乙型肝炎病毒的ELISA与PCR检测对比分析

王婷

乙型肝炎病毒的ELISA与PCR检测对比分析

王婷

目的分析乙型肝炎病毒的ELISA与PCR检测结果的相关性。方法选取2015年1—12月本院接诊的92例具有乙型肝炎临床表现怀疑为乙型肝炎的患者作为研究对象，将其血清分别采取ELISA与PCR两种方法检测，将两种检测结果进行相关性分析。结果HBV-M模式2、模式6以及模式9检测结果与HBV-DNA的检测结果对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）；两种检测结果经Spearman相关性分析具有正相关性（r=0.726，0＜r＜1，P＜0.05）。结论PCR检测乙型肝炎侧重于病毒传染性，而ELISA法检测检出率更可明确具体类型，因此临床诊断中应将两种方法联合应用。

乙型肝炎；ELISA；PCR

乙型肝炎简称乙肝，属于我国最为常见的一种传染性肝部疾病，严重的危害着患者的身体健康，同时因其具有较高的传染性给患者与家人均造成极大的精神负担[1-3]。临床上对于乙肝的诊断标准主要通过检测乙型肝炎病毒（HBV）的血清标志物HBV-M的含量，HBV-M是反映机体对于HBV的免疫状态。酶联免疫吸附法（ELISA）是检测HBV-M的主要方法，而HBV-M检测结果能够反映出HBV感染后人体免疫的相关信息。荧光定量（FQ-PCR）是检测HBV-DNA的主要方法，而HBV-DNA是反映HBV传染活性的主要指标。本文将两种检测方法的检测结果进行相关性对比分析，以期为乙型肝炎诊断提供更加准确的诊断依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2015年1—12月本院接诊的92例具有乙型肝炎临床表现怀疑为乙型肝炎的患者作为研究对象，将其血清分别采取ELISA与PCR两种方法检测。受检者中男61例，女31例；年龄为18～76岁，平均年龄为（58.71±12.69）岁。

1.2 方法

全部患者均采集清晨空腹静脉血样5 ml，分别以ELISA法检测血样中的HBV-M，以FQ-PCR检测血样中的HBV-DNA。ELISA法试剂购自科华生物公司，使用伯乐Model 680型酶标检测仪检测。FQ-PCR法试剂盒购自科华生物公司，HBV-DNA≥103 copies/ml为阳性评估标准，使用应用生物公司出品的AB-I7500型荧光定量分析仪。

1.3 统计学方法

两组数据按照SPSS格式录入至SPSS Statistics-20.0软件当中，选择菜单数据——加权个案，按秩次加权；选择菜单分析——描述统计——交叉表——统计量选项中选择χ2，由软件完成数据运算；软件计算结果观察P值，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

HBV-M模式2、模式6以及模式9检测结果与HBV-DNA的检测结果对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）；两种检测结果经Spearman相关性分析具有正相关性（r=0.726，0＜r＜1，P＜0.05）。详细数据如下表1。

3 讨论

乙肝病毒感染的诊断主要是检测血清中的特异性抗体、抗原以及HBV-DNA的载量进行判断。目前临床上通常采用的乙肝病毒5项标志物的检测方法为ELISA法[4]。ELISA法具有检测速度快、灵敏度高、稳定性好以及成本经济等明显优势；但无法及时、动态的表现出HBV在机体中的复制转录以及传染活性。荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量，能够直接准确的反应出HBV的转录复制情况以及传染活性，对于治疗方案的确定、疗效评估以及预后评估等领域均具有无可或缺的价值。但HBV-DNA载量无法明确处于非复制状态下的HBV感染情况，尤其是在HBV携带者的甄别诊断中无法获得正确诊断数据。因此，临床诊断中应将两种检测方法联合应用。

本次研究结果表明，HBV-M模式1检测结果与HBV-DNA检测结果对比，差异无统计学意义（P＞0.05），说明HBV-M模式1时HBV-DNA的载量处于较高状态，HBV的活性处于复制活性较高水平，具有高度的传染性。这一点与文献报道相符[5]。HBV-M模式2检测结果与HBV-DNA的检测结果对比，差异具有统计学意义（P＜0.05），HBV-DNA的阳性率偏低提示HBV-DNA载量较低，分析其原因主要与HBeAg的转阴形成HBeAb密切相关，此时患者体内的HBV明显降低，但仍具有一定的传染活性[6-7]。因此本研究认为，HBeAb并不能完全表明机体内不存在着HBV的病毒复制转录，仅依靠HBV-M的检测无法作出准确判断，应结合HBV-DNA载量测定作出正确判断。在模式3的检测结果中HBVDNA的检测与HBV-M并无差异，提示患者体内存着一定强度的HBV复制转录活性。模式2、模式3之间相比，HBeAb的转阴有可能与HBV出现前C区域基因的突变或者机体形成特异性的免疫耐受相关[8]。HBsAb能够中和HBV的能力因此被公认为保护型抗体，然而模式4中依然可见少数HBV-DNA阳性检出，提示HBsAb的阳性并不足以说明HBV不具有传染活性，因此仍应结合HBV-DNA的检测结果对患者体内的HBV状态作出全面准确的评估。在模式5中，HBeAb与HBcAb为阳性，少数患者的HBVDNA仍呈阳性结果，说明应对这部分患者进行持续监测，以及时发现HBsAb阳性，预防漏诊的发生。在模式6至模式9中均未见HBV-DNA阳性的检出。

综上所述，HBV-M与HBV-DNA检测结果间具有正相关性，两者检测的侧重点不同。荧光定量PCR检测HBV-DNA对于准确判断乙肝病毒的转录复制活性与状态具有较高灵敏性，但无法表达出HBV非复制期的患者感染状态。检测对血清标志物以ELISA法检测可有效分析HBV的感染状态、病情进展，并可对HBV-DNA阴性的患者病情作出正确评估。应结合两种检测的结果方可对患者乙型肝炎病毒的真实感染状态与传染活性作出正确判断以及早期明确诊断；同时两种检测方法的联合应用还能够对临床治疗方案的选择、疗效的评估以及预后分析等作出准确指导。

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Comparative Analysis of ELISA and PCR Detection of Hepatitis B Virus

WANG Ting
Department of Medical Technology, Nanyang Medical College, Nanyang He’nan 473000, China

hepatitis B; ELISA; PCR

]ObjectiveTo analyzed the relationship between ELISA and the results of PCR detection of hepatitis B virus.MethodsFrom January to December 2015 in our hospital, 92 cases of patients with clinical of hepatitis B, suspected hepatitis B patients serum were taken ELISA and PCR two kinds of detection methods, two results were analyzed.ResultsHBV-M mode 2, mode 6 and mode 9 results were compared with HBV-DNA test results, the di ff erence was statistically signi fi cant (P ＜ 0.05); The correlation between two kinds of test results by Spearman correlation analysis (r=0.726, 0 ＜ r ＜ 1, P ＜0.05).ConclusionPCR detection of hepatitis B virus infection, so the clinical diagnosis should be combined with two methods.

南阳医学高等专科学校医学技术系，河南 南阳 473000

R446.61

A

1674-9308（2017）06-0041-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.06.020

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