三种实验室指标在膜性肾病中的诊断价值

詹富国吴秀风陈惠娟陈静

三种实验室指标在膜性肾病中的诊断价值

詹富国1吴秀风2陈惠娟1陈静1

目的 评估血清抗磷脂酶A2受体（phospholipase A2 receptor，PLA2R）抗体与肾小球PLA2R和肾小球IgG4沉积联合检测在特发性膜性肾病（IMN）中的诊断价值。方法 应用间接免疫荧光法检测230例肾小球疾病患者血清抗PLA2R抗体。其中127例肾小球疾病患者同时应用免疫组化法检测肾小球PLA2R和IgG4亚型沉积情况，受试者工作曲线（ROC）分析三种检测指标在IMN中的诊断价值，比较三种检测指标的一致性。结果 血清抗PLA2R抗体与肾小球PLA2R或肾小球IgG4表达一致性一般（Kappa值分别为0.748和0.703，P＜0.01）。结论 血清抗PLA2R抗体在IMN诊断中的有很高的敏感性和特异性。血清抗PLA2R抗体与肾小球PLA2R或肾小球IgG4联合检测可提高检测灵敏度。

膜性肾病；抗磷脂酶A2受体抗体；磷脂酶A2受体；IgG4

[Keywords]membranous nephropathy; anti-phospholipase A2 receptor antibody; phospholipase A2 receptor; IgG4

膜性肾病（MN）是以肾小球基底膜上皮细胞下弥漫性免疫复合物沉积伴有基底膜增厚为特征的一组疾病。膜性肾病在肾活检及肾小球疾病中仅次于IgA 肾病，且其发病率在近11年内正以每年13%的速度增长[1]。特发性膜性肾病（IMN）是成人肾病综合征的常见病理类型之一，其临床结局变化不定，1/3的患者可自发缓解，但是有40%～50%的IMN患者在5～10年内发展至终末期肾脏病。

Beck等[2]2009年首次报道PLA2R是IMN的主要靶抗原，血清自身抗体阳性患者肾小球沉积主要是免疫球蛋白IgG4亚型。目前国内外学者已经对血清抗PLA2R抗体、肾小球PLA2R表达和肾小球IgG4沉积对IMN的诊疗价值作了大量研究[3-5]。然而，由于研究的人种、检测原理、对象数量等因素的差异，三种指标对IMN的诊断价值还存在争议[6-7]，且联合检测对临床的价值研究甚少。本研究通过检测福建IMN人群中血清PLA2R抗体，肾小球PLA2R和IgG4沉积水平，探讨联合检测在IMN中的诊断价值。

1 对象与方法

1.1 对象

收集2014年6月—2017年6月福建医科大学附属第一医院肾内科住院与门诊患者共230例，接受肾活检的患者经肾脏病理结合临床资料确诊为IMN患者117例，完善PLA2R检查非IMN患者113例。患者年龄为15～82岁，平均年龄（48.9±15.0）岁，其中男性143例（62.2%），女性87例（37.8%）。

1.2 方法

分离新鲜血清，当日检测或者4℃保存7 d内完成检测。采用间接免疫荧光（IIF）法检测230例患者血清抗PLA2R抗体，检测用德国欧蒙公司试剂盒。其中127例患者同时应用免疫组化法检测肾小球PLA2R和IgG4亚型沉积情况，检测抗体为小鼠抗人PLA2R单抗（abcam公司，CL0474） 和兔抗人IgG4单抗（abcam公司，EP4420）。所用试剂均在有效期内，试验严格按照说明书操作。荧光显微镜观察结果，根据荧光强度不同报（-）、（1+）～（4+）。

1.3 统计学分析

采用SPSS 19.0软件进行统计学分析，两两之间的比较采用χ2检验，计算一致性检验Kappa系数，Kappa＜0.4时一致性较差，0.4≤Kappa＜0.7时一致性一般，Kappa≥0.75时一致性较好，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 ROC曲线分析

以肾穿刺活检作为确诊IMN的标准，对230例入组患者做ROC曲线分析，曲线下面积AUC血清抗PLA2R抗体（0.918）＞AUC肾IgG4（0.917）＞AUC肾PLA2R（0.906），三种指标对IMN诊断价值均很高。

2.2 检验结果一致性的定性对比

同时用上述三种方法检测127份血清标本。根据各检测系统的阳性判断指标对样本的检测结果作定性判断。肾小球PLA2R和肾小球IgG4表达一致性良好（Kappa=0.929，P＜0.05），血清抗PLA2R抗体与肾小球PLA2R或肾小球IgG4表达一致性一般（Kappa分别为0.748和0.703，P＜0.05）。

2.3 联合检测阳性率比较

血清抗PLA2R抗体诊断IMN组的敏感性为84.6%（99/117），特异性90.3%（102/113）。与肾小球PLA2R联合检测时阳性率达95.9%（47/49），与肾小球IgG4联合检测是阳性率为98.0%（48/49），差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

根据ROC曲线分析，血清抗PLA2R抗体、肾小球PLA2R、肾组织IgG4沉积对IMN诊断价值均很高（曲线下面积AUC＞0.9，P＜0.05）。由于肾组织活检有诸多弊端：有创检查不易为患者接受，不适合早期诊断，禁忌证多等，因此血清抗PLA2R抗体在可疑膜性肾病患者中可作为首选检查。

Dai等[7]认为由于IMN患者血清快速清除了自身抗体、已沉积在肾小球或因为延时采样导致PLA2R发生了不可逆转的超微结构的变化，活体检查比血清学检查更为敏感。因此本研究对127份血清标本同时检测了肾小球PLA2R和IgG4沉积水平，根据各检测系统的阳性判断指标对样本的检测结果作定性判断，肾小球PLA2R表达和肾小球IgG4沉积阳性率一致性良好（Kappa=0.929，P=0.000），说明肾活检肾小球PLA2R和肾小球IgG4检测结果基本一致，二者联合检测意义不大。血清抗PLA2R抗体与肾小球PLA2R或肾小球IgG4表达一致性一般（0.4≤Kappa＜0.75，P＜0.01）。IMN患者血清抗PLA2R抗体与肾小球PLA2R或IgG4联合检测敏感性达 95.9%和98.0%，高于单独检测的84.6%。有报道[8]指出血清抗PLA2R抗体与肾小球IgG4联合检测时，敏感性和特异度分别为98.3%和100%，与本研究结果相符。

综上所述，血清抗PLA2R抗体在IMN诊断中有良好的效能，可作为膜性肾病首选诊断指标。血清抗PLA2R抗体与肾小球PLA2R或肾小球IgG4表达联合检测可以提高IMN检测灵敏度，各实验室可根据患者情况选择合适的检测方法。

[1] Xu X，Wang G，Chen N，et al. Long-Term Exposure to Air Pollution and Increased Risk of Membranous Nephropathy in China[J]. J Am Soc Nephrol，2016，27（12）：3739-3746.

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[4] Qin W，Beck LH Jr，Zeng C，et al. Anti-phospholipase A2 receptor antibody in membranous nephropathy[J]. J Am Soc Nephrol，2011，22（6）：1137-1143.

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Diagnostic Value of Three Kinds of Laboratory Indexes in Membranous Nephropathy

ZHAN Fuguo1WU Xiufeng2CHEN Huijuan1CHEN Jing11 Department of Clinical Laboratory, The First Affiliated Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou Fujian 350005, China; 2 Department of Clinical Laboratory, The Third Affiliated Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou Fujian 350005, China

Objective To evaluate the diagnostic value of serum antiphospholipase A2 receptor(PLA2R) antibodies and glomerular PLA2R and glomerular IgG4 deposits in the patients with idiopathic membranous nephropathy (IMN). Methods Serum anti-PLA2R antibodies were detected by indirect immunofluorescence method in 230 patients with glomerular diseases. Meanwhile glomerular PLA2R and glomerular IgG4 deposits were analyzed in 127 cases of them. Receiver operating characteristic (ROC) curves were drawn to analyze the diagnostic value of the three indices in the IMN and to compare the consistency among them. Results There were some differences of the consistency of Serum anti-PLA2R antibodies and glomerular PLA2R or glomerular IgG4 deposits (Kappa values were 0.748, 0.703, P ＜ 0.01). Conclusion Serum anti-PLA2R antibodies is of high sensitivity and specif i city in IMN. And serum anti-PLA2R antibodies combined with glomerular PLA2R or glomerular IgG4 could improve the sensitivity of IMN.

R692

A

1674-9316（2017）19-0124-03

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.19.065

1福建医科大学附属第一医院检验科，福建 福州 350005；2 福建医科大学附属第三医院检验科，福建 福州 350005

陈静