呋喃西林和呋喃唑酮在海参组织中的代谢消除规律

付树林，邢丽红，孙伟红，李兆新, 郑关超，翟毓秀,郭江涛

(中国水产科学研究院黄海水产研究所；国家水产品质量监督检验中心：山东 青岛 266071)

呋喃西林和呋喃唑酮在海参组织中的代谢消除规律

付树林，邢丽红*，孙伟红，李兆新, 郑关超，翟毓秀,郭江涛

(中国水产科学研究院黄海水产研究所；国家水产品质量监督检验中心：山东 青岛 266071)

采用呋喃西林或呋喃唑酮单药给药及两种药物混合给药的方式，研究其代谢物氨基脲(Semicarbazide，SEM)和3-氨基-2-恶唑烷基酮(3-amino-2-oxazolidinone，AOZ)在海参组织中的代谢消除规律。结果表明，SEM和AOZ具有相似的代谢规律，初始阶段具有较高的消除速率，随后消除速率趋于平缓，并在较长时间内维持一定的浓度。在停药225 d后，海参组织中仍然能够检出SEM、AOZ，表明SEM和AOZ在海参组织中较难消除。总体上海参内脏中SEM及AOZ消除速率快于体壁，单独给药方式下的消除速率快于混合给药。单独给药方式下，体壁及内脏中SEM消除半衰期分别为34.8和38.3 d，AOZ消除半衰期分别为52.9和38.7 d；混合给药方式下，体壁及内脏中SEM消除半衰期分别为47.5和35.4 d，AOZ消除半衰期分别为59.2和54.6 d。根据上述结果，预测在海参上市前一年使用呋喃西林和呋喃唑酮，到市场环节仍然有很大可能检出SEM及AOZ。研究结果表明，加强海参苗种及养殖中期硝基呋喃类药物的监管有利于保障市售海参质量安全水平。[中国渔业质量与标准，2016,6(1):36-44]

海参；呋喃西林；呋喃唑酮；氨基脲；3-氨基-2-恶唑烷基酮；消除

硝基呋喃类药物是人工合成的具有5-硝基呋喃基本结构的一类广谱抗菌药物，因其效果优异、药效稳定、价格低廉，曾广泛用于畜牧及水产养殖中细菌性疾病的防治，常用呋喃类药物有呋喃唑酮(furazolidone，FZD)、呋喃西林(nitrofurazone，NFZ)、呋喃妥因(nitrofurantion，NFT)和呋喃它酮(furaltadone，FTD)。研究表明，硝基呋喃类药物代谢快速，在生物体内消除时间短，然而其代谢物3-氨基-2-恶唑烷基酮(3-amino-2-oxazolidone，AOZ)、氨基脲(semicarbazide，SEM)、1-氨基-2-内酰脲(1-aminohydantoin，AHD)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-恶唑烷基酮(5-morpholinomethyl-3-amino-2-oxazolidone, AMOZ)等能在生物体内与细胞膜蛋白结合形成稳定的结合态而长期存在。硝基呋喃类药物原药及其在生物体内残留的代谢物，具有一定毒性，可使实验动物发生癌变和基因突变。出于安全性考虑，欧盟、美国等发达国家和地区[1-2]及中国[3]先后颁布了禁止使用该类兽药的禁令。根据近年风险隐患排查结果，硝基呋喃类药物在水产品生产、运输及加工销售环节中仍偶有检出[4-5]。

关于呋喃西林、呋喃唑酮在大菱鲆[6]、栉孔扇贝[7]、牙鲆[8]、南美白对虾[9]、斑点叉尾鮰[10]等水产品组织中药物代谢动力学研究已有报道。海参是中国重要的经济型养殖水产品种，在养殖过程中有时会发生疾病，养殖者为控制疾病发生，可能会使用抗生素等化学药物进行预防和治疗。目前对海参进行的多次质量安全普查、苗种抽查发现，硝基呋喃类代谢物时有检出，特别是在海参苗种和市售产品中[11-12]。由于海参的生长期(3～5年)和硝基呋喃类代谢产物的代谢周期很长，导致相关研究不系统，基础数据缺乏，无法准确判断市场环节检出的硝基呋喃类代谢物的来源途径，影响开展风险评估及实施科学监督。

本研究以一年后可上市销售的海参苗种为研究对象，系统开展了海参中硝基呋喃类药物残留规律模拟实验研究，探讨了呋喃西林、呋喃唑酮两种药物在不同给药方式下，其分别对应的代谢产物SEM、AOZ在不同海参组织中的代谢残留规律，以期为开展水产品质量安全风险评估和实施科学监管提供科学的数据支持，为其他禁用药物的研究提供参考，进而推动海参养殖业健康发展，保障消费者身体健康。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

呋喃西林原药、呋喃唑酮原药(由国家水产品质量监督检验中心提供)；SEM、AOZ标准品(Sigma公司)；SEM·HCl-13C-15N2、AOZ-D4(Sigma公司)。

甲醇、乙酸乙酯(色谱纯，Merck公司)，甲酸(色谱纯，CNW公司)，乙腈、乙酸铵(色谱纯，Sigma公司)，2-硝基苯甲醛、二甲基亚砜(Sigma公司)，盐酸、磷酸二氢钾(优级纯，国药集团)，MCX混合阳离子交换柱(美国Waters公司)。

1.2 仪器设备

QTRAP 5500 液相色谱-串联质谱仪(AB SCIEX)，Waters 2695 超高效液相色谱仪(美国Waters公司)，旋转蒸发仪(瑞士Buchi公司)，CR 22G 冷冻离心机(日立)，小型高速离心机(Sigma)，KQ-600DE超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，涡旋混合器(TALBOYS)，IS-RDS3恒温振荡器(美国精骐有限公司)，氮吹仪(Organomation 公司)，Gradient A10 Mill-Q超纯水器(Millipore)。

1.3 实验动物

2014年11月至2015年8月，养殖实验在青岛市即墨鳌山卫进行，环鳌山湾有较多海参养殖户，水文、气候条件适于海参养殖。取一年后可上市的健康海参苗种在实验池内暂养1个月，使其充分适应养殖环境，海参平均体长7.7 cm。实验池长8 m，宽2 m，水深1 m。实验前检测海参体内无SEM、AOZ残留，实验过程中所投喂饲料按照农业部1486号公告-8-2010[13]测定未检出呋喃西林和呋喃唑酮。实验期间测量海水温度在14～18 ℃之间，养殖海水采用流动循环水，采水源区海水交换通畅。采集周围养殖户所养殖海参，未检出硝基呋喃原药及其代谢物。

1.4 呋喃西林、呋喃唑酮代谢动力学和残留实验给药方法

实验设置呋喃唑酮单独给药组、呋喃西林单独给药组、呋喃唑酮和呋喃西林混合给药组及1个空白对照组，每组设置1个平行。给药实验在规格为100 L养殖箱中进行。将呋喃唑酮原药、呋喃西林原药、呋喃唑酮及呋喃西林混合原药，用适量海藻泥拌均匀后分别投入养殖箱中，单药给药浓度为10 μg/mL，混合给药浓度各为10 μg/mL。每只养殖箱各放入300只个头相近、平均体长约7.7 cm、健康状况良好的海参，浸泡1 h后分别移入实验池，按照工厂化养殖模式正常养殖。

分别于药浴后的2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h(2 d)、96 h(4 d)、192 h(8 d)、288 h(12 d)、384 h(16 d)、480 h(20 d)、720 h(30 d)、960 h(40 d)、1 200 h(50 d)、1 440 h(60 d)、1 800 h(75 d)、2 160 h(90 d)、2 520 h(105 d)、2 880 h(120 d)、3 240 h(135 d)、3 600 h(150 d)、3 960 h(165 d)、4 320 h(180 d)、4 680 h(195 d)、5 040 h(210 d)、5 400 h(225 d)时间点进行连续取样；取样时从各个养殖池中随机抽取6只海参，用蒸馏水冲洗体表海水及附着物，将每只海参解剖分离体壁及内脏组织，然后将各组织充分匀浆、备用。

1.5 样品前处理

1.5.1 提取和净化

称取海参体壁(2.00±0.01)g或内脏(0.50±0.01)g样品于50mL离心管中，加入0.05 mL 100 ng/mL内标溶液混合30 s；再加入5 mL 0.2 mol/L盐酸溶液和0.15 mL 0.05 mol/L 2-硝基苯甲醛溶液，涡旋混合50 s，置于恒温振荡器中37 ℃避光振荡16 h。

取出离心管冷却至室温，加入约5 mL 1.0 mol/L 磷酸氢二钾溶液，调节pH至7.0～7.5；加入8 mL 乙酸乙酯，涡旋振荡50 s，4 000 r/min 离心5 min，取上清液置于10 mL玻璃离心管中，在40 ℃下氮气吹干，加入1 mL 5%甲醇水溶液，涡旋混合振荡溶解残余物，14 000 r/min 离心10 min，上清液过0.22 μm滤膜，待测。对于浓度较高的样品，则视情况稀释一定倍数后，上机测定。

1.5.2 标准工作曲线制作

分别准确移取10 ng/mL标准工作液0.05、0.10、0.20 mL；100 ng/mL标准工作液0.05、0.10、0.20 mL以及1 μg/mL标准工作液0.05、0.10 mL于8支50 mL离心管中，除不加样品外，操作步骤及测定同上述样品。

1.6 测定

1.6.1 色谱条件

色谱柱：Agilent XDB C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)；进样量：10 μL；柱温：40 ℃；梯度洗脱程序见表1。

表1 流动相梯度洗脱程序

Tab.1 Gradient elution program of the mobile phase

时间/minTime2mmol·L-1乙酸铵水溶液/%2mmol·L-1Ammoniumacetatesolution甲醇/%Methanol流速/(mL·min-1)Flowrate0.0090100.350.5090100.354.005950.355.505950.356.0090100.358.0090100.35

注：流动相比例为体积比。

1.6.2 质谱条件

离子化模式：大气压喷雾电离源(ESI)，正离子模式；碰撞气(CAD)：Medium；气帘气(Curtain gas)：35 psi；雾化气(Gas1)：30 psi；辅助加热气(Gas2)：30 psi；离子源温度：550 ℃；去簇电压(DP)：80 V；入口电压(EP)：60 V；碰撞室出口电压(CXP)：10 V；扫描模式：选择反应监测(MRM)，选择反应监测母离子、子离子和碰撞能量见表2。

表2 MRM模式下质谱测定的特征离子

Tab.2 Characteristic ions of mass spectrum determination in MRM mode

目标化合物Analysts母离子Parention子离子Production碰撞能量/eVCollisionenergySEM209166*1520919215SEM·HCl-13C-15N2212168*13AOZ23610415236134*29AOZ-D4240134*16

注：*表示定量碎片离子。

1.7 回收率与精密度

在海参空白基质中以0.5、1.0、10 μg/kg 3个水平添加SEM、AOZ混合标准溶液及内标混合标准溶液，按照前述方法进行添加回收实验，计算平均回收率及相对标准偏差(RSD，n=6)。

2 结果与分析

2.1 方法的色谱图、回收率和精密度

实验进行至第8天，在呋喃唑酮单独给药组、呋喃西林单独给药组、呋喃唑酮和呋喃西林混合给药组及1个空白对照组的不同给药方式下，海参体壁及内脏组织中SEM及AOZ谱图见图1。

如表3所示，在3个添加水平下，SEM和AOZ的平均回收率在89.1%～98.9%之间，相对标准偏差<10%。当分析化合物浓度高于方法的线性范围，则稀释一定倍数，使其在线性范围内。标准溶液经衍生后在0.05～100 ng/mL浓度范围内线性良好，相关系数大于0.995，该方法的最低检测限为0.5 μg/kg。

2.2 SEM在海参组织中的消除规律

以10 μg/mL的呋喃西林药液对海参进行1 h药浴，测定实验海参体壁及内脏中呋喃西林代谢物SEM的残留量，单独给药及混合给药条件下，SEM的残留量随时间变化见图2。

无论是采用呋喃西林单独给药还是与呋喃唑酮混合给药的方式，SEM在海参体壁和内脏中都表现出相似的消除规律。停药初期，SEM在海参体壁及内脏中的残留量急剧下降，随着消除时间的延长，SEM的消除速率逐渐平缓并持续较长时间，实验进行至225 d时，海参组织中SEM浓度仍高于检出限。其中，单独给药条件下，体壁中SEM残留含量为3.32 μg/kg，内脏中SEM残留含量为1.99 μg/kg；与呋喃唑酮混合给药条件下，体壁中SEM残留含量为1.39 μg/kg，内脏中SEM残留含量为1.26 μg/kg。

图1 海参组织中SEM、AOZ色谱图(8 d)Fig.1 Chromatograms of SEM and AOZ in Apostichopus japonicus tissues(8 d)

表3 SEM、AOZ在海参体内的回收率

Tab.3 Recoveries of SEM and AOZ inApostichopusjaponicus

n=6, %

图2 SEM在海参体内的药-时曲线Fig.2 The drug concentration-time curve of SEM in Aapostichopus japonicus

不同给药方式下，海参组织中SEM积累能力不同，单药给药时内脏累积的SEM浓度高于混合给药条件下SEM的浓度，体壁中积累的SEM浓度低于混合给药下浓度。不论采用单药给药还是混合给药，海参体壁及海参内脏中残留的AOZ和SEM在代谢的初始阶段都具有较高的消除速率。

2.3 AOZ在海参组织中的消除规律

由图3可知，无论采用呋喃唑酮单独给药还是与呋喃西林混合给药的方式，AOZ都表现出与SEM相似的消除规律。在实验初期AOZ的残留量急剧下降，但随着消除时间的延长，AOZ开始缓慢降低并持续较长时间。至实验进行到225 d时，AOZ在海参体壁及内脏中仍有检出。单药给药条件下体壁中AOZ残留含量为2.94 μg/kg，内脏中残留含量为2.75 μg/kg；混合给药方式下，体壁中AOZ残留含量为2.72 μg/kg，而内脏中AOZ含量至0.81 μg/kg。两种给药方式下，AOZ在海参组织中的富集能力近似相同，内脏中的代谢速率快于体壁。

图3 AOZ在海参体内的药-时曲线Fig.3 The drug concentration-time curve of AOZ inApostichopus japonicus

2.4 SEM和AOZ的消除半衰期

数据经SPSS处理，对每个时间点6个数据进行平均值和标准偏差计算，对两种药物在海参组织中的消除曲线进行拟合，判断是否符合公式(1)。

C(t)=C0e-at

式(1)

其中C(t)表示在时间t的质量分数(μg/kg)，C0表示消除对数曲线y轴截距，a为消除速率参数。消除半衰期见式2。

t1/2=0.693/a

式(2)

表4为不同给药方式下，消除曲线拟合后海参组织中SEM和AOZ消除半衰期(t1/2)。

由表4可知，消除曲线拟合后所得海参组织中SEM和AOZ的消除半衰期因给药方式及组织的不同而呈现差异。总体上体壁中药物的半衰期略长于内脏组织，如单独给药时体壁中SEM的半衰期为34.8 d，而同样条件下内脏中SEM的t1/2为38.3 d。SEM在海参体内的代谢速率快于AOZ，同样单独给药情况下，体壁中AOZ的消除半衰期为52.9 d，而SEM在体壁中的代谢半衰期为34.8 d，差异比较明显。结果还表明，不同给药方式对两种药物的t1/2有显著影响，混合给药方式下SEM及AOZ的消除半衰期长于单独给药方式。

2.5 消除半衰期与最终残留浓度的关系

分析消除半衰期及药物最终残留浓度，发现单独给药时体壁中SEM的富集浓度低于混合给药，单独用药体壁消除半衰期小于混合给药，而实验至225 d时单独用药的海参体壁中SEM浓度却高于混合用药。由图2可知，实验进行至480 h后，SEM浓度趋于平缓，数据、曲线见表5、图4。

表4 海参组织中SEM和AOZ的消除半衰期(t1/2)

Tab.4 The depuration half-life(t1/2)of SEM and AOZ in Apostichopus japonicus

药物Drugs组织Tissues给药方式Exposedmode方程Equation消除半衰期/dThedepurationhalf-life(t1/2)SEM体壁单独给药y=106.37exp(-0.0199x)34.8混合给药y=186.28exp(-0.0146x)47.5SEM内脏单独给药y=532.88exp(-0.0181x)38.3混合给药y=347.81exp(-0.0196x)35.4AOZ体壁单独给药y=750.21exp(-0.0131x)52.9混合给药y=656.57exp(-0.0117x)59.2AOZ内脏单独给药y=645.10exp(-0.0179x)38.7混合给药y=136.91exp(-0.0127x)54.6

表5 消除过程(480 h后)体壁中SEM残留量

Tab.5 The residues of SEM in the body wall in the process of depuration(480 h later)

μg·kg-1

图4 SEM在体壁中的药-时曲线Fig.4 The drug concentration-time curve of SEM in the body wall

对比SEM、AOZ在大菱鲆、南美白对虾等生物组织中代谢消除曲线，海参组织中药物残留浓度具有更长的“平台期”。消除半衰期表示药物浓度降至初始浓度一半的时间，利用常微分方程构建的代谢动力学方程给予代谢前期数据更高的权重[14-15]。对于海参组织中药物代谢的中后期，未知随机干扰可能造成模型参数的变化，温度等环境因素对药物代谢速率更为显著。不同生长时期最适宜海参生长的温度不同，并且在一定温度范围内，药物的代谢速率与温度成正比，海参体内某些蛋白表达对升温更为敏感[16-18]。因此由消除半衰期推算代谢后期的残留浓度，可能需要引入其他变量[19]。

3 讨论

本实验投药方式及药量均参照实际生产过程进行操作。实验结果显示无论采用何种给药方式，用药初期代谢迅速，之后逐渐降低到一个较低水平并维持很长一段时间，这与之前报道呋喃类药物在大菱鲆、栉孔扇贝、牙鲆、南美白对虾、斑点叉尾鮰[8]中代谢规律相似。刘莹等[8]对牙鲆进行80 mg/kg呋喃唑酮单次口灌，发现在灌药528 h后，牙鲆肌肉中仍然有0.4 μg/kg的AOZ残留；赵艳等[20]研究了凡纳滨对虾在2 mg/L呋喃西林和呋喃唑酮水体中药浴24 h后的代谢消除规律，SEM在用药50 d后，AOZ在用药20 d后才未检出；徐维海等[21]研究发现罗非鱼中呋喃唑酮的平均消除速率比AOZ快近400倍。本实验中，呋喃西林单独药浴的海参体壁中SEM消除半衰期最短为34.8 d，本组实验海参体壁中SEM含量自第12天后降至20 μg/kg以下，但直至第225 天单独给药条件下仍有3.32 μg/kg的残留，单独给药条件下体壁中AOE残留量为2.94 μg/kg，表明SEM和AOZ在海参中较难消除。

邢丽红等[22]以药饵投喂方式研究呋喃西林在海参体内的代谢消除规律，利用DNS2.0软件分析数据，得出SEM在海参体内t1/2为682.42 h，停药200 d后海参体内SEM残留量降至0.5 μg/kg，其所采用的苗种规格平均体长2.2 cm，且未区分海参体壁和海参肠不同组织。而本实验针对苗种规格为7.7 cm的海参幼苗进行研究，对海参不同组织的代谢规律进行分析，并采用SPSS数据分析软件对结果进行分析、拟合，得出的消除半衰期略长于邢丽红等人的研究结果。除苗种规格不同、给药方式不同及水温差异等因素外，海参在生长初期各种生理活动比较旺盛，药物在幼参体内的消除半衰期理论上即应当短于成参。谭志军等[6]研究呋喃西林和呋喃唑酮在大菱鲆组织中的消除规律，得出AOZ更易在大菱鲆体内富集，其代谢物AOZ质量分数远高于呋喃西林代谢物SEM在大菱鲆的富集质量分数；混合给药时两种药物的消除速率均小于单独给药时的消除速率。本实验结果表明，海参中呋喃唑酮和呋喃西林的消除规律，其规律与大菱鲆中两类药物消除规律相似。

本实验以一年后即可上市销售的海参苗种为研究对象，系统考察了呋喃西林、呋喃唑酮在海参体内的代谢残留规律。根据以上实验结果，SEM及AOZ在海参体内消除后期的残留量变化十分缓慢，可推测市场环节检出含量在5 μg/kg以下时，极大可能来源于生产环节。比较SEM和AOZ在其他动物组织体内的消除半衰期，发现海参代谢较之缓慢，可能与个体活动、相关酶的活性有关。综合呋喃类药物在大菱鲆、牙鲆、鲤鱼、罗非鱼等水产品中代谢消除半衰期及本实验所得结果可知，硝基呋喃代谢物要经历数倍于半衰期的时间，浓度才能降至检出限以下，并且在数据拟合过程中发现最初始的采样点数据对拟合方程相关系数影响很大。本实验得出两种药物在两种给药方式下的消除半衰期在1～2个月之间，根据本实验海参组织中SEM和AOZ代谢规律，预测即使在海参上市前一年使用呋喃西林和呋喃唑酮，到销售环节仍然有极大的可能检出SEM和AOZ。因此在水产品质量安全风险评估过程中，抓好苗种及养殖中期硝基呋喃类药物的监管工作尤为重要。

[1] Laurentius A P, Hoogenboom, Gerard D, etc. Absorption of a mutagenic metabolite released from protein bound residues of furazolidone[J]. Environ Toxicol Pharmacol, 2002(11):273-287.

[2] European Commission. Commission Regulation(EC) No1442/95 of 26 June 1995 amending AnnexesⅠ， Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ of Council Regulation (EEC) No 2377/90 laying down a community procedure for the establishment of maximum residue limits of veterinary medicinal products in foodstuffs of animal origin[J] .Off J Eur Comm, 1995, L143:26-30.

[3] 中华人民共和国农业部.中华人民共和国农业部公告第193号 食品动物禁用的兽药及其它化合物清单 [S]. 北京：中华人民共和国农业部，2002.

[4] 王群，吕海燕，宋怿. 硝基呋喃类在水产品及其养殖环境中的消解规律研究进展[J]. 中国渔业质量与标准，2014，4(6)：16-21.

[5] 郭景华. 液质法测定水产硝基呋喃代谢物及其使用分析[J]. 广东化工， 2014(15)：155-157.

[6] 谭志军，翟毓秀，冷凯良，等. 呋喃西林和呋喃唑酮代谢物在大菱鲆组织中的消除规律[J]. 中山大学学报(自然科学版)，2008(7)：63-69.

[7] 徐英江, 田秀慧, 任传博, 等. 氨基脲在栉孔扇贝体内的生物富集与消除规律[J].水产学报，2013，37(3)：443-448.

[8] 刘莹，李兆新，郑炯，等. 呋喃唑酮及其代谢物在牙鲆肌肉组织中的代谢动力学研究[J]. 中国渔业质量标准， 2013，3(1)：19-26.

[9] 辛少平，邓建朝，杨贤庆，等. 高效液相色谱法测定硝基呋喃类药物代谢物及其在对虾体内的代谢[J].食品科学， 2014，35(24)：151-157.

[10] 刘永涛，艾晓辉，索纹纹，等. 网箱养殖条件下呋喃西林代谢物SEM在斑点叉尾鮰体内组织分布及消规律研究[J]. 福建农林大学学报(自然科学版) ,2013, 42(1):72-74.

[11] 王印庚，荣小军，张春云，等. 养殖海参主要疾病及防治技术[J]. 海洋科学，2005，29(3)：1-7.

[12] 张秀妍，马琳，王慧龙. 海参和海参苗种中硝基呋喃类代谢物残留的液质联用检测法[J]. 口岸卫生控制，2012，17(6)：24-28.

[13] 中华人民共和国农业部. 农业部1486号公告-8-2010 饲料中硝基呋喃类药物的测定—高效液相色谱法[S].北京：中华人民共和国农业部， 2010.

[14 ] John A.Rice. 数理统计与数据分析[M]. 北京：机械工业出版社， 2011：376-403.

[15] 曾衍霖. 药物代谢动力学中的二个计算问题—原始数据的权重与线性数学模型中房室数的确定[J]. 药学学报，1980，15(9)：571-576.

[16] 赵鲜鲜，林杭宾，王飞. 基于海参生存环境探究海参养殖技术[J]. 河北渔业， 2013(7)：54-56.

[17] 徐维海. 抗菌药物在水产生物体内的残留与代谢变异化合物研究[D]. 青岛，中国科学院海洋研究所， 2004.

[18] 臧元奇. 刺参(ApostichopusjaponicasSelenka)对典型环境胁迫的生理生态学相应及其机制研究[D]. 青岛，中国海洋大学， 2012.

[19] 褚娟. 利用随机微分方程建立药物代谢动力学模型及其应用[D]. 武汉，华中科技大学， 2012.

[20] 赵艳，张凤枰，刘耀敏. 超高效液相色谱-串联质谱法测定凡纳滨对虾中的硝基呋喃代谢物残留[J]. 南方水产科学， 2011,7(4):55-60.

[21] 徐维海，林黎明，朱校斌，等. HPLC/MS法对呋喃唑酮及其代谢物AOZ在罗非鱼体内残留研究[J]. 上海水产大学学报， 2005，14(1)：35-39.

[22] 邢丽红，李兆新，王英姿. 呋喃西林在海参体内的代谢消除规律研究[J]. 中国渔业质量标准，2012，2(4)：44-49.

The elimination rules of the metabolites of nitrofurazone andfurazolidone in Apostichopus japonicus

FU Shulin, XING Lihong*, SUN Weihong, ZHENG Guanchao, LI Zhaoxin, ZHAI Yuxiu， GUO Jiangtao

(Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Science;National Center for Quality Supervision and Testof Aquatic Products, Qingdao 266071, China)

The elimination rules of nitrofurazone and furazolidone, and theirs metabolites semicarbazide (SEM) and 3-amino-2-oxazolidinone (AOZ) in tissues ofApostichopusjaponicuswere studied by different approaches through the use of LC-MS/MS. The results showed that the elimination of SEM and AOZ showed similar rules. The residues depurated rapidly at first, then the rate reduced and the concentrations maintained for a long time. SEM and AOZ were still detected 225 d after drug withdrawal, which showed that it was difficult to eliminate SEM and AOZ in tissues ofApostichopusjaponicus. In general, the elimination rate of SEM and AOZ in viscera was higher than that in body wall, and the rate of elimination under single-dose administration was higher than that of joint administration. Under the single-dose administration, the elimination half-life(t1/2) of SEM in body wall and viscera were 34.8 and 38.2 d, respectively; as for AOZ,t1/2were 52.9 and 38.7 d,respcetively. By the way of joint administration,t1/2of SEM in body wall and viscera were 47.5 and 35.4 d, respectively, and 59.2 and 54.6 d for AOZ in body wall and viscera,respcetively. It is predicted that SEM and AOZ were possibly detected in market circulation, in spite of one year’s withdrawal time. The research showed that tightening the regulation of nitrofurans at seed and the middle breed period was conducive to guaranteeing the quality and safety ofApostichopusjaponicus.[Chinese Fishery Quality and Standards, 2016, 6(1):36-44]Key words:Apostichopusjaponicus; nitrofurazone; furazolidone; semicarbazide (SEM); 3-amino-2- oxazolidinone(AOZ); metabolismCorresponding author:XING Lihong, xinglh@ysfri.ac.cn

2015-09-10；接收日期：2015-11-17

2015国家水产品质量安全风险评估(FP2015009-1)

付树林(1989-)，男，学士，研究实习员，研究方向为水产品质量安全检测与控制，fusl@ysfri.ac.cn 通信作者：邢丽红，助理研究员，研究方向为水产品质量安全检测与控制，xinglh@ysfri.ac.cn

S9

A

2095-1833(2016)01-0036-09