超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定水产品中氯霉素类药物残留

超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定水产品中氯霉素类药物残留

陈 杰 天津市东丽区产品质量监督检验所

氯霉素具有广谱抗菌能力，被广泛应用于动物养殖业中。但氯霉素类药物用于食用性动物易导致在动物源性食品中残留量超标，可引起人体再生障碍性贫血和溶血性贫血等，对人体产生严重危害，因此引起国内外的广泛重视。目前，大多数国家已严格限制其使用，并对食品中氯霉素类药物的最高残留量（MRL）进行了规定。

本文对国家标准《可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》（GB/T 20756-2006）和仪器自带的方法进行比较分析，以期为提高水产品检验质量，保障水产品安全性提供参考。结果表明，两种方法检测结果差异无统计学意义（P＞0.05），线性相关密切。仪器自带方法检测具有易操作，省时省力的优点，可在对水产品中氯霉素类药物残留检测中加以推广应用，样品加标回收率为81.5%～105.5%。

实验部分

实验材料和设备

实验材料：选取天津市市售水产品进行加标实验。

实验仪器：超高效液相色谱仪于三重四极杆质谱仪，具体配置为输液泵，在线脱气机，自动进样器，柱温箱，系统控制器等。

水产品中氯霉素的液相色谱条件

分析仪器：LC-30A 系统；色谱柱：Shimadzu Shim-pack XR-ODSⅢ 2.0 mmI.D.×50 mmL.，1.6 μm；流动相：A为水，B为乙腈；流速：0.4 mL/ min；进样体积：10μL；柱温：40 ℃；洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为30%，时间程序见表1。

样品制备

标准溶液配制：用甲醇配制10 mg/L的氯霉素混合标准中间溶液，用甲醇-水溶液（V/V，50∶50）稀释成0.2、0.5、1、5、10、50 μg/L和100 μg/L不同浓度的混合标准工作液。

样品前处理：称取5.00 g试样至50 mL离心管中，加入25 mL乙酸乙酯，在均质器中以14 000 r/min均质30 s，以4 000 r/min离心5 min，上层乙酸乙酯提取液收集于50 mL平底烧瓶中，残渣加入20 mL乙酸乙酯，重复上述操作，合并提取液；45 ℃减压旋转浓缩至干，残留物用1 mL甲醇-水溶液（V/ V，50∶50）溶解，再加3.0 mL正己烷混合，并转移至10 mL比色管中，涡动混合30 s；以4 000 r/min离心2 min，弃去上层正己烷，移取下层，经0.22 μm微孔滤膜过滤后，用液质分析。

结果分析

线性关系

将浓度为0.2、0.5、1、5、10、50μg/L和100 μg/L氯霉素标准工作液，按1.2中的分析条件进行测定，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，外标法制作校准曲线，如图1所示，氯霉素线性良好。线性方程、线性范围和相关系数见表2。国家标准法氯霉素线性如图2所示。

图1 仪器自带方法氯霉素的标准工作曲线

图2 国家标准法氯霉素的标准工作曲线

基质加标实验

按1.3中样品制备方法，样品中添加混合标样，加标含量见表2，各平行4次。测试结果显示，水产品加标回收率在81.5%～105.5%，见表2。

表2 加标样的回收率结果（n=4）

结论

使用仪器自带方法和国家标准法对氯霉素药物残留进行检测，两种方法的线性良好相关系数均大于0.999。基质加标回收率在81.5%～105.5%。根据统计分析表明，二者线性关系极为显著，并无明显差异且符合良好。二者在检测结果上并无实质差异。表现的一致性较好。两种方法的其他指标对比显示，前者的易操性、劳动强度、计数准确度及计数时长均优于国家标准检测法，因此值得被广泛应用于实际检测中。