1 501份中段尿标本分离病原菌及其耐药性

谢 强(XIE Qiang)，曹明杰(CAO Ming-jie)，陈 玲(CHEN Ling)，徐添天(XU Tian-tian)

(滁州市第一人民医院，安徽 滁州 239000)



1 501份中段尿标本分离病原菌及其耐药性

谢 强(XIE Qiang)，曹明杰(CAO Ming-jie)，陈 玲(CHEN Ling)，徐添天(XU Tian-tian)

(滁州市第一人民医院，安徽 滁州 239000)

目的 了解某院中段尿标本分离病原菌及其对抗菌药物的耐药性，为临床抗菌治疗提供实验室参考依据。方法对该院2012年10月1日—2015年9月30日临床送检的中段尿标本分离病原菌进行鉴定和药敏试验，应用WHONET 5.6软件对药敏结果进行分析。结果1 501份中段尿标本共检出病原菌658株，其中革兰阳性菌151株，占22.95%，以凝固酶阴性葡萄球菌和肠球菌为主；革兰阴性菌456株，占69.30%，其中大肠埃希菌占45.44%；真菌51株，占7.75%。病原菌对常用抗菌药物耐药性差异较大，其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的检出率分别为52.84%、41.67%和33.33%，ESBLs菌株的耐药性高于非产超广谱β-内酰胺酶菌株。结论该院中段尿标本分离的病原菌以大肠埃希菌为主，分离菌株对常用抗菌药物耐药严重。

尿培养； 病原菌； 耐药性； 抗药性，微生物； 合理用药

尿路感染是临床上常见的泌尿系统感染性疾病之一，与男性相比，女性更容易患泌尿系统感染。文献[1-2]报道，约40%～50%的女性一生中至少患1次泌尿系统感染，随着年龄的增长，不管是男性还是女性，患泌尿系统感染的概率都在增高。中段尿培养是诊断泌尿系统感染的重要手段[3]。为了解泌尿系统感染病原菌的种类、分布及其耐药性，回顾性分析本院2012年10月1日—2015年9月30日送检中段尿标本分离的病原菌及其耐药性，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 本院2012年10月1日—2015年9月30日1 501份临床送检的中段尿标本分离的病原菌，去除同一患者的重复菌株。

1.1.2 试剂与仪器 MicroScan WalkAway 96 PLUS全自动细菌分析仪和其配套的NC50和PC33鉴定药敏卡，法国生物梅里埃公司的API板条。

1.1.3 质控菌株 金黄色葡萄球菌ATCC 25923，粪肠球菌ATCC 29213，大肠埃希菌ATCC 25922，肺炎克雷伯菌ATCC 700603，铜绿假单胞菌ATCC 27853。

1.2 方法

1.2.1 标本采集和培养 标本的采集与培养参照第3版《全国临床检验操作规程》进行。

1.2.2 菌株鉴定和药敏试验 中段尿培养的阳性标准：以革兰阴性菌菌落数≥105CFU/mL、革兰阳性菌菌落数≥104CFU/mL。培养阳性的标本再采用MicroScan WalkAway 96 PLUS全自动细菌分析仪和其配套的NC50和PC33鉴定药敏卡进行细菌鉴定和药敏试验。所有菌株的药敏结果均根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)2012判断标准[4]进行判断。药敏结果中的中介归入耐药。真菌鉴定采用梅里埃API板条进行鉴定。

1.2.3 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测 MicroScan WalkAway 96 PLUS全自动细菌分析仪根据药敏结果自动判断产ESBLs。

1.3 统计方法 应用WHONET 5.6软件对药敏结果进行统计分析。

2 结果

2.1 病原菌分布 2012年10月1日—2015年9月30日该院共送检中段尿标本1 501份，分离病原菌658株。其中革兰阳性菌151株，占22.95%；革兰阴性菌456株，占69.30%；真菌51株，占7.75%。见表1。

2.2 主要革兰阳性菌的耐药情况 56株CNS中检出耐甲氧西林CNS (MRCNS)45株，占80.36%。其中主要的革兰阳性球菌对抗菌药物的药敏结果见表2。

2.3 主要革兰阴性菌的耐药情况 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率分别为52.84%、41.67%和33.33%。上述产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药率见表3，其余革兰阴性杆菌的具体药敏结果见表4。

表1 临床1 501份中段尿标本分离病原菌及构成

表2 主要革兰阳性菌对抗菌药物的药敏结果(%)

/：未检测

表3 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药率(%)

-：天然耐药

表4 其他革兰阴性杆菌对抗菌药物的药敏结果(%)

-：天然耐药；/：未检测

3 讨论

医院检验科2012年10月1日—2015年9月30日共收到中段尿培养标本1 501份，检出病原菌658株，阳性率43.84%，高于蔡辉等[5]的报道。该医院3年中分离的病原菌以革兰阴性菌为主，占69.30%，病原菌以大肠埃希菌(45.44%)为主，其次为肺炎克雷伯菌和变形杆菌属细菌；革兰阳性菌中以肠球菌属(10.18%)和CNS(8.51%)为主，其中肠球菌属中以粪肠球菌(5.01%)和屎肠球菌(4.56%)为主；真菌以白假丝酵母菌(4.56%)为主。此结果与国内外有关文献[5-8]报道一致。

本组调查结果显示，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检出率分别为52.84%和41.67%，低于国内的有关报道[6,9]。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的非产ESBLs株对碳青霉烯类抗生素的耐药率高于产ESBLs株，可能与非产ESBLs株的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的碳青霉烯酶有关。在非产ESBLs株中分别检出产碳青霉烯酶的大肠埃希菌2株和产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌3株。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产ESBLs株对除碳青霉烯类抗生素以外的其他监测药物的耐药率均高于非产ESBLs株。产ESBLs的大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素耐药率<5.00%，对含β-内酰胺酶抑制剂的抗生素哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为 6.33%，对氨基糖苷类抗生素阿米卡星的耐药率也为6.33%，而对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类和氨曲南的耐药率>70%，所以临床治疗过程中对于产ESBLs大肠埃希菌的泌尿系统感染患者可以选择含β-内酰胺酶抑制剂的抗生素。非产ESBLs大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率<3.00%，对含β-内酰胺酶抑制剂的抗生素哌拉西林/他唑巴坦的耐药率仅为1.42%，对头孢菌素类的耐药率均<15%，对氨曲南的耐药率为8.51%，对喹诺酮类抗菌药物的耐药率>30%，所以临床治疗过程中对于非产ESBLs大肠埃希菌的泌尿系统感染患者选择第二、三代头孢菌素可以取得很好的治疗效果。值得注意的是，本组大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药率较高，可能与临床医生常经验性选择喹诺酮类抗菌药物治疗泌尿系统感染，产生耐药性有关。因此，临床医生在经验性选择抗菌药物时应避免选择喹诺酮抗菌药物。产ESBLs肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率为5.00%，对含β-内酰胺酶抑制剂的抗生素哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为20.00%，对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、复方磺胺甲口恶唑和氨曲南耐药率较高；非产ESBLs株对碳青霉烯类药物的耐药率为10.71%，对β-内酰胺酶抑制剂的抗生素哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为14.29%，对除青霉素类外监测抗菌药物的耐药率均<36.00%。其余肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素较敏感。非发酵菌中，以铜绿假单胞菌和不动杆菌属细菌检出为主，铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素最敏感，敏感率为91.67%；而不动杆菌属细菌对常用抗菌药物耐药率较高，非发酵菌中多重耐药菌检出率较高，应引起临床医生的重视。

本院中段尿培养的革兰阳性菌以肠球菌属和CNS为主。肠球菌属和CNS对呋喃妥因、万古霉素和利奈唑胺的敏感率最高，仅检出4株呋喃妥因耐药的屎肠球菌和1株万古霉素耐药的粪肠球菌。屎肠球菌对高浓度庆大霉素的耐药率>65%，提示有>60%的屎肠球菌对庆大霉素联合氨苄西林无协同作用。由于呋喃妥因价格便宜且肠球菌对其敏感性较高，临床发现泌尿系统感染肠球菌时经验性用药首选呋喃妥因。随着抗菌药物的广泛应用及各种侵入性治疗的广泛开展，一般认为由非致病性CNS引起的医院感染明显增多，且存在较高比例的多重耐药。本组监测结果显示，CNS中MRCNS的检出率为80.36%，高于有关文献[10]报道。CNS对利奈唑胺和万古霉素均敏感，对奎奴普丁/达福普汀和利福平较敏感。目前，真菌引起的泌尿系统感染也越来越多，本组调查结果显示，由真菌引起的泌尿系统感染占7.75%。

综上所述，泌尿系统感染的致病菌以革兰阴性菌为主，尤其是大肠埃希菌，且存在多重耐药性，临床应重视病原学检查，根据药敏结果选择抗菌药物，从而提高治疗的效果。

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(本文编辑：孟秀娟)

Distribution and antimicrobial resistance of pathogens isolated from 1 501 urine specimens

( The First People’s Hospital of Chuzhou, Chuzhou 239000, China)

10.3969/j.issn.1671-9638.2016.12.018

2016-03-20

谢强(1982-)，男(汉族)，安徽省滁州市人，检验师，主要从事细菌耐药研究。

谢强 E-mail:xieqiang0912@163.com

R969.3

B

1671-9638(2016)12-0968-04