表没食子儿茶素没食子酸酯作为Nrf2/ARE信号通路激活剂的研究进展

杨 涪，刘 旭，李明春

（1.青岛大学药学院药理学系，山东青岛266021；2.中国人民解放军第401医院药剂科，山东青岛 266071）

绿茶是一种广受欢迎的饮品，流行病学研究表明，绿茶用量与降低心血管疾病风险呈剂量正相关性，且绿茶被认为是中国人群帕金森病的保护性因素［1］，具有较好的保健作用。儿茶素是茶叶中黄烷醇类物质的总称，是绿茶发挥保健作用的主要成分。儿茶素包括表儿茶素、表没食子儿茶酚、表儿茶酚没食子酸和表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallo⁃catechin-3-gallate，EGCG）4种类型。其中EGCG是儿茶素中含量最多、活性最强的成分，是茶多酚乃至绿茶有效成分研究的主要对象。大量研究已证明，EGCG具有较强的抗氧化、清除自由基、金属螯合、抗癌、抗凋亡和抗炎作用，同时参与信号通路调控，表现出多种生物学功效［2］，具有较大开发应用价值。核转录因子红细胞系-2p45相关因子2/抗氧化反应元件（nuclear factor erythroid-2p45-related factor 2/antioxidant response element，Nrf2/ARE）信号通路是体内抗氧化的重要通路，调控体内氧化还原水平，与神经系统疾病、免疫疾病、心血管疾病和肿瘤等多种疾病相关，是研究氧化应激的主要靶通路之一。研究表明，EGCG参与Nrf2/ARE信号通路调控，对Nrf2及下游产物具有激活作用，影响机体氧化还原状态。本文概述了EGCG及Nrf2/ARE信号通路的性质，总结了EGCG作为Nrf2/ARE信号通路激活剂的研究进展，为EGCG开发利用提供参考。

1 EGCG的生物学活性

EGCG是多羟基酚类化合物，是茶多酚的主要有效成分，苹果和葡萄中也富含EGCG。EGCG已被证实具有抗氧化、抗癌、与膜蛋白互相作用、激活第二信使和信号通路、调控代谢酶和细胞自噬等多种生物学功效［3］。

EGCG抗氧化能力是维生素E的25倍，维生素C的100倍，酚羟基是其抗氧化的结构基础，可提供活跃的氢以清除活性氧（reactive oxygen species，ROS）；EGCG能螯合金属离子形成非活性化合物，防止金属离子氧化产生自由基；还能促进抗氧化酶表达。EGCG抑制肿瘤细胞增殖和转移主要是引发细胞凋亡、阻滞细胞周期；抑制NF-κB信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase pathway，MAPK）信号通路、表皮生长因子受体介导的信号通路、胰岛素样生长因子受体介导的信号通路，抑制环氧合酶2过表达及蛋白酶体激活；调控与肿瘤血管生成、转移和迁移相关的信号通路，抑制血管内皮细胞生长因子受体和基质金属蛋白酶等；且这种抑制增殖、促凋亡的功效选择性地作用于肿瘤细胞，对正常细胞无影响。放射元素标记发现，人结肠癌细胞中约75%EGCG存在于胞浆，且细胞膜的放射性随时间增加，说明EGCG的生物学作用可能由其代谢产物与细胞内分子结合后产生，且EGCG的同二聚体与膜结合［4］。EGCG可产生低水平的ROS［5］，可能作为下游信号通路的第二信使；可能调控的第二信使和膜表面受体还包括Ca2+、cAMP、cGMP、血小板衍生生长因子、血管内皮细胞生长因子受体和表皮生长因子受体等［3］。体内实验已证实，EGCG能够激活Nrf2/ARE信号通路，酪氨酸激酶JAK/转录因子STAT（Janus kinase/signal transducer and activator of transcription，JAK/STAT）通路，MAPK通路，磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶（phosphatidylinositol-3-kinaseserine/threonine kinase，PI3K/AKT）通路，Wnt和Notch等信号通路，参与细胞调控。

2 Nrf2/ARE信号通路

2.1 Nrf2/ARE信号通路的分子基础

线粒体呼吸、黄嘌呤有氧分解等生理活动会产生ROS。紫外线、辐射等外源因素也会促使ROS形成［5］。ROS是指含未成对电子的氧原子的自由基和活性代谢产物，主要形式为激发态氧分子、氧自由基、过氧化物和氮氧化物等［6］。ROS使核酸损伤、蛋白质变性、膜渗透性改变，破坏体内氧化还原平衡，与神经退行性疾病、自身免疫疾病和肿瘤等多种疾病相关。

ROS过多，机体会发生自我保护性反应，产生内源性抗氧化酶和解毒酶降低损伤。其中，Nrf2/ARE信号通路直接影响细胞氧化应激水平，是调控氧化还原的核心通路。该通路包括3个基本组成：①KELCH样环氧氯丙烷相关蛋白1（Kelch-like ECH association protein 1，Keap1），它通过细胞骨架蛋白将Nrf2定位于细胞质，含624个氨基酸，包括3个主要功能结构域：N端BTB为同二聚化结合结构域；中部IVR结构域是氧化剂和亲电子剂的感受区，专司调节蛋白活性；C端Kelch/DGR结构域与Nrf2结合，维持两者间相互作用。②核转录因子Nrf2，它具有高度保守的碱性亮氨酸拉链结构，是CNC转录因子家族中活性最强的成员，对氧化应激具有高敏感性，广泛表达于肌肉、肝、肾、心、肺和神经等多种组织，由589个氨基酸组成，N端Neh2是主要调节结构域，与Keap1C端Kelch/DGR结构域结合，同时是Keap1介导Nrf2泛素化的必要通道；Neh1与Maf蛋白结合形成异二聚体，核转位后与ARE结合；Neh3，Neh4和Neh5为反式激活结构域，专司与其他转录辅助因子结合；Neh6和Neh7可能是非Keap1依赖性的Nrf2转录活性调控结构域［7-8］。③ARE是调节多个基因的顺式作用元件，核心序列为TGA＊＊＊＊GC。下游基因包括编码抗氧化酶、解毒酶、抗凋亡蛋白和蛋白酶体的基因等［8］。

2.2 Nrf2/ARE通路的生理作用

该通路是已知的最强大的抗氧化途径。生理状态下，Keap1介导Nrf2降解和泛素化，使Nrf2保持在较低水平。细胞氧化应激和（或）受到亲电子试剂攻击时，Keap1 IVR结构域感受外来刺激，Nrf2得以转位进入细胞核。核转位后，Nrf2的Neh1与Maf蛋白结合形成异二聚体，再与ARE结合，同时Neh4、Neh5募集辅助转录因子，启动下游约200种基因的转录，具有抗氧化应激、调节炎症损伤、抗细胞凋亡和缓解钙离子超载等多重功能，维持细胞环境相对稳定。下游产物包括：①Ⅱ相解毒酶。血红素加氧酶1（heme oxygenase，HO-1）和NAD（P）H醌氧化还原酶1（NAD（P）H：quinone oxidoreduc⁃tase l，NQO-1）等。②抗氧化酶。γ-谷氨酰胺半胱氨酸合成酶（gamma glutamine cysteine synthe⁃tase，γGCS）、过氧化氢酶（catalase，CAT）、谷胱甘肽还原酶（glutathione，GR）、硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase，TR）和过氧化物酶（perox⁃iredoxin，Prx）等。③分子伴侣和蛋白酶体如热休克蛋白等［8］。

2.3 Nrf2/ARE通路调控机制

2.3.1 蛋白质水平调控

蛋白质水平是调控Nrf2通路的主要方式，其中Keap1是最重要的调控蛋白。Keap1将Nrf2锚定于胞浆内，是E3泛素连接酶底物并介导Nrf2泛素化，使Nrf2含量保持在较低水平。氧化应激状态下，Kaep1所介导的Nrf2泛素化减弱，Keap1被Nrf2饱和，新生成的Nrf2得以转位进入细胞核［7］。因此，Keap1是Nrf2的负性调控蛋白。蛋白激酶如MAPK，PI3K，糖原合酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）和c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）等能使Nrf2部分结构域磷酸化，激活或抑制其活性，是另一种蛋白质水平上的调控方式。此外，分子伴侣（如P21和小窝蛋白等）也参与通路调控［9］。

2.3.2 表观遗传学调控

Nrf2表达量的组织差异性可能与不依赖蛋白的表观遗传学调控有关。目前认为Nrf2启动子多态性（如甲基化）和微小RNA（miRNA，miR）（如miR-144，miR-28和miR-200a）等因素参与Nrf2调控，与蛋白质调控共同维持Nrf2相对稳定［9］。该方式敏感性差，反应时间长，研究结果有限。

2.3.3 小分子化合物

据文献报道，Nrf2诱导剂主要分为双酚、胺和醌类物质，如特丁基对苯二酚和EGCG等；迈克尔加成受体，如二十碳五烯酸；异硫氰酸酯类，如莱菔硫烷；氢过氧化物、三价砷化合物等。它们与Ke⁃ap1半胱氨酸残基中的巯基结合，或将巯基氧化，使Keap1构象改变，继而Nrf2与Keap1解离后核转位；或产生低水平H2O2刺激Nrf2表达［10］。已证实莱菔硫烷［11］、丹酚酸A［12］和银杏二萜内酯［13］等天然产物能激活Nrf2，促进NQO1和HO-1等下游产物表达。

2.3.4 Nrf2/ARE通路的负反馈调节

Nrf2/ARE通路存在负反馈调节，即Nrf2表达过多时，其本身即可诱导Keap1表达，增加Nrf2泛素化，防止通路过度活化，但具体机制尚不明确［7］。据文献报道，多药耐药肺癌细胞的Nrf2信号通路活性更高，Nrf2基因敲除后多药耐药蛋白表达降低，药物敏感性得以恢复。40例肿瘤组织免疫组化检测结果显示，Nrf2和多药耐药蛋白表达量均明显高于癌旁组织，基因相关性分析也显示两基因的表达具有相关性［14］。以上报道提示，Nrf2/ARE通路过度激活可能与肿瘤耐药性相关，其后续研究需明确该通路过度活化带来的后果，为以该通路为靶标的药物研发提供参考。

3 EGCG对Nrf2/ARE信号通路的激活作用

EGCG对Nrf2/ARE信号通路具有激活作用，但具体分子机制说法不一。Zheng等［15］研究发现，小窝蛋白-1在EGCG吸收和转运中发挥作用，它的位移与EGCG启动保护作用密切相关。利用小干扰RNA（siRNA）使小窝蛋白沉默后，发现Nrf2、HO-1和胆红素的表达上调，证明EGCG诱导小窝蛋白-1转移并使之发生功能变化，这种变化可能为EGCG激活Nrf2细胞保护系统所必须。定量研究发现，Keap1蛋白表达量未受EGCG影响，但活性下降。计算机分子对接研究发现，EGCG能进入Keap1蛋白，与蛋白内特定的氨基酸残基形成氢键互相结合，使Nrf2-Keap1结合过程被抑制，Keap1所介导的降解作用减弱，Nrf2得以转位进入细胞核发挥作用［16-17］。该发现与早期综述中Nrf2通路调控机制的部分观点相类似［10］。EGCG作为Nrf2通路激活剂在各系统疾病模型中的研究进展总结如下。

3.1 泌尿系统疾病

EGCG对于慢性肾病具有潜在保护作用，靶通路包括与炎症反应相关的NF-κB通路和Nrf2通路，以及与细胞自噬相关内质网和线粒体通路［18］。Ye等［19］研究发现，EGCG明显降低新月型肾小球肾炎模型小鼠死亡率，尿蛋白、血清肌酐和组织学检查明显改善。Nrf2及下游蛋白表达增加，同时p-AKT，p-JNK，p-ERK1/2和p-P38等蛋白表达降低，表明EGCG同时靶向作用于Nrf2信号通路和炎症反应等多种途径对新月型肾小球肾炎发挥保护作用。Tsai等［20］发现，在狼疮性肾炎小鼠模型中，EGCG能预防尿蛋白和严重肾功能损伤，增强肾Nrf2活性，降低肾氧化应激和炎症因子活性，降低NLRP3、胱天蛋白酶1、白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）和IL-18的表达，增强调节性T细胞活性，即EGCG对于狼疮性肾炎的保护作用是通过激活Nrf2通路、降低NLRP3和增加调节性T细胞表达的协同作用。在顺铂导致的大鼠肾毒性模型中，EGCG可上调Nrf2和HO-1蛋白水表达平，并降低氧化应激标志物NF-κB和4-羟基壬烯酸水平，明显增强肾抗氧化酶和谷胱甘肽活性。该研究认为，Nrf2通路是EGCG对顺铂导致的大鼠肾毒性发挥保护作用的首要靶通路［21］。Sun等［16］研究发现，EGCG能减少糖尿病性肾病（diabetic nephropathy DN）模型小鼠肾纤维化、炎症因子表达和氧化应激，发挥保护作用；EGCG促进了Nrf2核转录但不改变其基因转录量，且Keap1表达不受影响；将Nrf2基因敲除后，上述保护作用消失。EGCG对高糖作用下的小鼠肾小球系膜细胞具有抗炎、抗氧化、防止纤维化作用，细胞Keap1基因经siRNA干扰后以上作用减弱。该研究说明，EGCG能抑制Keap1活性，进而激活Nrf2，对DN发挥保护作用。上皮细胞-间充质转化与肿瘤转移和组织纤维化等生物学过程密切相关。Kanlaya［22］等利用草酸钠处理肾小管上皮细胞后发现，细胞发生纤维状改变，间充质细胞蛋白表达增加，而上皮标志物表达均下降。EGCG预处理通过激活Nrf2通路，增加了抗氧化酶表达，减少了细胞ROS含量，抑制间充质转化。siRNA干扰Nrf2基因表达进一步证实了Nrf2通路即为EGCG作用的关键通路。Wang等［24］研究结果表明，EGCG浓度依赖性地抑制肾小管上皮细胞上皮间充质转化，以及Smad 2和Smad 3的磷酸化，并增加Nrf2的核聚积。Nrf2基因敲除后上述作用消失，说明EGCG对肾纤维化的保护作用可能是通过Nrf2通路产生。

3.2 呼吸系统疾病

EGCG减少肺组织水肿、炎症因子和可诱导型一氧化氮合酶表达，通过上调Nrf2表达对氟化物导致的大鼠肺组织损伤发挥保护作用，促进Nrf2核转位，改善氧化应激状态，抑制炎症因子和Keap1表达。分子对接分析发现，EGCG可与Keap1结合，进而抑制其活性。该研究提示，EGCG可作为重金属引起的败血症的潜在药物［17］。EGCG同样能改善大鼠放射性肺损伤、水肿及纤维化病变，显著上调Nrf2，HO-1和NQO-1表达，可能的机制是通过Nrf2/ARE信号通路增加抗氧化酶的表达［24］。Sriram等［25］研究认为，EGCG对平阳霉素（博来霉素）导致的肺纤维化的抗氧化和抗炎作用是通过Nrf2信号通路增强抗氧化作用和Ⅱ相解毒酶表达。由此可见，EGCG对肺部疾病缓解作用的主要机制是激活Nrf2/ARE通路，促进Nrf2及下游蛋白表达。

3.3 心脑血管系统疾病

Bai等［26］发现，EGCG对中早期缺血性脑卒中模型小鼠具有保护作用，可能的途径是EGCG激活了Nrf2信号通路，进而促进血管生成。该研究发现，EGCG能使脑卒中小鼠脑梗死面积减少、血管密度增大、血管新生增多，脑神经功能评分更高；利用MAPK/ERK抑制剂将Nrf2活化过程阻断后，Nrf2表达减少，上述保护作用减弱。Han等［29］利用大鼠大脑中动脉闭塞模型发现，EGCG具有显著抗氧化和神经保护作用，能减少脑梗死面积和神经元丢失，同时增加Nrf2和下游基因表达。同时EGCG能抑制人主动脉平滑肌细胞增殖，其机制是通过激活Nrf2核转位，增加HO-1的表达，且具有剂量和时间依赖性［28］。Yang等［29］利用激酶特异性抑制剂和基因沉默技术发现，EGCG通过激活p38/MAPK和ERK1/2通路上调Nrf2/HO-1表达，从而对PM2.5导致的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤发挥保护作用。当巨噬细胞暴露于肿瘤坏死因子α时，细胞呈现泡沫细胞状态，而泡沫细胞是动脉粥样硬化的主要特征之一。EGCG预处理可缓解上述症状。EGCG促进Nrf2与Keap1解离，使Nrf2转位进入细胞核，促进ARE下游基因转录，从而抑制NF-κB；同时Keap1直接影响NF-κB调节亚单位，下调NF-κB表达。EGCG对动脉粥样硬化同样具有保护作用［30］。

3.4 消化系统疾病

乙酰化后的EGCG能降低炎症介质水平，下调PI3K/Akt/NF-κB的磷酸化和调节蛋白P65的乙酰化，并通过调节ERK1/2通路和Nrf2通路增加HO-1表达，从而减轻葡聚糖硫酸酯钠导致的小鼠结肠炎，并显著降低结肠癌发病［31］。Dong等［31］研究认为，食物富硒时，EGCG可增加小鼠肝GR和TR含量，当食物缺硒时，EGCG更倾向于激活肝Nrf2通路，提高NQO-1蛋白水平，增强硫氧还蛋白活性。也就是说，正常情况下抗氧化酶可对抗高剂量EGCG，避免Nrf2激活；缺硒时，EGCG对Nrf2为激活作用。Han等［32］研究发现，EGCG能抑制砷化物所引起的肝病理损伤，降低ROS和丙二醛水平，减少砷化物在肝中的残留。同时EGCG激活Nrf2信号通路，增强了包括Nrf2，NQO-1和HO-1在内的通路相关基因的表达，从而减轻肝毒性。该结果表明EGCG是砷中毒可能的治疗药物。

3.5 神经系统疾病

神经系统富含对氧自由基敏感的不饱和脂肪酸，又相对缺乏抗氧化酶，易受氧自由基损害发生神经退行性疾病和脑缺血损伤等。Romeo等［33］证实，EGCG能诱导大鼠神经元细胞HO-1表达，可能的机制是活化Nrf2，并通过该通路保护细胞免受锌原卟啉Ⅺ所致的氧化损伤。

3.6 生殖系统疾病

有研究发现，EGCG能显著改善氟化物中毒大鼠类固醇生成酶、睾酮水平和精子功能，改善抗氧化状态，减少睾丸病变，使炎症因子和细胞凋亡标志物也接近正常值。机制研究结果显示，Nrf2及下游基因表达增强，而Keap1表达被抑制［34］，说明EGCG在生殖系统中同样可以激活Nrf2通路。Pan等［35］研究发现，糖尿病可导致小鼠睾丸重量减轻、细胞凋亡，精子数减少，内质网应激和氧化损伤增加，EGCG能通过活化Nrf2使损伤减轻。Nrf2基因敲除后，睾丸损伤更为严重，且EGCG的缓解作用消失。提示Nrf2是EGCG缓解糖尿病所致睾丸损伤的关键因素。

3.7 其他

EGCG具有较强的抗癌作用，及时诱导Ⅱ相解毒酶、阻止致癌物代谢活化、增强细胞防御活性是EGCG重要的化学预防机制，并通过诱导Nrf2直接或间接参与炎症反应、细胞增殖与凋亡和细胞黏附等活动。Nair等［36］利用Nrf2基因敲除小鼠和PC-3细胞研究发现，EGCG能影响前列腺癌细胞的基因表达，该作用依赖于Nrf2通路和AP-1转录因子的介导。Kilic等［37］研究发现，EGCG能协同顺铂抑制宫颈癌细胞生长，诱导细胞凋亡，减少氧化应激，通过调控NF-kB，p65，COX-2，p-Akt和p-mTOR通路，激活Nrf2/ARE通路增强了顺铂对HeLa细胞的治疗作用。这在三阴性乳腺癌细胞中也得到相同的结果［38］。

由树脂单体构建的牙科复合材料由于不完全聚合或降解产生ROS并消耗谷胱甘肽，可能引起接触过敏和牙髓损伤。有假说认为，可利用EGCG对Nrf2的激活作用，降低树脂材料对人体损伤，是未来EGCG的应用方向之一［39］。破骨细胞会影响牙齿正畸效果，破骨细胞分化因子是诱导破骨细胞发育和发挥功能的细胞因子，而ROS是激发该因子的细胞内信号分子。Kanzaki等［40］利用莱菔硫烷和EGCG作为Nrf2激活剂，清除ROS，抑制畸形牙的复发。

Zhu等［41］发现，EGCG能减轻X线对皮肤角质形成细胞的损伤，提高细胞存活率，降低线粒体损伤，减少细胞凋亡，减少ROS和DNA双链断裂。敲除基因或使用抑制剂将HO-1阻断后，EGCG的保护作用明显减弱，说明HO-1在上述过程中具有重要作用。Nrf2/ARE通路是HO-1的上游通路，推测该保护作用可能与之相关。

在抗病毒方面，Zhang等［42］发现，Nrf2信号通路是EGCG阻止Tat转录反式激活因子引导的HIV-1转录的首要靶通路，同时EGCG还可抑制AKT通路并激活AMPK通路，最终降低NF-κB的活性。EGCG能抑制流感病毒侵入人鼻上皮细胞和细胞内复制，敲除Nrf2基因后这种抑制作用消失，说明EGCG通过Nrf2对流感病毒发挥作用［43］，为阻止病毒侵入提供了新的思路。

EGCG对于控制血糖同样有效。与对照组相比，高脂饮食小鼠腹腔注射EGCG后的体质量增加量、血糖和胰岛素水平、肝和肾的质量均显著降低。EGCG能抑制血浆和肝中晚期糖基化终末产物及其受体的表达，并激活Nrf2，增加还原型与氧化型谷胱甘肽的比例，从而控制血糖、降低体质量，减轻糖尿病并发症［44］。

人骨髓间充质干细胞（human mesenchymal stem cells，hMSC）具有可塑性高、免疫反应小和制备容易等特点，有较大的细胞治疗潜力。ROS过多时，hMSC会发生细胞衰老，可用性降低。Shin等［45］将hMSC置于H2O2造成的高ROS环境中，发现衰老细胞数增加，乙酰化p53和p21表达显著增多；而EGCG预处理可以预防H2O2造成的细胞衰老。细胞Nrf2基因被敲除后，EGCG失去抗氧化作用，此时尽管经过了EGCG预处理，细胞p53和p21仍表现出较高的乙酰化p53和p21水平。该研究提示，Nrf2通路和抑癌蛋白p53/p21与EGCG预防hMSC细胞衰老有关，Nrf2是EGCG发挥作用的关键通路。

4 结语

众多研究证实，EGCG对Nrf2/ARE具有激活作用，可能是多种机制协同作用的结果，涉及抗氧化、抗炎等多种机制，因此需要开展多通路研究，深入阐明其机制。以上证据表明，EGCG在全身各系统中对Nrf2/ARE的通路均具有一定激活作用，但这种激活作用在各组织间是否存在特异性尚未明确。有研究分别在肝和小肠中发现了671个和288个受EGCG调控的依赖于Nrf2的基因，这种差异可能与Nrf2主要调控解毒酶和抗氧化酶的表达有关，而肝是最主要的解毒器官［46］。

目前EGCG的药理学研究主要是细胞和动物实验，仅有的临床试验证实了EGCG具有抗癌功效，但尚未对抗癌机制进行深入探讨。而EGCG抗氧化、抗炎和通路激活等其他生物学功效尚未在人体得到证实，因此临床试验将是下一步研究的重点。目前主要面临的未明确问题有：①EGCG在人体内的药物代谢动力学特点尚未明确，这是临床试验亟待解决的问题。②体外实验浓度通常为20～100 μmol·L-1，而人口服EGCG保健胶囊后的血药峰浓度仅为 7.5 μmol·L-1［47］，临床试验给药量也仅为10～20 mg·kg-1，血药浓度仅为体外实验的1/10，生物学效应减弱，这种浓度差异是临床试验中值得注意的问题。③EGCG存在低发生率的肝毒性，且与性别有关，可能与绿茶提取物中或制剂中的其他成分有关［48］，也有研究认为是高剂量EGCG会自氧化产生ROS，对Nrf2及下游蛋白虽有激活作用，但依旧大量消耗肝中HO-1和NQO-1等解毒酶，使其他组织暴露在高ROS环境中，从而产生损伤［49］，因此应对毒副作用进行充分评估。

EGCG胃肠道通透性差，生物利用度较低，在小鼠和大鼠体内的生物利用率分别为26.5%和1.6%，且其酚羟基在中性或碱性条件下易发生去质子化作用而迅速分解，发生甲基化、糖酯化、磺化等生物转化反应，存在体内不稳定、脂溶性差、吸收率低等问题，影响生物活性。为了提高利用率，有研究尝试对EGCG进行化学修饰，修饰位点主要是酚羟基、D环羟基和苯环上的氢原子，已证实乙酰化EGCG与EGCG相比具有更高效的防止结肠病变和减少淋巴结节的作用［31］；也有研究对EGCG进行物理改性，如利用纳米化、微胶囊等方法，在保留原有生物活性的基础上改善理化性质，提高生物利用度，扩宽了EGCG应用范围，是EGCG开发方向之一［50］。

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