青稞酒中甲醇含量的测定方法研究

蔡林森

(青海省产品质量监督检验所，青海西宁810001)

青稞酒中甲醇含量的测定方法研究

蔡林森

(青海省产品质量监督检验所，青海西宁810001)

利用气相色谱法测定青稞酒中甲醇的含量。采用毛细管柱CP-Wax57CB(50m×0.25mm×0.2μm)分离，用氢火焰检测器检测。载气：氮气，流速：40m L/min；燃气为：氢气，流速：100m L/m in；进样口温度200℃，柱温50℃，程序升温：50℃，保持3min；5℃/min升至180℃，保持2m in，检测器温度22℃，用外标法定量。结果表明，在0.02～0.4 g/100m L的线性范围良好，线性关系：y=1.58342×106x-2448.85，相关系数为0.9998，加标回收率为97.5%～105.0%，检出限为0.0002 g/100m L，该方法准确度高，操作简单，稳定性好。

青稞酒；甲醇；气相色谱法

青稞酒的酿造原材料主要是青稞，青稞细胞壁和细胞质中含有甲醇酯，在发酵过程中酒曲霉会与甲醇酯发生反应生成甲氧基，进一步生成甲醇。甲醇为易挥发性略有酒精气味的液体，毒性较大，在人体内可以转化为甲酸和甲醛，其毒性远远大于甲醇。少量的甲醇可以引起慢性中毒、恶心、视力模糊不清；过量的甲醇会导致失明，严重时可能导致死亡[1-4]。青稞酒在青海乃至其他省份深受消费者欢迎，因此严格控制青稞酒中甲醇的含量是关于食品质量安全的重要工作。国标GB/T 5009.48—2003中规定的方法是气相色谱法-填充柱和亚硫酸品红法，由于填充柱的分离效能较低，分析速度慢，样品用量多，而且亚硫酸品红法的前处理操作繁琐，准确度低[5-7]，因此，建立一种快速、高效、准确的方法测定青稞酒中甲醇的含量是非常必要的，本实验选用毛细管柱气相色谱法测定青稞酒中的甲醇，采用程序升温的方法分离，能使各组分完全分离，同时缩短了检测时间，改善了分离度，提高了分析效率。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

酒样：市售青稞酒。

试剂：甲醇，GBW（E）080647，中国计量科学研究院，乙醇，天津市恒兴化学试剂制造有限公司。

气相色谱仪：GC-2010，日本岛津，带自动进样器，氢火焰检测器；氢气发生器，HF-150，山东省滕州中科普分析仪器有限公司。

1.2 色谱条件

色谱柱条件：色谱柱：CP-WAX57CB（50m×0.25mm× 0.2μm）；载气N2，流速：40m L/m in；进样口温度200℃，柱温50℃，程序升温：50℃，保持3m in；5℃/m in升至180℃，保持2m in，检测器温度220℃。分离比10∶1，进样量：1μL。

1.3 甲醇标准溶液的配制

甲醇标准品的浓度为0.1 g/100m L，用该浓度的标液分别配制成0.01g/100m L、0.02 g/100m L、0.04g/100m L、0.05 g/100m L、0.06g/100m L、0.08g/100m L、0.1g/100m L的标准工作溶液，待上机测试。

2 结果与讨论

2.1 标准工作曲线线性范围的确定

根据国标青稞酒中甲醇含量的最高限定值0.04g/100m L，本实验选择了0.01g/100m L、0.02g/100m L、0.04g/100m L、0.05g/100m L、0.06g/100m L、0.08g/100m L、0.1 g/100m L为线性范围，每个标准点重复测定3次，取平均值作为最终的标准浓度；同时考察了各浓度点的标准偏差与浓度的关系，其比值为常数，选取了直线回归方程，得到的线性方程为：y=1.58342×106x-2448.45，相关系数为0.9998。

2.2 标准曲线的校准验证

取不同批次的甲醇标准品分别配制成浓度为0.02 g/100m L、0.04 g/100 m L、0.08 g/100m L的标准溶液。在相同条件下重复测定3次，偏差分别为2.0%、2.5%、2.5%，符合实验室质量控制的要求。结果见表1。

表1 标准曲线的验证结果

2.3 方法的准确度

在样品中加入已知浓度的标准物质，通过和样品完全相同的前处理方法，上机测试，测得的值减去原样品中的值后与理论加标的比值的百分数为加标回收率。回收率=（加标后测定值-样品中的含量）/理论加标量。本实验通过添加低、中、高3个浓度水平的标准品来评价准确度，结果见表2。该方法的加标回收率为97.5%～105.0%之间，完全符合实验室质量控制在80%～120%的要求。

表2 方法的准确度

2.4 方法的精密度

在相同的条件下进行相同的实验操作，本实验通过对0.06 g/100m L的标准溶液重复测定7次，其甲醇的含量检测结果及分析结果见表3。结果表明，相对标准偏差＜1，说明该方法的精密度完全符合分析检测的要求。

2.5 方法的检出限

方法检出限是表示分析方法的重要参数之一。分析方法的检出限与仪器噪音，样品的性质，前处理方法，试剂等都有直接的关系。为了能够准确的反映整个分析方法在分析过程中的误差，可采用标准物质按方法的分析步骤进行检测，本实验通过分析12份已知的标准品计算方法的检出限。计算公式如下：CL=KSC/X，其中：CL为方法的检出限,g/100m L；K为置信因子，一般取3；S为样品测量值的标准偏差；C为样品含量值，g/100m L；X为样品测量值的平均数。本实验取12份0.002 g/100m L的甲醇标准品，按照测定方法进行测定，测定结果见表4。按公式计算检出限，为0.0002 g/100m L。

表3 方法的精密度

表4 方法检出限的测定结果

2.6 样品检测

抽取了青海省26家青稞酒厂的52个青稞酒样品，用该方法进行检测，均未检出甲醇。

3 结论

本实验通过优化色谱条件，建立和校准了标准曲线，验证了方法的准确性和精密度，计算最低检出限，确保了该方法准确可靠，测试结果有保证，该方法完全适用于青稞酒中甲醇的测定。

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Determination of Methanol Content in High land Barley Liquor

CAILinsen
(Qinghai Product Quality Supervision and Inspection Institute,Xining,Qinghai810001,China)

The content of methanol in highland barley liquor was measured by GC.The technical conditions were summed up as follows: CP-Wax57CB capillary column with size of 50m×0.25mm×0.2μm,FID detector;nitrogen was the carrier gaswith its flowing speed as 40m L/min,the flowing speed of fuel gas(hydrogen)was 100mL/min;the entry temperature was at 200℃,the column temperature was at 50℃,the programmed temperature was at50℃for3min,then temperature rise to 180℃at the speed of 5℃/min and temperature at180℃hold for 2 m in,the detector temperature was at 220℃,and the content was calculated by external standard method.The results showed that, the linear relationship in the range of 0.02～0.4 g/100mL was good,the equation was obtained was y=1.58342×106x-2448.85with the correlation coefficient of 0.9998,the recovery rate was97.5%to 105%,and the detection limit was0.0002 g/100mL.This method had the advantages including high accuracy,simple operation,and good stability.

highland barley liquor;methanol;gas chromatography

TS262.3；TS261.7；TS261.4

A

1001-9286（2017）02-0128-02

10.13746/j.njkj.2016310

2016-10-21

蔡林森（1986-），男，重庆开县人，硕士研究生，助理研究员，研究方向为材料化学和食品分析。

优先数字出版时间：2017-01-04；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20170104.1446.008.htm l。