肾阴虚证模型的构建及实验研究进展

黄文慧，张莉莉，郭伊霖，王冰

（1.上海中医药大学中药学院，上海201203；2.上海中医药大学教学实验中心，上海201203）

·专论·

肾阴虚证模型的构建及实验研究进展

黄文慧1，张莉莉1，郭伊霖1，王冰2

（1.上海中医药大学中药学院，上海201203；2.上海中医药大学教学实验中心，上海201203）

为更好地了解中药治疗肾阴虚证的作用机制，对国内近20年有关肾阴虚证的实验研究文献进行分类总结，在系统归纳肾阴虚模型构建方法的同时，结合中药介入治疗后相关指标变化进行系统综述，为中药治疗肾阴虚证提供了一定的实验研究方法。

肾阴虚证；动物模型；中药；研究进展

肾阴虚是指由于肾阴不足，失于滋养，阳亢内生，虚热内扰所表现的证候。肾气不足多由先天肾气不足、久病耗伤、房劳过度、食温燥劫阴之品所致。证见腰膝酸痛、头晕耳鸣、失眠多梦、五心烦热、潮热盗汗、遗精早泄等。肾阴虚证与糖尿病、忧郁症、原发性高血压、骨质疏松、紫癜等其他疾病有着密切联系，还会诱发口腔溃疡、引起生精障碍或少精、学习记忆障碍，影响听力和免疫功能等。

查阅近20年的文献，肾阴虚证的动物实验造模方法很多，主要分为以下4种：甲状腺功能亢进(简称甲亢)肾阴虚证模型、肾上腺皮质功能亢进肾阴虚证模型、高血压肾阴虚证模型、过量使用热性中药致肾阴虚证模型。不同动物模型建立方法各有优缺点，其中甲亢模型是目前阴虚造模最常用的方法。现有相关文献大多总结归纳了肾阴虚证实验动物的模型建立方法，而笔者在系统归纳肾阴虚证模型构建方法的同时，对结合中药介入治疗后的相关指标变化进行系统综述，为中药治疗肾阴虚证提供了一定的实验研究方法。

1 甲亢肾阴虚证模型

1.1 概述

临床中，大多数甲亢患者均属肾阴虚证候，故通过向实验动物大剂量使用甲状腺激素，形成外源性甲状腺素水平升高，复制出甲亢的动物模型[1]。甲状腺激素在体内促进物质代谢，增加耗氧量，使产热增加。造模周期6～21 d。根据造模药物的不同可分为甲状腺素造模肾阴虚证法和甲状腺素加利血平造模肾阴虚证法。

1.2 方法

1.2.1 甲状腺素造模肾阴虚证法

通过给予大剂量甲状腺素建立肾阴虚证模型，是目前阴虚造模常用的方法。造模成功后，模型动物会出现毛无光泽，形体消瘦，体质量下降或增长缓慢，多动易惊，心率加快，体温升高，饮水量、食量增加，大便干结等基本的肾阴虚证症状。根据动物模型结合病证的不同，可将肾阴虚证分为甲亢型、糖尿病型、忧郁型和其他类型。

1)甲亢型肾阴虚证

采用灌胃甲状腺片混悬液的方法复制出甲亢型肾阴虚证模型，造模周期多为21 d。此造模方法得到的实验动物除了表现出肾阴虚证基本症状外，还会出现竖毛、脱毛、汗多、呼吸急促、大便形小色黑、小便短小色赤、烦躁易怒等现象。

沃兴德等[2]每天给予雄性W istar大鼠灌胃3m L甲状腺片混悬液，正常对照组每天灌胃3m L生理盐水，造模周期21 d。结果表明，甲亢型肾阴虚组大鼠出现上述症状，且灌胃时反抗挣扎较正常对照组多，血清三碘甲状腺原氨酸(T3)水平较正常对照组显著升高，同时雌二醇(E2)、睾酮(T)水平较正常对照组也有不同程度下降，由此得知肾阴虚大鼠能量代谢较活跃。

钟杰敏等[3]选取清洁级雄性SD大鼠实验，除正常组外每只大鼠连续21 d每日按30 mg／kg灌胃甲状腺素片混悬液造模，模型组大鼠除呈上述症状外还常有打斗行为，皮肤含水量显著降低，肾组织水通道蛋白（AQP1）和水通道蛋白（AQP2）水平异常升高等现象，在给药六味地黄丸后大鼠状态有改善，肾组织AQP1和AQP2水平也较模型组显著降低；各组大鼠体质量均增长但模型组大鼠增长明显缓慢，六味地黄丸组与正常组相比无统计学差异。可见，六味地黄丸能有效改善甲亢型肾阴虚模型大鼠水液代谢相关指标的紊乱，纠正其肾组织AQP1和AQP2含量的异常升高。

桂常青等[4]选取SD大鼠，雌雄各半，实验前禁食不禁水12 h，每日灌胃给药甲状腺素2.5mg／kg制备肾阴虚证模型，灌胃21 d后造模成功。模型对照组大鼠除呈上述症状外，还出现了痛阈值降低，甲状腺质量显著降低，血糖水平降低，血浆黏度增高，血清T3和四碘甲状腺原氨酸(T4)水平显著升高，免疫球蛋白(IgG)含量降低，铜(Cu)含量增高，Cu／Zn(锌)比值显著升高的现象。而给药全龟胶囊后阴虚大鼠的不良症状均有改善，可见，全龟胶囊对肾阴虚证有治疗作用。

李发荣等[5]选取昆明种健康小鼠，雌雄各半，正常对照组每日灌胃蒸馏水，其余各组每日灌胃等体积甲状腺素片药液，灌胃9 d后小鼠痛阈值下降即造模成功。将其余组与正常对照组相比，可见各组耗氧量均显著升高，痛阈值显著降低，而给药太白参后肾阴虚小鼠的体温上升，痛阈值下降，饮水量及耗氧量上升等症状均有明显改善。从而得知太白参对肾阴虚证有治疗作用。

2)糖尿病型肾阴虚证

选用雌性（或雌雄各半）W istar大白鼠，先适应性饲养5～7 d，待动物适应饲养室环境，体质量开始增加时再进行实验。造模采用禁食12 h后空腹腹腔一次性注射链脲佐菌素诱发糖尿病；或先连续7 d皮下注射甲状腺素，用量每日0.2mg／kg，第8天开始禁食12 h，尔后空腹腹腔一次性注射链脲佐菌素；或先禁食12 h，尔后空腹腹腔一次性注射链脲佐菌素，再连续7 d皮下注射甲状腺素。此类造模方法得到的实验动物除了表现出肾阴虚证基本症状外，还会表现出活动频率增加，但反应迟钝，发育迟缓，饮水量、食量、尿量均高于正常组2～3倍，血糖、尿糖均升高等。

吴文莉等[6]选取雌性大白鼠，随机分为4组，对比研究了上述3种不同的造模方法，结果表明，这3种造模方式均可造出肾阴虚型糖尿病的病证结合模型，而加用甲状腺素可加重肾阴虚表现，适当缩短造模天数，更为理想。

孙永宁等[7－8]采用先甲状腺素后链脲佐菌素(STZ)给药雌性W istar大鼠的造模方法造模。结果表明，模型组大鼠与对照组相比，尿液中包含的甘氨酸、琥珀酸含量显著升高，十六烷酸、胆固醇水平显著下降，血液中包含的甘氨酸、乳酸、葡萄糖、半乳糖含量显著升高，从而导致能量代谢紊乱、糖代谢紊乱、肾功能不全，引起糖尿病型肾阴虚证。

杨朴[9]选取SPF级W istar大白鼠，雌雄各半，采用先链脲佐菌素后甲状腺素的造模方法造模，结果表明糖尿病造模组大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、还原黏度、红细胞聚集指数均较正常值明显升高，从而导致血液相对浓缩。经醒胰降糖灵治疗后全血黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数均降低。可见，醒胰降糖灵有防治糖尿病及其并发症的作用。

3)忧郁型肾阴虚证

选择健康雄性（或雌雄各半）SD大鼠，实验前对所有大鼠进行敞箱试验和液体消耗试验，剔除敞箱实验水平得分和垂直得分总分高于120分和低于30分的大鼠后，根据实验结果分层，随即分组进行实验。除正常组外，其余各组大鼠均孤养并按照程序给予大鼠24 h不同的刺激，造成大鼠抑郁。在应激使大鼠抑郁的同时从第1天开始每天灌胃甲状腺素混悬液，造模周期21 d。此类造模方法得到的实验动物除了表现出肾阴虚证基本症状外，还会出现倦卧少动，毛湿，竖毛，易怒，捉拿时尖叫，攻击性行为增多，饮食量有增加趋势但最后仍减少，敞箱实验各项指标值均减少，血浆环磷酸腺苷（cAMP）水平、环磷酸腺苷／环磷酸鸟苷（cAMP／cGMP）比值显著升高，E2水平、E2／T比值升高等现象。

陈容[10]的造模成功后，模型组除出现基本现象外，还出现了5－羟色胺(5－HT)水平显著降低现象，而给予忧虑康液后的大鼠肾阴虚表现和抑郁行为在一定程度上均有所改善，可见，忧虑康液对肾阴虚抑郁症有一定的治疗作用。

邹志[11]、陈晓阳等[12]、史冰等[13]发现，造模后模型大鼠除出现基本现象外，还出现了血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）增高，海马CA3区锥体细胞脱失，残存椎体细胞排列稀疏、紊乱，下丘脑室旁核边界不清，神经元数目减少，皮质束状带增厚，肾小球结构紊乱，足底汗腺分泌旺盛等现象，而给予忧虑康液后模型大鼠所产生的异常症状体征均有明显改善，对下丘脑－垂体－肾上腺（HPA）轴功能也有调节作用，从而发现了忧虑康液抗抑郁型肾阴虚证的作用机制。

秦莉花等[14]发现，造模后模型大鼠还出现了脑源性神经营养因子（BDNF）的mRNA和TrKB的mRNA表达降低的现象，给予忧虑康液后改善了模型大鼠指标的异常现象，从而得出忧虑康液通过促进海马BDNF、TrKB基因表达上调治疗抑郁型肾阴虚证的结论。

4)其他类型肾阴虚证

张颖等[15]选取清洁级雌性SD大鼠连续阴道涂片15 d，造成围绝经期大鼠，连续21 d每只每日灌胃甲状腺素2.5 mg造肾阴虚证模型。由围绝经期大鼠与正常对照组相比可见，除出现肾阴虚证基本症状外，还出现了下丘脑去甲肾上腺素(NE)水平降低，多巴胺（DA）和5－HT水平升高的现象，进而出现潮热、多汗、烦躁不安、失眠等症状，而给药百合知母汤后能明显改善围绝经期肾阴虚证大鼠的不良症状，因此认为百合知母汤有治疗围绝经期肾阴虚证的作用。

杨宇飞等[16]选用雌性BALB／c小鼠，每天口服320mg／kg剂量的甲状腺素片，服用10 d后造成紫癜病证结合肾阴虚证模型。由模型组与正常对照组比较可见，除肾阴虚基本症状外，还出现了T3、T、CORT、cAMP水平增高，促甲状腺激素(TSH)水平降低，外周血小板计数明显下降，股骨、脾脏巨核细胞计数增高，分类可见颗粒巨核、裸核巨核和变性巨核细胞增多，产板巨核细胞减少，脾脏T淋巴细胞亚群CD4＋，CD8＋，CD4＋／CD8＋均增高，而滋肾阴方不能使模型血小板恢复正常，表明治疗紫癜效果不佳，与临床实际相符，故还需继续寻找对紫癜疾病有特殊疗效的中药，推进临床治疗的发展。

刘四军[17]选取清洁级雌性SD大鼠适应3 d后，连续14 d每日灌胃每200 g体质量100μg剂量左甲状腺钠片溶液造模，之后用10%水合氯醛每100 g体质量0.3m L麻醉，用苯酚溶液烧灼48 h后造出直径为5mm的圆形溃疡。模型组除出现肾阴虚证基本症状外，还出现了怕热、出汗，神经过敏，急躁，T3和T4水平显著升高，溃疡黏膜下层肉芽组织增生，而给药清热降火方后明显改善了溃疡和肾阴虚症状，从而得出清热降火方对阴虚型口腔溃疡有改善和控制复发的功效。

傅紫琴等[18]筛选出合格的昆明种雄性KM小鼠后，连续4 d每日灌胃0.15 g／kg剂量甲状腺素，造肾阴虚证模型。由模型组与空白组相比可见，造模小鼠除表现肾阴虚证基本症状外，还出现了倦怠少动，负重游泳时间和耐缺氧时间缩短，血清超氧化物歧化酶（SOD）活性降低，丙二醛（MDA）含量增高等现象，而给药山茱萸后可使上述指标和症状得到相应改善。可见，山茱萸有补肝肾的作用。

张瑞雪[19]选取健康雄性小白鼠适应性喂养5～7 d后，连续10 d每日灌胃320 mg／kg甲状腺片水溶液造模，再以每只小鼠3mg用量灌胃给予柞蚕雄蚕蛾油，连续4周。结果显著抑制了小鼠肾组织中MDA的生成，并升高了小鼠肾组织中SOD和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）抗氧化剂酶的活性，可提高运动小鼠的抗氧化能力、有氧能力，并延缓其疲劳的发生和促进疲劳的恢复。

李俊丽等[20]选取雄性SD大鼠，连续10 d每日灌胃给药3mL甲状腺片悬液。造模小鼠出现了基本的肾阴虚症状，给予左归饮后进行双向凝胶电泳分析对比可见，左归饮纠正了21个非正常表达的蛋白质，表明左归饮可改善治疗肾阴虚证。

1.2.2 甲状腺素加利血平造模肾阴虚证法

通过灌胃给予甲状腺素加利血平混合液造模，也是目前阴虚造模常用方法之一，适量加入利血平可使多种动物制成脾肾两虚的模型。造模成功后，模型动物会出现体质量减轻、食量减少、皮毛枯槁失去光泽、行动迟缓无力、反应迟钝、萎靡不振、嗜睡、体温降低、畏寒、便溏及脱肛等症状。

徐飞等[21]选用雌雄各半的小鼠随机分组探讨不同提取工艺的六味地黄复方提取液对肾阴虚证模型的药理作用。结果肾阴虚小鼠出现上述症状，而不同提取工艺的六味地黄复方提取液均可使小鼠症状基本恢复正常，相比之下，用60%乙醇超声提取的药理效果最佳。

凌庆枝等[22]选用清洁级雄性SD大鼠适应性饲养2 d后，连续4周每日灌胃给予甲状腺素7.5mg及利血平0.05mg造模，探讨六味地黄汤对肾阴虚型生精障碍大鼠生殖系统的影响。结果模型组除出现上述症状外，还出现了拱背、互相拥挤、竖毛、腹部皮毛潮湿、阴囊皱缩、睾丸回升等现象，经给药六味地黄汤后能很好地促进受损睾丸、附睾、曲细精管的修复，提高精子数量和质量。

臧建伟[23]、王德秀等[24]、胡旭光等[25]均选用NIH种小鼠(雌雄各半)，连续7 d灌胃给予甲状腺素150mg，利血平1mg／kg造模。随机分组研究六味地黄汤生物制剂的药效学、对肾阴虚小鼠HPA轴的调节作用和对肾阴虚小鼠脾T淋巴细胞亚群的影响。结果表明，六味地黄汤能改善肾阴虚小鼠症状，增加肾阴虚小鼠体质量和脾脏、胸腺的质量，减少小鼠扭体次数，降低模型小鼠血浆ACTH及CORT含量，对模型小鼠HPA轴、T淋巴细胞亚群也有明显的调节作用，表明其有治疗肾阴虚的作用和提高机体非特异性免疫的能力。

黄江荣等[26]选用清洁级昆明种小鼠(雌雄各半)，随机分组研究六味地黄丸对甲亢肾阴虚小鼠基础代谢的影响。连续21 d每日按3mg甲状腺素加20mg利血平灌胃给药造模后，模型小鼠除表现出上述症状外，还出现了心率加快，耗氧量增加，血清T3和T4水平升高，血浆cAMP水平升高等现象，而给药六味地黄丸后肾阴虚症状均有改善，故六味地黄丸对肾阴虚证所致的基础代谢增加有一定的调节作用。

吕爱平等[27－28]选用纯系SD大鼠，雌雄各半，随机分组研究脾、肾阴虚模型大鼠肝细胞线粒体磷脂组分变化的比较和自由基损伤的比较。连续12 d每日灌胃给药甲状腺素100mg、利血平0.25mg造模，模型小鼠出现神经磷脂(SM)水平升高，磷脂酰胆碱(PC)水平下降，SM／PC比值升高，脂质过氧化物(LPO)水平升高，3种抗氧化酶活性下降的现象，而治疗药物能有效地改善症状，由此可见，甘油磷脂的减少，神经磷脂的增加，脂质过氧化损伤，是脾、肾阴虚证形成的共同病理生理基础。

张奕等[29]选用昆明种小鼠，雌雄各半，随机分组研究虫草养生茶对肾阴虚动物模型的影响。连续8 d每日灌胃给予甲状腺素15 g／L和0.1 g／L利血平的等体积混合物0.4mL／只进行造模，模型小鼠除出现上述症状外，还出现了低温游泳能力下降，而虫草养生茶能对抗肾阴虚小鼠的症状，说明其对肾阴虚证有调节治疗的作用。

许小强等[30]选用健康雄性SD大鼠，连续21 d每日灌胃甲状腺素15mg／kg，肌肉注射0.1mg／kg利血平，进行造模，模型大鼠除出现上述症状外，还出现了烦躁，易出汗，血清CORT水平降低，学习记忆能力下降，而二精丸有效部分能有效地改善这些症状，故对肾阴虚证有调节作用。

2 肾上腺皮质机能亢进肾阴虚证模型

2.1 概述

这类型的造模方法有2种，一种为促肾上腺皮质激素造模法，一种为肾上腺皮质激素造模法。第1种方法在现在的临床应用和研究中应用不多，故将第2种方法作为重点阐述。该模型是现阶段较为公认且周期较短的模型之一。这种方法通过给实验动物过量使用糖皮质激素，形成外源性糖皮质激素水平升高，复制出肾上腺皮质机能亢进的动物模型。造模周期为4～14 d。

造大鼠模型多选取清洁级雄性SD大鼠或W istar大鼠进行造模，模型大鼠出现体质量下降，眼窝下限，精神不振，活动减少，反应迟钝，烦躁不安，体毛粗糙无光泽，体温升高，大便干结色黑，小便色黄，饮水量、食量、尿量增加等基本症状。造小鼠模型多选用昆明种小鼠进行实验，采用灌胃、皮下或肌肉注射的方法给予氢化可的松、醋酸氢化可的松等造模。模型小鼠多出现形体消瘦，烦躁易怒，拱背扎堆，毛发枯槁易脱落，尿黄便干，饮水、饮食量增多等基本症状。

常用造模药物有氢化可的松、醋酸可的松、地塞米松等[1]。根据造模药物的不同，分为氢化可的松造肾阴虚模型、醋酸氢化可的松造肾阴虚模型、地塞米松造肾阴虚模型和醋酸强的龙造肾阴虚模型。

2.2 方法

2.2.1 氢化可的松造肾阴虚模型

杜标炎[31]选取W istar大鼠，雌雄各半，连续3 d每日肌肉注射0.2m L氢化可的松造模，模型大鼠淋巴细胞凋亡增多，且多在胸腺皮质部，而给药六味地黄汤的大鼠细胞凋亡数目明显减少，表明其可抑制糖皮质激素诱导的胸腺淋巴细胞凋亡。

肖子曾等[32]选用清洁级健康雄性SD大鼠，腹腔注射40mg／kg STZ后禁食12 h，灌胃35mg／kg氢化可的松，连续4 d造成2型糖尿病肾阴虚模型。模型大鼠除前文所述症状外，还出现了肛门红肿，痛阈值降低，空腹血糖（FPG）、血清cAMP、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）水平明显升高，高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）水平降低，给药六味地黄汤之后能明显改善上述症状，可见其治疗作用与改善脂代谢有关。

王秀荣等[33]选用昆明小鼠雌雄各半，皮下注射氢化可的松造模，使模型小鼠除前文所述症状，给药六味地黄汤后，模型小鼠的半数溶血值(HC50)、巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数，以及T淋巴细胞的刺激指数均明显升高，接近正常值。可见，六味地黄汤能有效提高肾阴虚小鼠的免疫功能。

徐勤等[34]用肌肉注射雄性NIH小鼠氢化可的松造模，使模型小鼠出现除前文所述症状，且动脉周围淋巴鞘T淋巴细胞多数凋亡，给药六味地黄汤后T淋巴细胞凋亡数明显下降，表明六味地黄汤有拮抗糖皮质激素诱导脾T淋巴细胞凋亡的作用，从而抑制肾阴虚证。

戴冰等[35]选用清洁级昆明小鼠，雌雄各半，灌胃氢化可的松注射液造模，使模型小鼠出现前文所述症状，且血浆cAMP水平升高，血清TSH，T3，T4水平升高，而给药六味地黄汤后症状得到改善，说明六味地黄汤通过降低HPT轴中垂体分泌的TSH，下调肾上腺分泌的T3和T4，修复受损甲状腺组织来改善肾阴虚证。

傅万山等[36]采用昆明小鼠皮下注射氢化考地松的造模方法，使模型小鼠出现上述症状，且对抗疲劳、耐低温、耐缺氧的抗应激能力及吞噬碳粒廓清指数和HC50明显降低，而给药六味地黄丸能明显增强肾阴虚小鼠上述症状，从而治疗肾阴虚证。

王显辉等[37]选取雄性Wistar大鼠实验，连续12 d每只每日肌肉注射氢化可的松注射液10mg进行造模肾阴虚证。给药黄氏嗣育丸后与造模组相比可见，黄氏嗣育丸可增强睾丸、附睾、精囊腺、前列腺作用及增加精子数，表明黄氏嗣育丸有补肾增精的作用。

段晓红等[38]选取雄性SD大鼠后，连续7 d每日腹腔注射氢化可的松50 mg／kg进行造模，除导致模型大鼠出现上述症状外，还出现了肾上腺、胸腺质量降低，糖皮质激素受体、甲状腺激素受体和雄激素受体的表达均发生改变。而给药滋肾阴方后能明显改善肾阴虚证的不良症状，从而治疗肾阴虚证。

史正刚等[39－40]选取Wistar大鼠，雌雄各半，连续7 d每日腹腔注射氢化可的松50mg／kg造模，与空白组比较，模型组cAMP水平无变化，cGMP水平明显降低，cAMP／cGMP水平明显升高，给药知柏地黄丸后与模型组相比血浆CORT，ACTH，CRH，血清白细胞介素2（IL－2）、白细胞介素6（IL－6）、IgG及脾、肾上腺指数均明显提高，故可知知柏地黄丸可有效拮抗外源性糖皮质激素对HPA轴的抑制作用并增强其免疫功能。

朱萱萱等[41]选用ICR小鼠皮下注射氢化可的松的造模方法，使模型小鼠出现上述症状，且吞噬碳粒、迟发型超敏反应、溶血素抗体生成及T淋巴细胞酯酶染色率均不同程度降低，胸腺和脾脏质量下降。给药补肾活血方后上述不良症状得以改善，从而促进肾阴虚小鼠的体液免疫功能，起到滋阴补肾的作用。

张迪等[42]选用普通级昆明小鼠皮下注射氢化可的松，使模型小鼠出现前文所述症状，而给予地黄后能有效地缓解氢化可的松所致的小鼠体质量下降等症状，表明滋阴补肾药地黄能有效治疗肾阴虚证。

2.2.2 醋酸氢化可的松造肾阴虚模型

单德红等[43]购入成年雄性SD大鼠适应性饲养1周后，连续6 d每日皮下注射醋酸氢化可的松注射液45mg／kg建立糖皮质激素型肾阴虚模型。模型组出现体质量、尿量明显减少，精氨酸加压素（AVP）水平上升，AQP2表达增加等现象，而给药六味地黄汤后指标基本恢复正常，六味地黄汤的滋阴作用与其抑制亢进的尿液浓缩机制有关。

应荐等[44]选取清洁级雄性SD大鼠，连续6 d每日皮下注射醋酸氢化可的松45mg／kg进行造模，模型组除表现前文所述症状外，还表现出睾丸曲细管生精上皮变薄、生精细胞减少、睾丸间质水肿、间质细胞数量减少等现象，而给药二地鳖甲煎后病理现象明显减轻，表明补肾滋阴药二地鳖甲煎能拮抗糖皮质激素诱导大鼠睾丸的病理改变。

杜标炎[45]选用健康雄性NIH小鼠肌注醋酸氢化可的松，使模型小鼠出现前文所述症状，且胸腺、脾脏质量量减轻，脾细胞IL－2活性降低，而给药补肾阴中药后能有效调整模型小鼠机体的免疫功能，从而建立治疗肾阴虚证的重要药理学基础。

姚凝[46]选用健康昆明小鼠，雌雄各半，肌肉注射醋酸氢化可的松造模，使模型小鼠出现上述症状，且血清氧自由基（OFR）水平升高，SOD活性下降，而给药华中五味子后改变了小鼠上述症状，表明对其有一定改善作用。

2.2.3 地塞米松造肾阴虚模型

夏炳江等[47]采用地塞米松肌肉注射，对雌性昆明小鼠进行造模，使模型小鼠出现上述症状，且肾上腺、脾脏、肝脏指数降低，ACTH、TSH水平升高，E2水平降低，cAMP／cGMP比值升高，股骨近端、腰椎骨密度明显下降，微骨折等，给药六味地黄丸后有明显改善。表明地塞米松肌注法构建肾阴虚骨质疏松病证结合模型可行，且六味地黄丸对其有一定改善作用。

2.2.4 醋酸强的松龙造肾阴虚模型

除大、小鼠外，研究者们还会用豚鼠进行实验。刘蓬等[48－50]选取健康活泼、耳廓反射灵敏的白色红目雄性豚鼠，肌肉注射醋酸强的松龙，造模周期10 d。造模成功后豚鼠出现躁动易惊、怕人、食量减少、体质量增长缓慢、大便干结等现象，还会出现听力下降，严重可致聋，且影响主要以6 kHz为中心的高频听力下降，而给药滋补肾阴的中药后可改善此现象。

3 高血压和过量使用热性中药致肾阴虚证模型

这2种造模方法运用较少，故合并在一起综述。通过结扎实验动物的肾动脉使其形成高血压模型，或者灌胃给予热性中药造成体内阴液耗伤[1]。根据高血压和体内阴液耗伤一般均表现出肾阴虚内热证型的原理，造出肾阴虚证模型。

倪琳琳等[51]选用SPF级雌性Wistar大鼠实验，用10%乌拉坦按1mg／100 g体质量腹腔麻醉，麻醉后卧位固定，于剑突下1.5 cm处沿腹正中线分层剥离皮肤及肌层，两手配合挤出左肾，分离肾动脉，结扎使其狭窄70%，缝合伤口，放回笼中饲养1周后给药卡托普利。结果表明，卡托普利对肾阴虚证高血压有降血压效果。

王剑等[52]、刘志宏[53]均将热性中药熬成汤剂，浓缩后灌胃给药的方法造成肾阴虚证模型，再根据不同的实验方法进行研究。模型大鼠出现竖毛、拱背、多动等症状，表明造模成功。结果表明，在模型大鼠的基础上加上去卵巢手术可出现更年期肾阴虚证，而给药滋肾固冲汤可治疗肾阴虚型出血症。

4 结语

近年来，对肾阴虚证的相关研究不断增多，实验动物的造模方法也越来越系统化。上述4种造模方法中，甲亢肾阴虚证模型是目前研究最常用的方法，实验方便且现象指标均容易观察，唯一不足的是造模周期长，大多为21 d。肾上腺皮质功能亢进肾阴虚证模型与甲亢模型相比，最大的优势是造模周期短，此方法一般4～7 d即可造模成功，适用于对实验时间有要求的研究项目，是现阶段较为公认且造模周期较短的模型。高血压肾阴虚证模型主要针对高血压这一研究范筹，针对性强，且实验难度较其他造模方法高。过量使用热性中药致肾阴虚证模型的研究相对较少。

研究最多治疗肾阴虚证的中药是六味地黄复方。除此之外，尚需挖掘更多能有效治疗肾阴虚证的中药单方或复方，同时还应改善现有模型的不足，建立造模周期短、造模方法简单方便，且更符合中医肾阴虚证临床实践的新的实验动物模型，以开发适合于临床使用的治疗肾阴虚证的中药新药。

参考文献：

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Construction of K idney－Yin Deficiency Syndrom e M odel and Its Experim ental Research Progress

Huang Wenhui1，Zhang Lili1，Guo Yilin1，Wang Bing2
（1.School of Traditional Chinese Materia Medica，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai，China 201203；2.Experiment Center for Teaching and Learning，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai，China 201203）

In order to understand the mechanism of traditional Chinese medicine in treating kidney－yin deficiency syndrome better，the literatures on kidney－yin deficiency syndrome in last 20 years in China were summarized，combined with traditional Chinese medicine intervention in the systematized induction of kidney－yin deficiency model，to provide some experimental methods for the treatment of kidney－yin deficiency by traditional Chinese medicine.

kidney－yin deficiency；animal model；traditional Chinese medicine；research progress

R256.5

A

1006－4931(2017)10－0001－07

2017－03－10)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.10.001

上海中医药大学课程建设项目[SHUTCMKCJSYB2016037]。

黄文慧（1996－），女，在读大学本科，（电子信箱）15921935648＠163.com。

王冰（1974－），女，博士研究生，副教授，研究方向为中药纳米给药系统，（电子信箱）annabel_cn＠163.com。