人非小细胞肺癌肿瘤组织中叉头框蛋白Q1的表达水平

钟惠铃



人非小细胞肺癌肿瘤组织中叉头框蛋白Q1的表达水平

钟惠铃

目的 探讨叉头框蛋白Q1(FOXQ1)在人非小细胞肺癌肿瘤组织中的表达水平。方法 选取2011年1月至2012年1月我院病理科取得的非小细胞肺癌肿瘤组织，检测FOXQ1在肿瘤组织中的表达，分析影响FOXQ1表达因素，以及探讨FOXQ1表达的临床意义。结果 FOXQ1表达阳性率为90%，FOXQ1蛋白的表达与非小细胞肺癌患者的年龄、性别无关(P>0.05)，与癌细胞的分化程度、病理类型、有无淋巴转移以及肿瘤分期有密切关系(P<0.05)。结论 FOXQ1的表达水平与患者的预后状况呈负相关性。

FOXQ1；非小细胞肺癌；病理

肺癌的发病率呈逐年上升趋势，其病死率也非常高，其中非小细胞肺癌占到80%的比例，有研究表明，仅有16%的肺癌患者能有5年的生存率，其中大概有45%的非小细胞肺癌患者会在5年内死亡[1]。肿瘤的发生发展与转录因子的表达异常有着密不可分的联系，叉头框蛋白Q1(fork head box protein Q1,FOXQ1)[FOXQ1]作为叉头框蛋白家族的一员，参与了细胞的周期调控，在肿瘤的发生、侵袭及远处转移中起到了重要作用[2-3]，本文对80例非小细胞肺癌患者的肿瘤组织通过SP染色以及对患者进行随访等方式观察FOXQ1在患者组织中的表达水平，探讨分析FOXQ1与非小细胞肺癌患者临床特征及预后之间的影响关系。

资料与方法

一、一般资料

选取我院2011年1月-2012年1月在我院收治的明确诊断为非小细胞肺癌患者80例，其中男性52例、女性28例，年龄32-71岁，平均年龄(52.7±11.3)岁，其中60岁以上的患者49例，小于60岁的患者31例；分化程度：中高分化54例、低分化26例；病理类型：鳞癌20例、腺癌42例、其他类型18例；淋巴转移情况：已发生淋巴转移62例、无淋巴转移18例；肿瘤分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期31例、Ⅲ期25例、Ⅳ期4例。所有患者除淋巴转移外，均无广泛转移，为达到临床治愈效果，所有患者均接受手术治疗，均在我院手术治疗取得所有患者肿瘤组织，其中，对所有手术标本均用10%甲醛固定。以上患者均通过门诊复查及电话随访，随访截止时间为2015年12月，所有患者的临床病历资料均保存完好。

二、试验方法

1 SP染色方法及结果判定： 对所取得的肿瘤组织采用免疫组织化学SP染色法，常规拷片脱蜡包埋，乙醇脱水。用浓度为3%H2O2、温度为37℃温育10min以灭活阻断内源性过氧化物酶，通过PBS冲洗后修复抗原；37℃山羊血清温育10min，加入浓度为1:500的FOXQ1抗体50uL，放入恒温4℃的冰箱过夜，PBS冲洗3遍，每次冲洗5min。加入生物素标记二抗，37℃温育30min再PBS冲洗3遍，每次5min。加入链霉素卵白素工作液，37℃温育30min再PBS冲洗3遍，每次5min；DAB显色。生理盐水冲洗彻底，复染、脱水待干燥后封片，用PBS替代一抗做阴性对照。细胞质内或者细胞核出现棕褐色或棕黄色的颗粒提示FOXQ1蛋白呈阳性表达，根据染色强度分为4级：无着色0分、轻度染色(黄色)得1分、中度染色(棕黄色)得2分、重度染色(棕褐色)得3分；根据阳性细胞占总细胞数值的百分比可分为5级：低于10%为0分、大于10%而低于25%为1分、大于25%低于50%为2分、大于50%低于75%为3分、大于75%为4分；最后将染色强度得分乘以阳性细胞百分比：低于3分为表达阴性、高于3分为表达阳性。

三、统计学方法

结 果

一、FOXQ1表达阳性情况

80例肿瘤组织标本中，FOXQ1表达阳性大部分出现在细胞质，细胞核内也有部分表达阳性，大于3分即FOXQ1表达阳性72例，低于3分即FOXQ1表达阴性8例，表达阳性率90%。FOXQ1蛋白的表达与非小细胞肺癌患者的年龄、性别无关(P>0.05)，与癌细胞的分化程度、病理类型、有无淋巴转移以及肿瘤分期有密切关系，P<0.05，(见表1)。

表1 FOXQ1蛋白在非小细胞肺癌肿瘤组织中的表达情况

二、 FOXQ1的表达与非小细胞肺癌患者预后的关系

80例患者的平均生存时间为18个月，其中FOXQ1表达阳性的患者平均生存时间为13个月，FOXQ1表达阴性的患者平均生存时间为21.5个月(P<0.05)。

讨 论

研究表明，在世界范围内肺癌的发病率及病死率已居所有恶性肿瘤的首位，非小细胞肺癌属于肺癌的一种，其患者细胞呈无序性增值状态，机体内某些重要细胞因子在调节细胞周期进程、分化增殖以及凋亡衰老等方面出现表达紊乱[4]。叉头框蛋白是一类有翼状螺旋结构的转录因子蛋白质，参与机体多种生理生化过程，涉及到细胞周期调控、免疫调节等，目前已被证实的叉头框蛋白家族成员多达100多个，包括FOXA-S共19个亚家族，他们对维持细胞生命活动起到关键性的调控作用[5-6]。研究表明，在胚胎发育的每一步都有FOX基因的特征性表达，因此细胞的代谢与分化都有FOX蛋白家族的参与[7]，他们可以调控细胞周期、衰老和死亡，对肿瘤细胞的无序增殖有抑制作用，通过与靶细胞启动子区域的GC盒等元件相结合控制基因转录，从而发挥生物功效，他们的异常及突变与肿瘤的发生发展以及肿瘤细胞的转移密切相关。

FOXQ1属于FOXQ亚家族，是Fox机组基因中新发现的逆转录因子，它位于6号染色体短臂的25.3区，含403个氨基酸，全长2319bq，仅一个外显子[8]，能够从正方向调控基因调控，对肿瘤组织的血管以及组织生长发挥重要作用。在非小细胞肺癌发生过程中，FOXQ1发挥着重要作用，主要机制是FOXQ1能够调控E-cadherin(E-人钙黏附蛋白)，E-cadherin是一种钙依赖型粘糖蛋白和上皮标志物，介导组织细胞黏附反应，对肿瘤发生进展具有抑制作用，FOXQ1与E-cadherin蛋白的核心启动区域结合，介导抑制E-cadherin的表达，E-cadherin表达降低后导致β-catenin在肿瘤组织细胞的细胞质内聚集，导致WNT信号通路阻碍，组织细胞黏附力下降，组织细胞容易发生游离而向组织外浸润生长，当获得转移的条件时，则会脱离原发灶而发生浸润与转移，导致肺上皮细胞发生EMT(上调能促进-间质转化，epithelial-mesenchymal transition)化[9-10]，即肿瘤的发生、发展与转移。本文研究结果显示，在80例非小细胞肺癌患者中，处于中高度分化和癌症中晚期与病理类型差且已发生淋巴转移的患者，其肿瘤组织中的FOXQ1蛋白表达水平升高，表明FOXQ1蛋白表达水平与肿瘤的发展过程、肿瘤细胞的分化程度及淋巴转移进程呈正相关性。在随访过程中，FOXQ1表达阳性的患者生存时间明显少于FOXQ1表达阴性的患者，说明FOXQ1的表达与患者的预后有着密切联系。

综上所述，FOXQ1的阳性表达与非小细胞肺癌患者的不良预后有明显的相关性，但其具体机制还有待深入研究，本文结果为探索FOXQ1与非小细胞肺癌的发生发展起到了重要作用，下一步我们将深入探讨非小细胞肺癌的生物学机制以及能否下调FOXQ1基因的表达，为治疗非小细胞肺癌提供新的思路及更多可能。

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Expression level of fork head box protein Q1 in human non small cell lung cancer tumor tissue

ZHONGHui-ling

theCentralHospitalofPanyuDistrict,Guangzhou,Guangzhou511400,China

Objective To discuss the expression level of fork head box protein Q1 (FOXQ1) in human non small cell lung cancer tumor tissue. Methods The non small cell lung cancer tumor tissue were collected from January 2011 to January 2012 in our hospital, and the expression of Q1 in tumor tissues was detected. The expression factor of influencing fork head box protein Q1 was analyzed, and the clinical significance of the expression of fork head box protein Q1 was discussed. Results The positive rate of Q1 expression was 90%, and the expression of FOXQ1 protein had no relation with their age and sex (P>0.05), but it was closely related with the degree of differentiation, pathological type, lymph node metastasis and tumor stage (P<0.05). Conclusion The expression level of Q1 is negatively correlated with the prognosis of patients.

FOXQ1; non small cell lung cancer; pathology

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.03.039

511400 广东 广州，广州市番禺区中心医院

2016-05-06]