基于MspA蛋白质纳米孔传感器的主客体化学研究

段静+卓莎+姚付军+张亚妮+亢晓峰

摘 要 以大肠杆菌原核系统表达的方法制备了MspA蛋白质纳米孔， 并利用表面活性剂高温提取获得高活性MspA蛋白纳米孔。实验结果表明， 0.5%的提取剂90℃提取30 min为最佳提取条件。利用制备的MspA纳米孔在单分子水平上研究了其与多种环糊精的相互作用， 结果表明， 在众多环糊精分子中， 全6氨基β环糊精（am7βCD）与MspA蛋白纳米孔相互作用较强且阻塞平台较一致， 其滞留时间随电压增大而逐渐减小， 但阻塞电流受电压影响不大。筛选使用am7βCD作为适配体非共价键装配MspA纳米孔， 在单分子水平上研究主客体化学反应。加入am7βCD后， 当盐酸金刚烷胺小分子浓度为50 nmol/L时，即出现二级阻塞平台， 其滞留时间随电压增大而逐渐减小。这种新型蛋白质纳米孔单分子传感器可用于有机小分子的检测识别， 极大拓宽了MspA纳米孔分析技术的的应用范围。endprint