咪唑类离子液体对斜纹夜蛾的毒杀

卢嫚等

摘要 [目的]探究咪唑类离子液体对斜纹夜蛾的毒杀作用。[方法]研究了2种新烟碱类杀虫剂和3种咪唑类离子液体对斜纹夜蛾的室内毒力测定，并研究了2类药剂混配之后的联合毒力。[结果]吡虫啉48 h的LC50为45.905；啶蟲咪48 h的LC50为69.712；溴化1-乙基-3-甲基咪唑48h的LC50为6.968 mg/L；溴化1-丁基-3-甲基咪唑48 h的LC50为9.251 mg/L；1，2-二甲基咪唑48 h的8.043 mg/L。发现只有吡虫啉+溴化1-丁基-3-甲基咪唑按1∶1比例混配之后具有增效作用，啶虫咪+溴化1-乙基-3-甲基咪唑，按4∶1比例混配后具有拮抗作用，其他比例均为相加作用。[结论]溴化1-丁基-3-甲基咪唑可使斜纹夜蛾体壁 松软、缝隙加大、塌陷。

关键词 斜纹夜蛾；毒力测定；体壁

中图分类号 S433 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）03-00765-05

Abstract [Objective] The study aimed to explore the toxic action of imidazole ions on Prodenia litura （Fabricius）. [Method] The toxic action of two kinds of neonicotinoids and three kinds of ionic liquids on P. litura were measured， the virulence of two types of pharmaceutical compounding joint after were studiedl. [Result] The result showed that the LC50 of Imidacloprid and Acetamiprid were 45.905 mg/L and 69.712 mg/L respectively， the LC50 of 1-ethyl-3-methylimidazolium， 1-butyl-3-methylimidazolium and 1，2-dimethylimidazole were 6.968 mg/L， 9.251 mg/L and 8.043 mg/L respectively. The study showed that only imidacloprid + bromide 1-butyl-3-methylimidazolium press after mixed 1∶1 with synergism Acetamiprid + bromide 1-ethyl-3-methyl imidazole， 4∶1 with the proportion of mixed antagonism， other ratios are additive effect. The impact of 1-butyl-3-methylimidazolium on P. litura body wall was studied as well. [Conclusion] The experiments showed that the 1-butyl-3-methylimidazolium lead P. litura body wall to so soft， increase the gap， collapse.

Key words Spodoptera； Virulence； Body wall

斜纹夜蛾[Prodenia litura（Abricius）]又名莲纹夜蛾，属鳞翅目，夜蛾科，是一种世界性分布的重要农业害虫，国外主要分布于东南亚及南亚， 国内以长江流域和黄河流域发生为重[1]。该虫食性广，寄主植物已知99科290余种，其中喜食的有90种以上。在蔬菜中有甘蓝、白菜、莲藕、蕹菜、芋艿、豆类、瓜类、茄、辣椒、番茄等，但以十字花科和水生蔬菜为主；作物有甘薯、棉花、大豆、玉米、烟草等[2]。

根据斜纹夜蛾发生的世代数多、发生量大和易暴发成灾等特点，斜纹夜蛾的防治措施仍以化学防治为主。长期以来，由于化学农药的大量使用，加上操作不规范，使斜纹

夜蛾普遍产生了抗药性。国内外已有很多报道斜纹夜蛾对有机氯、有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯及苏云金杆菌等多类杀虫剂产生了不同程度的抗药性[3-7]。在台湾，斜纹夜蛾对克百威、速灭磷、氯氰菊酯和氰戊菊酯分别产生了79、63、13和4.1倍的抗性[8]。在有些地区，对昆虫几丁质合成抑制剂如抑太保、卡死克等也产生了不同程度的抗性[9]。即使是防效很好的药剂溴虫腈，也已有报道称海南省海口市小菜蛾种群对溴虫腈的抗性已达7.98倍[10]。鉴于斜纹夜蛾的危害及其农药的抗性，笔者选取了2种新烟碱类杀虫剂和3种咪唑类离子液体分别单独对斜纹夜蛾进行室内毒力测定，还对2类药剂混配之后的联合毒力进行测定，并通过电镜观察咪唑类离子液体对虫体体壁的影响，最后测定了3种咪唑类离子液体对斜纹夜蛾体内乙酰胆碱酯酶（AChE）活性的影响。

1 材料与方法

1.1 供试药剂

吡虫啉、啶虫咪、溴化1-乙基-3-甲基咪唑、1，2-二甲基咪唑、溴化1-丁基-3-甲基咪唑均购自上海江莱生物科技有限公司；丙酮、乙醇、戊二醛和乙酸异戊酯、考马斯亮蓝、MATch、DNTB均购自国药集团化学试剂有限公司。

1.2 供试斜纹夜蛾

从湖南农业大学购置斜纹夜蛾蛹和成虫。养虫温室9 m2，温度（26±1）℃，相对湿度在 60%～70%，昼夜光照时间为16∶8，以购买的饲料喂养。挑选同日产的卵、初孵幼虫，虫体大小一致、健康的4龄幼虫作为毒力测定的试虫。

1.3 室内杀虫活性测定

采用点滴法。预试验：先进行大范围浓度系列的初步试验。每个浓度处理5头4龄试虫并加入5 g饲料，48 h后以毛筆轻触试虫，无反应即视为死亡，得出100%致死和全不致死的浓度。正式试验： 根据预试验所得100%致死浓度和全不死的浓度范围，用丙酮将药剂稀释成5个浓度梯度，每培养皿10头4龄试虫并加入5 g饲料，以丙酮进行对照。试验时，用10 μl移液枪将10 μl药液点于斜纹夜蛾颈部横纹处，在开始试验时加1次药，之后均不加药。分别于12、24、36、48 h观察死亡数量。每个浓度重复3次。

1.4 联合毒力的测定

新烟碱类杀虫剂与咪唑类离子液体按照吡虫啉+溴化1-乙基-3-甲基咪唑1∶1、1∶2、1∶4；吡虫啉+溴化1-丁基-3-甲基咪唑1∶1、1∶2、1∶4；吡虫啉+1，2-二甲基咪唑1∶1、1∶2、1∶4；啶虫咪+溴化1-乙基-3-甲基咪唑1∶1、1∶2、1∶4；啶虫咪+溴化1-丁基-3-甲基咪唑1∶1、1∶2、1∶4；啶虫咪+1，2-二甲基咪唑1∶1、1∶2、1∶4的比例进行混配，杀虫方法采用点滴法，正式试验时滴于每个试虫的药液量是10 μl。

参照孙云沛等方法，将2种新烟碱类杀虫剂分别与3种离子液体按一定比例混合，测定混配后的药剂对斜纹夜蛾的的增效系数。计算方法如下：

毒力指数（TI）=标准剂的LD50或LC50/待测剂的LD50或LC50×100

混合剂实际毒力指数（ATl）=标准剂的LD50或LC50/混合剂的LD50或L50×100

混剂理论毒力指数（TTI）=[A剂的TI×A剂在混剂中所占的百分数（%）]+[B剂的TI×B剂在混剂中占的百分数（%）]

共毒系数（CTC）=混剂实际毒力指数（ATI）/混剂理论毒力指数（TTI）/×100

共毒系数大于120为增效作用，共毒系数为80～120为相加作用，共毒系数小于80为拮抗作用。

1.5 体壁电镜观察

挑选出蜕皮时间相差不到1 h的同龄大小一致、健康的4龄幼虫，用10 μl移液枪将10 μl药液点于斜纹夜蛾背部，同时设置对照组以丙酮为对照。24 h后用体积分数2.5%戊二醛在4 ℃中固定3 h，然后剪掉头胸部及腹部末端，再继续在2.5%戊二醛在4 ℃中固定12 h。解剖虫体，取其表皮，用0.1 mol/L pH 7.3磷酸缓冲液冲洗2次后，用乙醇梯度脱水（乙醇的体积分数分别为30%、50%、70%、80%、90%、95%）每次5 min，再用无水乙醇脱水2次，每次5 min。然后置于乙酸异戊酯中置换30 min后放入CO2临界点干燥仪干燥20 ℃载下干燥25 min后40 ℃再干燥15 min，取出样品置于Eikon ⅠB-3镀膜。在S-450型扫描电镜下观察体壁，并拍照。