微柱凝胶技术检测血型不规则抗体的临床应用

关兴丽

微柱凝胶技术检测血型不规则抗体的临床应用

关兴丽

目的探讨分析血型不规则抗体使用微柱凝胶技术检测筛查情况和使用情况。方法选取我院2013年1月—2016年12月对29 208例接受不规则抗体检测的患者作为研究对象，对患者的检测阳性结果进行统计和分析，鉴定阳性抗体特异性。结果全部患者中，90例检测出了不规则抗体阳性，阳性率为0.31%。特异性抗体主要为Rh血型系统，2例（2.22%）属于抗-D抗体、19例（21.11%）属于抗-E抗体、10例（11.11%）属于抗-Ec抗体；有11例MNSs系统抗-Mur抗体，占12.22%、有7例抗-M抗体，占7.78%；Lewis系统抗-Lea抗体占8.89%；冷抗体占7.78%。非特异性抗体占13.33%。结论血型不规则抗体筛查鉴定特异性能够确保输血的安全性，防止溶血性输血事件发生。

微柱凝胶技术；不规则抗体筛查；安全输血；输血反应

不规则抗体是不符合ABO血型系统和Landstemer法则的血型抗体，主要是IgG抗体，会导致免疫性输血反应。临床中输血前为患者进行不规则抗体筛查能够降低血型不合输血反应，安全使用血液。此次我院就不规则抗体筛查以及鉴定情况进行了分析，开展以下报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年1月—2016年12月我院对29 208例接受不规则抗体筛查的患者作为研究对象。其中，男性患者11 932例，女性患者17 276例，患者年龄1 d～98岁，平均年龄为（42.5±2.3）岁。

1.2 主要试剂与仪器

微柱凝胶Coomns检测卡、专用标本离心机和孵育器（西班牙Daina公司）；筛选细胞、谱细胞（上海血液生物）；KA-2200型血型血清学多用离心机（日本久保田）。筛选细胞包括以下红细胞血型系统的常见抗原：Rh、MNSs、P、Lewis、Kell、Duffy、Kidd等。检测试剂均在有效期内并严格按照试剂及仪器说明书操作使用。

1.3 方法

1.3.1 标本要求及处理 输血前采集患者静脉血2 ml，用EDTA抗凝在室温下以1 900 r/min离心10 min，分离血浆。

1.3.2 微柱凝胶技术 分别向微柱孔内加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号0.8%～1.0%的抗体筛查细胞各50 μl，并向微柱孔内加入25 μl血浆，将微柱凝胶Coomns检测卡放入专用孵育器内孵育15 min后，置专用离心机内离心9 min。

1.3.3 结果判定 红细胞与相应抗体发生凝集，不能通过凝胶的缝隙，被挡在微柱上端者，试验结果为阳性；红细胞未与相应的抗体发生凝集，红细胞通过凝胶的缝隙到达微柱底部，试验结果为阴性。

1.3.4 抗体鉴定 用1～10号谱细胞对阳性结果进行抗体特异性鉴定。

2 结果

全部患者中，90例检测出了不规则抗体阳性，阳性率为0.31%。特异性抗体主要为Rh血型系统，2例（2.22%）属于抗-D抗体、19例（21.11%）属于抗-E抗体、10例（11.11%）属于抗-Ec抗体；有11例MNSs系统抗-Mur抗体，占12.22%、有7例抗-M抗体，占7.78%；Lewis系统抗-Lea抗体占8.89%；冷抗体占7.78%。非特异性抗体占13.33%。

3 讨论

输血检测技术发展越来越成熟，由于血型不合导致的溶血反应比较常见，血型不规则抗体导致的溶血性输血反应是主要原因。目前，血型不规则抗体筛查使用越来越多，对于孕妇、免疫性疾病、肿瘤患者等应该作为重点筛查对象，因为他们是血型不规则抗体高危携带者，需要保证其用血的安全性。不规则抗体产生的数量和抗原、B细胞、T细胞等因素关联紧密。抗体受到刺激，B细胞会增殖分化为成熟记忆细胞。记忆细胞抗原在细胞膜上表达抗体，再次受到同一刺激源，会快速引起免疫反应[1]。

对不规则抗体进行筛查是为了临床安全用血。使用高灵敏度、特异性的抗体检测方式，能够确保输血的安全性对红细胞血型不规则抗体进行检测的方式比较多，以往使用间接抗人球蛋白实验筛查抗体，视为了解决部分抗体的剂量效应[2]，却非常的耗时、耗力，因此不适合广泛应用，目前微柱凝胶技术的出现解决了上述问题，该技术是以传统抗人球蛋白试验为基础，解决了传统试管液体介质的一些缺点，利用了微柱凝胶的微孔过滤以及免疫化学抗原抗体特异性反应[3]，其标准化程度高、重复性强、结果准确，可以长时间保存[4-8]。

此次研究中，全部患者中，90例检测出了不规则抗体阳性，阳性率为0.31%。特异性抗体主要为Rh血型系统，2例（2.22%）属于抗-D抗体、19例（21.11%）属于抗-E抗体、10例（11.11%）属于抗-Ec抗体；有11例MNSs系统抗-Mur抗体，占12.22%、有7例抗-M抗体，占7.78%；Lewis系统抗-Lea抗体占8.89%；冷抗体占7.78%。非特异性抗体占13.33%。自身抗体阳性主要是自身免疫性溶血性贫血以及特发性血小板减少性紫癜疾病，试验中出现的凝集问题导致了交叉配血难度大，如果患者存在较强自身抗体，可能会导致严重溶血性输血反应。建议临床不要进行输血治疗，先对疾病进行治疗，等患者的抗体降低或消失后再进行输血。

全部患者共出现了90例抗体阳性病例，使用Diagnostic Coomns检测卡鉴定以及交叉配血，输血时以及输血后没有出现不良反应病例，实现了安全输血的目的。

综上所述，输血前筛查患者的不规则抗体情况，对于有不规则抗体的患者，尤其是女性患者，应该及时采取措施，预防输血事故方式。抗体筛查能够保证临床安全输血，防止输血反应，因此应该引起重视。

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Analysis of Clinical Application of Microcolumn Gel Technique to Detect Irregular Antibodies in Blood Group

GUAN Xingli Blood Transfusion Department, Daqing Central Blood Station, Daqing Heilongjiang 163311, China

ObjectiveTo investigate the use of microcolumn gel technique to detect the screening and use of irregular antibodies in blood group.MethodsFrom January 2013 to December 2016, 29 208 patients with irregular antibodies were studied and analyzed. The positive results of the patients were counted and analyzed, and the speci fi city of the positive antibodies was identi fi ed.ResultsIn all the patients, 90 cases of irregular antibodies were detected, the positive rate was 0.31%. The specific antibodies were mainly Rh blood group system, 2 cases (2.22%) belonged to the anti-D antibody, 19 cases (21.11%) belonged to the anti-E antibody,and 10 cases (11.11%) belonged to the anti-Ec antibody. There were 11 cases of anti-Mur antibody in MNSs system, accounting for 12.22%. There were 7 cases of anti-M antibody, accounting for 7.78%. Lewis system accounted for 8.89% of anti -Lea antibodies. Cold antibody accounted for 7.78%. Nonspecific antibodies accounted for 13.33%.ConclusionThe screening and identi fi cation of irregular blood type antibodies can ensure the safety of blood transfusion and prevent hemolytic transfusion events.

microcolumn gel technique; irregular antibody screening; safe transfusion; transfusion reaction

R446

A

1674-9308（2017）15-0068-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.15.034

大庆市中心血站输血科，黑龙江 大庆 163311