郭 强 杨 波 法燕梅 王桂娟
(青岛市黄岛区畜牧兽医局,山东青岛 266000)
小反刍兽疫及其防控
郭 强 杨 波 法燕梅 王桂娟
(青岛市黄岛区畜牧兽医局,山东青岛 266000)
小反刍兽疫(PPR)是小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的小反刍兽的一种急性、热性和高度传染性的烈性传染病,主要感染山羊和绵羊。牛呈隐性感染,牛感染后不会传染其他动物。本病的特点是患病动物突然出现精神沉郁、发热、眼鼻分泌物增多、唇和舌出现损伤进而出现呼吸不畅、咳嗽、恶臭性腹泻以及出现坏死性口炎、肺炎、肠炎,一般预后不良,多为死亡。该病无特效治疗方法,防控主要以疫苗免疫为主。该病曾因其临床症状与牛瘟类似而又被称为是伪牛瘟。
小反刍兽疫病毒(PPRV)属于副黏病毒科麻疹病毒属。PPRV是一种有囊膜的多形性RNA病毒,多为球形或椭圆形,病毒粒子直径在150~700nm之间,其基因组是由15948个核苷酸组装成的负链RNA分子,全长为15948 nt,囊膜上的纤突由融合蛋白(F)和血凝素蛋白(H)构成。病毒囊膜里面是核壳体,由核蛋白(N)、磷蛋白(P)、大蛋白(L)、基质蛋白(M)组成。PPRV对中性PH环境比较稳定,对酸、碱、乙醚、酒精和一些去污剂敏感。病毒对温度也较敏感,50℃、30 min即可丧失感染力。在紫外线作用及阳光的照射下也能很快失活。
目前发现,PPRV只有1个血清型,根据N、F、H 基因组序列差异可将其分4个系。其中,3个系源于非洲,1个系源于亚洲。PPR对动物的感染具有品种倾向性,山羊比绵羊易感,死亡率方面,在山羊上报道为71.6%,而在绵羊上为55.4%。牛呈隐形感染,感染后也不会传染其他动物。一些野生动物也能够感染本病,如小鹿瞪羚、努比亚羱羊、拉利斯顿地毯羊和好望角大羚羊。水牛、猪、亚洲狮也可感染PPRV,但不表现出临床症状。目前,尚没有人感染PPRV的报道。
根据PPR典型的临床症状如山羊和绵羊突然出现高热、眼鼻分泌物、腹泻、肺炎等,可初步做出假设性诊断。PPRV不同毒株的致病性各异,有时会出现亚临床症状或者较轻的临床症状,虽然只有一个血清型,在临床上却易与山羊和绵羊的一些常见疾病相混淆。如果PPR为温和性感染时,临床症状不明显,难于做出鉴别诊断,这时需要通过实验室诊断技术确诊。
3.2.1 病原学诊断
PPRV抗原检测方法主要有捕获酶联免疫吸附试验(icELISA)、琼脂凝胶免疫扩散(AGID)、对流免疫电泳(CIEP)、间接荧光抗体试验(IFAT)和病毒分离鉴定。
3.2.2 分子生物学诊断
目前对PPRV核酸进行检测的方法主要采用特异性的cDNA探针和反转录PCR(RT-PCR)两种方法。此外,还有近年发展的实时荧光定量PCR和环介导等温扩增(LAMP)。
3.2.3 血清学诊断
常用的抗体检测方法是酶联免疫吸附法(ELISA),此外,还包括血细胞凝集试验和乳胶凝集试验和病毒中和试验(VNT)。
目前,该病尚无有效的治疗方法,发病初使用磺胺类药物和抗生素可对症治疗和预防继发性感染。用超免疫血清进行被动免疫可减少疫病的传播,但是对已发病的病畜无作用。现阶段防治PPRV主要是依赖于疫苗的免疫接种。
4.1.1 异源疫苗
由于PPRV和RPV能够产生交叉保护,因此,RP疫苗作为一个异种疫苗首先被用来预防PPR,具有良好的免疫保护效果。自从OIE提出“全球消灭牛瘟”计划后,该疫苗已停止使用。
4.1.2 同源疫苗
当PPRV异源疫苗被禁止使用后,PPRV同源疫苗是目前唯一允许用于预防PPR的疫苗。如:PPRV Nigeria 75/1 疫苗、PPRV Sungri/96 疫苗、PPRV Arasur/87 疫苗、耐热性PPR疫苗。
4.1.3 多联弱毒疫苗
随着现代疫苗技术的发展,人们开始研制能够同时预防2 种及以上疾病的多联疫苗。和PPR一样,山羊痘(GP)也是OIE规定的必须报告的动物传染病,二者的同时感染加重了疫区养羊业的经济损失。因此开发PPR和GP 的二联疫苗预防这两种疾病的感染,就显得非常必要。目前,由印度兽医研究所利用山羊痘和小反刍兽疫印度分离株研制了适用于Vero细胞培养的山羊痘-小反刍兽疫联苗,田间试验结果表明该疫苗是安全有效的。
尽管PPR弱毒疫苗效果很好,但却不能从血清学上区别疫苗株和野毒株感染,给接种过PPR 疫苗的疫区的血清学调查带来困难。为了便于血清学监测,人们尝试对基因进行分子标记,试图研制更安全有效,并能从血清学上区别免疫或感染的PPRV 基因工程疫苗。
4.2.1 基因重组疫苗
JonesL 等用基因重组技术,同时表达了RPV 的F基因和H基因并制备了重组疫苗免疫山羊,虽然只检测到RPV的抗体而不能检测到PPRV的抗体,但用PPRV攻击,免疫动物全部获得保护。
4.2.2 嵌合病毒疫苗
以牛瘟病毒作为载体骨架,将RP病毒的F和H基因替换成PPRV的F和H 基因,随后获得表达PPRV F和H蛋白的RP嵌合病毒。可以根据RPV和PPRV 的H和N蛋白的单克隆抗体来区分免疫接种和自然感染的动物。
4.2.3 活载体疫苗
Berhe等将PPRV的F基因插入羊痘病毒的TK基因编码区,构建了重组羊痘病毒疫苗recCapPPR/F。用该重组疫苗免疫动物后PPRV攻击感染,结果发现重组病毒的使用量为0.1PFU免疫即可抵抗PPRV强毒的攻击感染,同时也能预防羊痘病毒的感染。
表位疫苗以其片段短、表达产物分子质量小、可插入合适的免疫增强因子进行共表达、不存在基因重组、整合的问题、安全性和稳定性好等优点已逐渐成为人们研究和关注的焦点。目前,表位疫苗的研究尚有许多问题需要解决,从研制到应用还有很长的路要走。