支气管扩张症合并哮喘患者中IL-4和IFN-γ的表达水平及临床意义

张海宁 张晴 张辉 林苏杰 杨俊玲



·呼吸病研究·

支气管扩张症合并哮喘患者中IL-4和IFN-γ的表达水平及临床意义

张海宁1，2张晴1张辉1林苏杰1杨俊玲1

目的 检测支气管扩张症合并哮喘患者外周血清白介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)的表达水平，并分析其临床意义。方法 按照支气管扩张及哮喘的诊断标准将41例支气管扩张和哮喘患者分为A、B、C组，其中14例支气管扩张患者为A组，12例哮喘患者为B组，15例支气管扩张合并哮喘患者为C组，7例健康体检者为D组。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定上述各组研究对象血清中IL-4、IFN-γ的表达水平。结果 (1) 外周血清IL-4的表达水平：支扩合并哮喘组IL-4的表达水平317.02±53.53ng/L高于支扩组279.02±44.24ng/L，低于哮喘组367.60±45.10ng/L，差异有统计学意义(P<0.05)。(2) 外周血清IFN-γ的表达水平：支扩合并哮喘组患者血清中IFN-γ的表达水平241.68±50.33 ng/L低于支扩组295.65±77.10ng/L，高于哮喘组153.76±26.69 ng/L，差异有统计学意义(*P<0.05，△P<0.01)。结论 IL-4，IFN-γ在支气管扩张症合并哮喘的发病中可能起一定作用，检测IL-4，IFN-γ对支气管扩张症合并哮喘的辅助诊断有重要参考价值。

IL-4 主要是通过TH2细胞介导释放，可以引起IgE水平增高，嗜酸性粒细胞及炎性介质释放增多，导致气道平滑肌增生。IFN-γ则是由Th1细胞介导分泌，在增强 Th1细胞应答同时抑制 IL-4 产生，可以减轻气道过敏性炎症，并且能够通过减少细菌的供铁量及诱导内源性NO的产生直接抑制细胞内的细菌，还能增加单核巨噬细胞溶解细菌作用，通过以上途径共同达到消灭细菌的作用。在呼吸系统疾病中，支气管扩张和支气管哮喘属于呼吸内科的常见病及多发病，其发病机制及诊治较为明确，但对于支气管扩张症合并哮喘的发病机制研究较少，且由于其诊断需结合高分辨胸部CT及支气管舒张试验，临床上存在较高漏诊率，因而本研究是通过对比支气管扩张合并哮喘与单纯支气管扩张、单纯哮喘患者血清中IL-4、IFN-γ的表达水平上的差异，从而提高对支气管扩张合并哮喘的认识。

资料与方法

一、研究资料

选取2014年10月至2015年10月于吉林大学第二医院呼吸内科明确诊断为支气管扩张合并支气管哮喘15例患者设为A组，单纯支气管扩张14例患者设为B组，单纯支气管哮喘12例患者设为C组，选取体检科7例健康体检者为D组。所有受试者均签署知情同意书。

纳入标准：支气管扩张诊断标准参照2012年成人支气管扩张症[1]诊治专家共识，支气管哮喘诊断标准符合2008年中国哮喘防治指南[2]。

排除标准：所选病例需排除变应性支气管肺曲霉菌病 (ABPA)，且行支气管舒张试验，检查前3天内未使用支气管舒张剂及抗炎药，无高血压、冠心病、心力衰竭等心血管病变。健康体检者需排除呼吸、心血管、消化、神经、内分泌、泌尿及免疫系统疾病，从未应用过免疫抑制剂及糖皮质激素。

二、试剂与器材

人白细胞介素-4(IL-4)酶联免疫分析试剂盒，人γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫分析试剂盒，低速台式离心机，多功能酶标仪，热恒温水温箱。

三、研究方法

1 标本收集及处理：支气管扩张合并哮喘组、支气管扩张组、哮喘组及正常对照组患者于晨起时采取空腹外周静脉血5mL，将静脉血置于我院呼吸内科实验室的低速台式离心机上，以3000r/min的速度离心10min，分离出血清后置于-80℃冰箱中保存。

2 血清IFN-γ及IL-4检测水平

采用上海丰寿公司的人IL-4、IFN-γ酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒，检测血清IL-4、IFN-γ水平，操作步骤按照说明书进行，每个样本做2个复孔检测。采用多功能酶标仪检测吸光度值。

3 统计分析

结 果

一、血清IL-4的表达水平

A组、B组、C组患者血清中IL-4的表达水平均高于D组，差异有统计学意义(P均<0.01)；C组患者血清中IL-4的表达水平高于A组，差异有统计学意义(P<0.05)；C组患者血清中IL-4的表达水平低于B组，差异有统计学意义，P<0.05，(见表1)。

二、血清IFN-γ的表达水平

A组、C组患者血清中IFN-γ的表达水平均高于D组，差异有统计学意义(△P<0.05,*P<0.01)；B组血清中IFN-γ的表达水平低于D组，差异有统计学意义(P<0.05)；C组患者血清中IFN-γ的表达水平低于A组，差异有统计学意义(P<0.05)；C组患者血清中IFN-γ的表达水平高于B组，差异有统计学意义，P<0.01，(见表1)。

表1 各组研究对象血清IL-4、IFN-γ表达水平比较(±s)

表1 各组研究对象血清IL-4、IFN-γ表达水平比较(±s)

分组nIL⁃4(ng/L)IFN⁃γ(ng/L)A组14279．02±44．24△∗295．65±77．10∗∗B组12367．60±45．10△∗153．76±26．69△△C组15317．02±53．53△241．68±50．33#D组7215．33±46．33192．14±25．99

注：1.IL-4：与D组比较，△P<0.01 与C组比较，*P<0.05; 2. IFN-γ: 与D组比较，*P<0.05,△P<0.01;与C组比较，*P<0.05，△P<0.01

讨 论

Van der Pouw 等[6]的研究表明哮喘患者中IL-4的表达水平明显升高，IFN-γ的表达水平明显降低，目前国内外研究认为IFN-γ /IL-4 失衡是哮喘发病的关键因素之一，且与哮喘的病情加重有关。早在20世纪之前国外学者已证实在支气管扩张患者中IFN-γ的表达水平明显升高[7-8]。但对于支气管扩张合并哮喘，此类疾病中IL-4及IFN-γ的表达水平如何目前并没有相关文献考证，因而本研究通过ELISA方法测定IL-4及IFN-γ在支气管扩张合并哮喘患者血清中的表达水平，为支气管扩张合并哮喘疾病的诊断提供新的辅助方法。

本研究中哮喘组患者血清中IL-4表达水平高于正常对照组，IFN-γ低于对照组，支气管扩张组IL-4表达水平低于对照组，IFN-γ高于对照组，差异均有统计学意义(P均<0.01)，此结论同Van der Pouw 等人的研究结论一致。支气管扩张合并哮喘组IL-4及IFN-γ的表达水平均高于对照组。本研究同时将支气管扩张合并哮喘组与支气管扩张组、哮喘组患者血清中IL-4及IFN-γ的表达水平进行对比，发现支气管扩张合并哮喘组患者血清中IL-4的表达水平高于支气管扩张组，低于哮喘组，IFN-γ表达水平低于支气管扩张组而高于哮喘组。

支气管扩张合并哮喘是一种特殊类型的疾病，往往被临床医生所忽略，目前其发病机制仍然不明，是有特殊外界坏境刺激还是发病过程中必然会出现的并发症，这个问题还需要更多的临床研究去探讨。本研究总结了支气管扩张合并哮喘患者在血清IL-4、 IFN-γ表达水平上的特点，目的在于进一步提高临床医师对支气管扩张合并哮喘这种疾病的认识和重视，同时由于其检测方法简便安全快捷，能够起到辅助诊断的作用，可以考虑在临床上推广应用。

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[6] Van der Pouw L, Kraan TC, Van der Zee JS, et al. Department of Autoimmune Diseases, Central laboratory of the Netherl and Redcross Blood Transfusion service. Amsterdam[J]. Clin Exp Immunol,1998,111(1):129-135．

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[8] Gaga M, Bentley AM, Humber M,et al. Increases in CD4+ T lymphocytes, macrophages, neutrophils and interleukin 8 positive cells in the airways of patients with bronchiectasis[J]. Thorax,1998,53(8):685-691.

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.03.053

1. 130000 吉林 长春，吉林大学第二医院呼吸内科 2. 257000 山东 东营，东营市人民医院

杨俊玲，E-mail：junling@jlu.edu.cn

2016-08-05]