细胞侵袭相关IL—8及IL—18在骨肉瘤患者血清水平及其临床意义

2017-01-05 14:43黄可廖品琥谢克恭卢贤哲
右江医学 2016年4期

黄可++廖品琥++谢克恭++卢贤哲++陆潞++王俊利++韦叶生++唐毓金

【摘要】目的研究血清IL8及IL18水平在骨肉瘤患者与健康体检者之间的差异及临床意义。

方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测160例骨肉瘤患者及250例健康体检者的外周血血清IL8及IL18水平,比较两组间IL8、IL18水平的差异及它们之间的相关性,探讨血清IL8及IL18水平与骨肉瘤发病及进展的关系。

结果骨肉瘤患者组血清IL8水平较健康对照组升高(P<0.01 ),血清IL18水平较健康对照组降低(P<0.01)。在骨肉瘤患者组中,未发生远行转移的患者其血清IL8水平低于已发生转移患者(P<0.05),未发生远行转移的患者其血清IL18水平高于已发生转移患者(P<0.05)。AJCC分期中Ⅰ~Ⅱ期的低度恶性肿瘤相对于Ⅲ期同一骨断不连续的肿瘤、Ⅳ期伴有血源性肺转移以及远行转移肿瘤其血清IL8水平均较低(P<0.01),Ⅲ期较Ⅳ期伴有血源性肺转移以及远行转移肿瘤其血清IL8水平略高,但差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ~Ⅱ期患者较Ⅲ、Ⅳ期患者血清IL18水平均较高(P<0.01),Ⅲ期较Ⅳ期伴有血源性肺转移以及远行转移肿瘤其血清IL18水平较高(P<0.05)。

结论血清IL8水平升高、IL18水平下降可能与骨肉瘤发生、进展、转移有关,其作用可能表现为促进骨肉瘤细胞的增生和转移,两者有可能成为判断骨肉瘤的进展和预后的指标。

【关键词】骨肉瘤;白细胞介素8;白细胞介素18

骨肉瘤(osteosarcoma)是最常见的恶性骨肿瘤,好发于青少年,多发于骨干骺端,其早期即可发生远处转移。白细胞介素是一种由白细胞分泌的调节细胞生长分化的细胞因子,在调节机体免疫应答、损伤修复中起重要作用。近年来发现各种白细胞介素在直肠癌、乳腺癌、宫颈癌、胃癌等多种恶性肿瘤组织中高表达,并与肿瘤的血管生成、转移、复发等恶性行为密切相关[1~4]。而不同家族白细胞介素对肿瘤细胞的生长、转移作用也不相同,甚至相反。白介素8(interleukin8,IL8)可促进肿瘤血管新生和浸润转移,通过 JNK/SAPK 信号通路调控MMP2 蛋白的表达,促进肺腺癌A549细胞的转移[5]。IL18可通过诱导T、NK等细胞产生干扰素γ(IFNγ),增强NK细胞和CTL的活性,促进T细胞增殖,以调节机体的免疫监视功能[6~7],杀伤肿瘤细胞。本研究通过检测骨肉瘤患者血清IL8、IL18水平,探讨其与骨肉瘤的关系。

1对象与方法

1.1研究对象

选取2005年~2013年右江民族医学院附属医院收治的骨肉瘤患者160例作为病例组,并最终有明确病理诊断确诊为骨肉瘤的患者。男105例,女55例,年龄(27.88±8.26)岁。所有患者均排除家族肿瘤病史及自身免疫性疾病病史,且入院前未经抗肿瘤治疗,未服用皮质类固醇激素、阿霉素以及有可能影响机体免疫功能的非甾体类抗炎药物。随机选取同时期到我院进行健康体检的250名体检健康者作为对照组,排除了家族性肿瘤病史、遗传史或其他严重疾病史。男155例,女95例,年龄(27.53±7.35)岁。本研究经右江民族医学院附属医院伦理委员会批准。两组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2主要试剂仪器

血清IL8及IL18试剂盒(武汉华美生物工程有限公司);全自动酶标仪(美国雷杜公司)。

1.3血清IL8及IL18检测

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附剂测定 (ELISA)分别检测血清IL8及IL18含量。

1.4统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,两组间比较采用两独立样本均数t检验,三组均数的比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用q检验(NewmanKeuls法),检验水准:α=0.05。

2结果

2.1病例组与健康对照组IL8及IL18水平的比较

骨肉瘤组血清IL8水平较健康对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01 )。骨肉瘤组患者血清IL18水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

2.2病例组是否发生转移患者的IL8及IL18水平比较

在骨肉瘤组患者中,未发生远行转移的患者其血清IL8水平低于已发生转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);未发生远行转移的患者其血清IL18水平高于已发生转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3病例组患者骨肿瘤AJCC分期的IL8及IL18水平比较

AJCC分期中Ⅰ~Ⅱ期的低度恶性肿瘤相对于Ⅲ期同一骨断不连续的肿瘤、Ⅳ期伴有血源性肺转移以及远行转移肿瘤其血清IL8水平均较低,差异均有统计学意义(P<0.01),Ⅲ期较Ⅳ期伴有血源性肺转移以及远行转移肿瘤其血清IL8水平略高,但差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ~Ⅱ期患者较Ⅲ、Ⅳ期患者血清IL18水平均较高,差异有统计学意义(P<0.01),Ⅲ期较Ⅳ期伴有血源性肺转移以及远行转移肿瘤其血清IL18水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

3讨论

骨肉瘤多发生于青少年,恶性程度相对较高,严重危害青少年的身体健康。 随着抗肿瘤药物的应用,目前骨肉瘤患者术后5年生存率已明显提高。但由于肿瘤细胞的迅速发展及耐药性的产生,骨肉瘤治疗失败病例数逐年增加。为此,进一步探讨骨肉瘤发生的分子机制势在必行。早期探讨与骨肉瘤发生、发展相关的基因可能包括:Bcl2家族、Fas/FasL家族、Caspases家族以及P53家族等[4]。近年来,白细胞介素家族在骨肉瘤发生、发展、转移过程中的作用越来越受学者们的关注。本研究发现,IL8、IL18在骨肉瘤患者血清水平中呈相反的发展趋势,说明两者对骨肉瘤的作用可能表现为相互抑制或拮抗可能,作用相反。

IL8是一种多功能的趋化因子, 能够促进炎症反应的进程,对中性粒细胞有诱导趋化作用[6]。其在介导内皮细胞的迁移和增生,促进细胞分裂及肿瘤新生血管的形成,并在肿瘤发生、复发及转移中发挥着重要作用[9~12]。本研究发现骨肉瘤患者血清 IL8水平较健康对照组患者显著升高,且对于已经发生血源性转移的患者其血清IL8水平明显高于未发生转移患者;Ⅲ期多发性肿瘤、Ⅳ期伴有远行转移肿瘤其血清IL8水平也显著高于Ⅰ、Ⅱ期患者,说明IL8与骨肉瘤的发生、发展的过程密切相关,其作用可能表现为促进骨肉瘤细胞的增生和转移。刘涛等人[13]对30例骨肉瘤标本进行免疫组化检测,28例为IL8阳性(93.3%),其中强阳性者25例(83.3%);在负荷原位灶中表达量明显增加。此也进一步证实IL8可直接促进骨肉瘤细胞的增殖和转移。

IL18属于IL1配体家族,其结构与IL1蛋白家族相似,它可诱导T、NK等细胞产生干扰素(IFN),通过增强Thl细胞产生Thl类细胞因子、促进T细胞表面Fas配体的表达和增强Fas介导的细胞毒等作用,提高Thl免疫应答,以调节机体的免疫监视功能[6],并在抗肿瘤血管生成中起重要作用[14~15]。IL18基因多态性可能与恶性肿瘤的发生有密切关系[16]。IL18表达下降可能与免疫细胞功能受损、免疫功能失调密切相关,从而增加肿瘤易感性。本实验研究发现,在外周血中的IL18在健康对照组的水平明显高于骨肉瘤组(P<0.05)。表明血清IL18的水平高低与机体抵抗肿瘤的能力变化方向是一致的。对于合并血源性肺转移患者其血清IL18水平较未发生转移患者低,且Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者血清IL18水平均较低度恶性的Ⅰ期患者低,说明骨肉瘤的转移可能与IL18表达下调或其抗肿瘤的分子信息传导途径异常有关。Naoko Yamada等通过对骨肉瘤肺转移小鼠模型进行化疗和免疫治疗发现,IL18可显著抑制骨肉瘤发生肺部转移,当联合异环磷酰胺时其对骨肉瘤肺转移的抑制作用更大[17]。查翔远等[18]研究发现,内源性抑制物IL18结合蛋白可能通过上调VEGF的表达促进肝细胞癌血管形成。此二者均从另一个相反方向进一步证明此观点,因此可以认为血清IL18的水平高低在一定程度上可能与骨肉瘤的预后有关,对判断骨肉瘤的预后可能有帮助。

综上所述,IL8、IL18表达水平的检测可能为骨肉瘤预防、诊断以及预后的判断提供重要依据。但由于IL8、IL18在骨肉瘤患者血清表达恰恰相反,两者对骨肉瘤疾病的发生、发展及转移的过程中起相反作用,甚至存在相互拮抗可能,其可能相互机制仍需进一步探讨。

参考文献

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(收稿日期:2016-05-18修回日期:2016-08-18)

(编辑:梁明佩)