银忍冬植株，采集带腋芽的枝条若干，带回组培室实验室消毒接种。

1.2 试验方法

1.2.1材料处理 将采集回来的枝条切成小段，每段带一腋芽，在自来水下用流水冲洗20分钟，然后用0.5%的84消毒液浸泡15分钟，用无菌水冲洗3～4次，再放入0.05%次氯酸钠（NaClO3）溶液中浸泡8分钟，无菌水冲洗后放入超净台备用。

1.2.2培养基配方 初代诱导培养基：A1：MS+KT 1.0 毫克/升+NAA 0.1 毫克/升；A2：MS+KT 1.0毫克/升+NAA 0.2毫克/升；A3：MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.1 毫克/升；A4：MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2毫克/升。增殖培养基：B1：MS+KT 0.5毫克/升；B2：MS+KT 0.5 毫克/升+IAA 0.02毫克/升；B3：MS+KT 0.5毫克/升+IAA 0.04 毫克/升；B4：MS+KT 0.5毫克/升+IAA 0.06毫克/升；B5：MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.02毫克/升；B6：MS+KT 0.5 毫克/升+IBA 0.04毫克/升； B7：MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.06毫克/升。生根培养基：C1：1/2MS+IBA 0.5 毫克/升；C2：1/2MS+IBA 0.8毫克/升；C3：1/2MS+IBA 1.0 毫克/升L。以上培养基均添加琼脂6克/升，蔗糖30克/升，pH值均调整为5.6。

1.2.3培养条件 培养室湿度保持在80%，初代诱导阶段温度20℃，光照强度1600 Lx，光照时间12小时；继代增殖阶段温度25℃，光照强度2000 Lx，光照时间14小时；生根阶段温度25℃，光照强度3000 Lx，光照时间14小时。

2结果与分析

2.1 不同初代诱导培养基上诱导不定芽情况

腋芽茎尖接种后均有不同程度的分化。20天左右茎尖开始分化出愈伤组织，进而愈伤组织出现突起，后来突起分化出不定芽，接种后55天开始统计不定芽诱导生长情况，具体结果见表1。由表1可以看出，从A1～A4，分化率、平均芽数及芽高各不相同，比较得出A4（MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2 毫克/升）分化瓶数最多、分化率最高、平均芽数最多，平均芽高最高，为最佳的培养基。

2.2不同增殖培养基上增殖情况

不定芽切段转接到各继代增殖培养基配方，各小段开始生长，转瓶28天统计各瓶中苗木的增殖状况，具体结果见表2。由表2可以看出，B5增殖倍数最大，其次为B6和B7，说明添加NAA有利于增殖，综合比较，B6（MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升）增殖效果最好。

2.3不同生根培养基上生根情况

将继代增殖的苗切段转入生根培养基，25天统计各配方中苗木的生根状况，具体结果见表3。由表3可以看出，C1、C2、C3配方生根率均较高，说明1/2 MS配方中添加IBA有利于生根；比较C1、C2、C3配方，生根率均为100%，但C2平均根数最多，另产生的根系粗壮，所以，C2（1/2 MS+IBA 0.8毫克/升）最适合作为生根培养基。

3结论与讨论

通过4个培养基配比对金银忍冬腋芽进行诱导，得出诱导最佳配方为MS+KT 0.5毫克/升+NAA 0.2毫克/升，诱导率达到100%，产生的不定芽数较多，平均达到8个以上，且不定芽生长健壮；通过比较7个配比对苗木的增殖状况，得出MS+KT 0.5毫克/升+IBA 0.04毫克/升配方最有利于苗木增殖；通过比较3个配比对苗木的生根状况，得出1/2 MS+IBA 0.8毫克/升配方有利于生根，生根率达到100%。腋芽是植物的常见器官，另接种腋芽茎尖能达到脱毒的效果，所以本试验利用腋芽茎尖进行了离体诱导培养，另得出了诱导、增殖、生根三个阶段的最佳培养方式，试验仅针对培养室培养阶段进行比较，对于金银忍冬组培瓶苗的出瓶方式、基质选择、出瓶后管理栽培等方面还有待于进一步研究探讨。

参考文献

[1] 潭文澄，戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京：中国林业出版社，1996：54.

[2] 胡莹，杨柳青.山茶科植物组织培养研究进展[J].江苏农业科学，2008（02）：6-8.

作者简介：张健，2013级中药学专业学生，研究方向：植物栽培。

通讯作者：建德锋，硕士，副教授，研究方向：植物栽培。