5种中草药提取物对菇蝇的毒杀活性

王谦，史聪颖，张正，黄紫飘，宋倩

(河北大学生命科学学院食药用真菌研究所,河北保定 071002)



5种中草药提取物对菇蝇的毒杀活性

王谦，史聪颖，张正，黄紫飘，宋倩

(河北大学生命科学学院食药用真菌研究所,河北保定 071002)

采用药膜法，以清水为阴性对照，测定了5种中草药提取物对菇蝇的毒杀活性，结果显示：在供试的5个浓度下，百部和苦参对菇蝇的毒杀活性显著，在50 mg/mL质量浓度下，处理12 h后，百部、苦参对菇蝇的毒杀活性分别是85.00%和81.67%，处理24 h，均达到了100.00%.川楝子、龙胆草、透骨草次之.通过LC50的测定，结果显示，百部、苦参24 h毒杀LC50分别是13.790 mg/mL和18.668 mg/mL.田间防效试验表明：百部和苦参提取物对菇蝇具有良好的药效，用药3天的防效分别达到73.66%和71.27%，用药7天后维持在75.00 %左右，与清水对照相比防效显著.建议在生产中轮流使用50 mg/mL的百部提取物和75 mg/mL的苦参提取物，在菇蝇发生初期及时喷雾防治.

中草药；菇蝇；毒杀活性

在食用菌栽培过程中，菇蝇经常发生[1-2]，其携带大量的病毒和病菌，在培养料或菇体上取食或产卵时，会传播病毒病菌，病害侵染基质和菇体，从而造成多种病虫害交叉感染，影响了产量[3-4].为了提高产量,增加收益，大部分菇农通过农药来抑制虫害的发生[5-6],其中包括国家已经明令禁止使用的农药如艾氏剂、狄氏剂、毒杀酚等.这些农药属于有机氯农药和杀虫剂，分解慢，极易在环境和食品中残留，不仅影响人体健康，还影响外贸出口[7-8].因此，通过研究植物源材料[9-13]开发出环境友好型农药以提高生态效应成为热点.为此，进行了5种中草药提取物对菇蝇的毒杀活性研究，以期对食用菌生产中菇蝇的防治工作起到一定的技术支撑作用.

1 实验材料

1.1 昆虫

菇蝇，由河北大学食药用真菌研究所实验教学基地提供.

1.2 材料

百部、透骨草、龙胆草、川楝子、苦参(市购)，详见表1.

表1 实验植物样品名录

2 实验方法

2.1 中草药提取物的制备

将一定量的中草药干品用10倍体积的水浸提，煮沸后采用文火继续浸提15 min，过滤，收集滤液.将滤渣用8倍体积的水再次浸提，过滤收集滤液[14-16].合并2次过滤所得滤液，浓缩得到1 g/mL中草药提取溶液，置于4 ℃低温环境保存，备用.

2.2 中草药提取物对菇蝇毒杀活性的观察

菇蝇被有活性的化合物处理后，表现出中毒反应.其具体表现为：首先活动频率增大增强；接着活动力减弱，漂浮于水面不动，对针触反应敏捷；随后显示活力不足，幼虫沉于水底，对针触反应迟钝；最后幼虫躯体颜色发黑，身体萎缩，沉于水底不动，对针触无反应，即死亡[17-18].

2.3 活性初筛 (药膜法)

采用药膜法[19]，在50 mL锥形瓶中加入5 mL稀释好的药液，迅速滚动形成均匀的药膜，将剩下的药液倒出.在出菇大棚内，用捕虫网随机捕虫，挑选20只形状体重接近的菇蝇，放在盛有不同处理液的器皿内，以清水做对照，每处理各重复3次，分别于12 h和24 h后观察并记录试虫的状态和死亡数，并计算试虫的死亡率.

2.4 LC50的测定

依据初筛实验结果，选择活性较高的中草药进行LC50的测定[20].应用SPSS 19.0对杀虫活性的实验数据进行毒力回归分析，求得LC50等值.如果测试组的空白死亡率<5%，则实验组死亡率不进行校正；如果测试组的空白死亡率>5%，则采用 Abbott 公式对各实验组死亡率进行校正.

试虫的死亡率和校正死亡率按照下列公式进行计算：

死亡率 =(死亡虫数/总虫数)×100%[21],

校正死亡率 =(处理死亡率-对照死亡率)/(1-对照死亡率)×100%[21].

2.5 田间药效试验

田间药效试验在河北大学食药用真菌研究所实验教学基地平菇出菇棚进行.对初筛筛选出的药剂进行田间药效试验.每种药剂选择 1 个田间推荐剂量，另设清水为空白对照.小区面积(5 m ×4 m)，每处理重复4次.分别将各药剂对水搅拌均匀，用工农16-型背负式手动喷雾器进行均匀喷雾1次.药前采用5点取样法进行取样，每点选取2个平菇菌袋，做上标记，调查记录活菇蝇虫数，作为虫口基数，药后 3、7、10天统计标记菌袋菇蝇数量.计算虫口减退率和校正防效.

虫口减退率 = (施药前虫数-施药后虫数)/施药前虫数×100%[22]，

校正防效 =(处理区虫口减退率-对照区虫口减退率)/(1-对照区虫口减退率)×100%[22].

3 结果与分析

3.1 5种中草药提取液对菇蝇的毒杀作用

采用药膜法测定5种中草药提取物对菇蝇的毒杀活性，具体情况如下.

表2是百部提取液对菇蝇的杀虫活性结果.由表2可知，不同质量浓度的百部对菇蝇均具有杀虫活性，随着质量浓度的升高杀虫活性增强，且随着时间的延长也增强.处理12 h后，质量浓度在100 mg/mL 下试虫就全部死亡，杀虫活性达到了100.00%；50 mg/mL下，杀虫活性为85.00%，但是处理24 h后试虫全部死亡，杀虫活性达到了100.00%.综上所述，在供试质量浓度内，用50 mg/mL的百部提取液处理菇蝇24 h，杀虫活性即可达到100.00%.

由表3可知，在供试质量浓度内，用50 mg/mL的苦参提取液处理菇蝇24 h，杀虫活性即可达到100.00%.

表2 百部提取液的杀虫活性

表中数据均为3次重复的平均值.

表3 苦参提取液的杀虫活性

表中数据均为3次重复的平均值.

同上，由表4可知，在供试质量浓度内,用75 mg/mL的川楝子提取液处理菇蝇24 h，杀虫活性即可达到100.00%.

由表5可知，在供试质量浓度内,用75 mg/mL的龙胆草提取液处理菇蝇24 h，杀虫活性即可达到100.00%.

表4 川楝子提取液的杀虫活性

表中数据均为3次重复的平均值.

表5 龙胆草提取液的杀虫活性

表中数据均为3次重复的平均值.

同上，由表6可知，在供试质量浓度内,用100 mg/mL的透骨草提取液处理菇蝇24 h，杀虫活性即可达到100.00%.

表6 透骨草提取液的杀虫活性

表中数据均为3次重复的平均值.

综上所述，在供试的5个质量浓度下，百部和苦参对菇蝇的毒杀活性显著，在50 mg/mL下，处理12 h后，百部、苦参对菇蝇的毒杀活性分别是85.00%、81.67%，处理24 h，均达到了100.00%.川楝子、龙胆草、透骨草次之.

3.2 百部、苦参提取物对菇蝇的毒力测定

测定百部、苦参24 h对菇蝇的LC50，结果见表7.由表7可以看出，百部对菇蝇具有较高的杀虫活性，24 h的LC50为13.790 mg/mL，苦参的为18.668 mg/mL.

表7 百部、苦参提取物对菇蝇24 h 的毒力

3.3 田间防治效果

在平菇菇蝇发生期，将百部、苦参提取物按设计剂量兑水喷施平菇出菇袋，喷药后于不同天数进行调查，结果经整理、计算，列于表8.

表8 百部、苦参提取物防治菇蝇田间药效试验结果

由表8可以看出，50 mg/mL的百部提取物在药后3、7、10天的虫口减退率分别是70.43%、76.81%、57.89%，校正防效分别是73.66%、78.95%、63.05%；75 mg/mL的苦参提取物在药后3、7、10天的虫口减退率分别是67.74%、70.32%、56.35%，校正防效分别是71.27%、73.06%、61.70%；百部提取物的防效均高于苦参提取物.但是二者在药后10天均出现了防效降低的现象.与清水对照相对比，百部、苦参对菇蝇均有较强的防效.

4 结论

不同中草药对菇蝇的毒杀作用不同，随着质量浓度的增大毒杀作用增强.本实验报道了应用中草药对菇蝇进行防治的研究.结果表明：在药膜法测定中，百部、苦参对菇蝇的毒杀活性最高，24 h毒杀LC50分别是13.790 mg/mL和18.668 mg/mL.川楝子、龙胆草、透骨草次之.

田间防效试验表明：百部和苦参提取物对菇蝇具有良好的药效，用药3天的防效分别达到73.66%和71.27%，用药7天后维持在75.00%左右，与清水对照相比防效显著.建议在生产中使用50 mg/mL的百部提取物和75 mg/mL的苦参提取物，在菇蝇发生初期及时喷雾防治.为避免长期使用一种药物使菇蝇产生抗药性，因此建议百部和苦参轮流使用.

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(责任编辑：赵藏赏)

Insecticidal acticity of the botanical extracts from 5 Chinese herbs against phorid flies

WANG Qian,SHI Congying,ZHANG Zheng,HUANG Zipiao,SONG Qian

(Institute of Edible and Medicinal Fungi,College of Life Science,Hebei University,Baoding 071002,China)

Using the residue method,with water as the negative control,we measured the insecticidal acticity of the botanical extracts from 5 Chinese herbs against phorid flies.The results showed that in the selected five concentrations,the insecticidal activity ofStemonajaponicaandSophoraflavescensis significant,under 50 mg/mL mass concentration,12 h after treatment,the insecticidal activity were 85.00%,81.67%,after 24 h,reached 100.00%.Meliatoosendan、Gentianascabra,Phrymaleptostachya,take second place.Through LC50determination,the results showed that the 24 h LC50ofSt.japonicaandSo.flavescenswere 13.790 mg/mL and 18.668 mg/mL.Field control effect test showed that the extract ofSt.japonicaandSo.flavescenshas good efficacy against phorid flies,the control effect is 73.66% and 71.27% after three days,around 75.00% after 7 days,compared with clear water control.We recommend in production to use 50 mg/mLSt.japonicaand 75 mg/mLSo.flavescensalternatively, at the beginning of the phorid flies season.

Chinese herbs; phorid flies; insecticidal acticity

10.3969/j.issn.1000-1565.2016.06.011

2016-04-25

河北省现代农业产业技术体系食用菌创新团队项目

王谦(1962-)，男，北京人，河北大学研究员，主要从事食药用真菌研究与开发工作.E-mail:wq6203_cn@126.com

Q93-335

A

1000-1565(2016)06-0635-06