自制烧伤膏治疗烧烫伤的实验研究*

高丽萍 李荣振

(1. 泰安市公安消防支队后勤处卫生队，山东 泰安 271000； 2. 泰安市口腔医院，山东 泰安 271000)



自制烧伤膏治疗烧烫伤的实验研究*

高丽萍1李荣振2

(1. 泰安市公安消防支队后勤处卫生队，山东 泰安 271000； 2. 泰安市口腔医院，山东 泰安 271000)

目的 观察自制烧伤膏在治疗烧烫伤过程中的临床药效学作用。方法 通过建立小鼠烧烫伤耳肿胀模型、热板致痛法模型观察自制烧伤膏的作用，通过体外抑菌试验观察其抑菌作用以及通过制备Wistar烧伤模型大鼠，观察其对在体肠道菌群的调节作用。结果 自制烧伤膏能明显改善烧伤模型大鼠肠黏膜损伤情况，对致病菌的生长有明显抑制作用，并具有明显的消炎镇痛作用(P<0.05)。结论 自制烧伤膏具有明显的消炎镇痛抑菌作用，对于烧伤模型大鼠能明显改善肠黏膜的损伤，其机制可能与纠正肠道菌群失调有关。

自制烧伤膏；肠道菌群；药效学

烧烫伤是一种外科常见病，在临床上有较高的发病率，其原因通常是由热力因素作用人体而致伤。根据烧伤病情一般分为三度，即I度、Ⅱ度(浅Ⅱ度、深Ⅱ度)、Ⅲ度烧烫伤。本研究自制烧伤膏为山东中医药大学自制膏药，其主要成分包括黄芩、黄柏、大黄、紫草、茯苓等。经过多年的临床检验，对各种程度的烧伤患者均具有一定疗效，为明确其机制，进行药效学实验研究。

1 材料与方法

1.1 实验动物

昆明种小鼠，20±2 g，Wistar大鼠，200±20 g，均购自山东中医药大学实验动物中心。

1.2 实验材料

自制烧伤膏、湿润烧伤膏(汕头市美宝制药有限公司)、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌，由山东中医药大学微生物教研室提供。

1.3 实验内容

1.3.1 小鼠耳肿胀炎症模型

昆明种小鼠40只，随机分为模型组、基质组(凡士林)、阳性对照组(湿润烧伤膏，0.64 g生药/g浸膏)、自制烧伤膏治疗组(0.4 g生药/g浸膏)，每组10只，在小鼠右耳前后涂抹100%二甲苯0.02 g/只。30 min后，在肿胀处涂抹相应的药物，每只0.2 g，左耳做对照，4 h后处死动物，用8 mm打孔器取相同部位耳片，称重，以右耳片重量减左耳片重量为肿胀度，(右耳重—左耳重)/右耳重为肿胀率[1]。

1.3.2 小鼠热板致痛模型

热板仪温度调至55 ℃，预热10 min，取昆明种小鼠40只，分组同上，在小鼠四肢足跖处涂抹相应药物，将小鼠置于热板上，记录小鼠自放上后出现舔后足所需时间。分别于给药前和给药后60 min、90min、120 min测量小鼠痛阈[2]。

1.3.3 自制烧伤膏体外抑菌试验

将自制烧伤膏(0.4 g生药/g浸膏)和湿润烧伤膏(1 g)用肉体培养基倍比稀释成1∶2、1∶4、1∶8……1∶512，另设菌液对照，药液对照和空白对照组。每管定量1 ml，每管加入0.1 ml菌液，置37 ℃培养24 h，对各管培养基进行等倍稀释(1∶100， 1∶1000，1∶10000)，置37 ℃再培养24 h，取0.1 ml培养物加入直径3 cm琼脂平板，置37 ℃培养24 h，观察菌落数及自制烧伤膏和湿润烧伤膏对大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌的最大抑菌浓度(MIC)和最大杀菌浓度(MBC)[3]

1.3.4 自制烧伤膏对大鼠肠道组织及菌群影响

取Wistar大鼠24只，雌雄各半，3%戊巴比妥钠按35 mg/kg腹腔注射麻醉,固定，8%硫化钠制剂背部脱毛，3%凝固汽油涂抹背部燃烧18 s，确认致30%体表总面积烧伤，烧伤面积(cm2)=体表总面积(cm2)×拟烧伤面积百分比(%)，体表总面积(cm2)=K×体重(kg)×2/3 K[4]。烧伤后立刻平衡盐溶液腹腔注射50 ml/kg，更换垫料，单笼饲养。随机分为治疗组和对照组，另取6只大鼠作为正常对照组。于造模后第3天处死动物，自大鼠屈氏韧带下取小肠组织制作石蜡切片[5]，同时无菌镊子取肠内容物进行细菌培养，将肠内容物0.1 g加灭菌生理盐水稀释至10-8，选择合适的稀释度分别接种在培养基上，分别按步骤进行需氧和厌氧培养，其中肠杆菌、肠球菌在37 ℃下培养48 h，双歧杆菌、乳酸杆菌选用厌氧罐培养法，37 ℃下培养72 h，根据细菌的形态学特性进行鉴定(具体培养方法及鉴定见表1)。[6]

表1 肠道主要菌群培养及鉴定方法

1.5 统计学处理

采用SPSS21.0统计软件进行统计学处理，采用单因素方差分析检测组间差异，P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 自制烧伤膏对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

与模型组、基质组相比，阳性对照组与自制烧伤膏可明显减轻小鼠右耳肿胀率(P<0.05)，烧伤膏与阳性对照组相比无明显差异(见表2)。

表2 烧伤膏对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01

2.2 自制烧伤膏对小鼠热板致痛实验的影响

与模型组、基质组相比，阳性对照组和自制烧伤膏治疗组可明显增加给药60 min后小鼠的痛阈值(P<0.05)，对90 min、120 min后痛阈值影响无统计学差异，自制烧伤膏治疗组与阳性对照组相比，对痛阈值的影响无明显统计学差异(见表3)。

2.3 自制烧伤膏体外抑菌试验

实验菌浓度：大肠杆菌1.5×106CFU/ml，绿脓杆菌4.5×106CFU/ml，金黄色葡萄球菌2.6×106CFU/ml。结果表明自制烧伤膏与湿润烧伤膏对大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑菌作用，自制烧伤膏对金黄色葡萄球菌的抑制作用好于湿润烧伤膏(见表4)。

2.4 自制烧伤膏对烧伤模型大鼠肠粘膜形态学影响

正常组大鼠黏膜层、黏膜下层结构清晰，黏膜上皮细胞完整，绒毛结构清晰(见图1)。与正常对照组相比，烧伤模型组大鼠肠黏膜损伤较明显，上皮细胞局灶性坏死，绒毛破坏，黏膜下血管可见扩张，严重者黏膜上皮细胞片状脱落形成溃疡(见图2)。烧伤治疗组大鼠肠黏膜损伤明显减轻，肠上皮细胞坏死不明显，未见局部溃疡形成，绒毛结构较完整，上皮细胞排列整齐(见图3)。

表3 复方烧伤膏对小鼠热板致痛的影响

与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01

表4 自制烧伤膏对大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用(g/L)

表5 烧伤膏对烧伤模型大鼠肠道肠杆菌、肠球菌数量的影响

与正常对照组相比，△P<0.05，△△P<0.01；与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01。

正常对照组 烧伤模型组 烧伤治疗组

2.5 自制烧伤膏对肠道菌群的影响

模型组与正常对照组相比，乳酸菌和双歧杆菌数量明显减少，肠球菌和肠杆菌数量明显增加(P<0.05)，自制烧伤膏治疗组可明显增加烧伤大鼠乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，减少肠球菌和肠杆菌的数量(P<0.05)。

3 讨 论

本文自制烧伤膏是山东中医药大学自制膏药，为更好地检验烧伤膏药效设计本次实验。通过实验所得数据说明，自制烧伤膏对二甲苯所致小鼠耳肿胀以及小鼠热板致痛实验均有明显的抑制作用，体外抑菌实验中对大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌也具有一定的抑制作用，对金黄色葡萄球菌的抑制作用好于湿润烧伤膏。同时，对烧伤模型大鼠肠道菌群失调也具有一定的调节作用，并对肠黏膜损伤具有改善作用，这一作用是否是由于改善肠道菌群失调所导致的尚需进一步研究，但本实验说明自制烧伤膏具有一定的镇痛消炎抑菌的作用，为后续的开发研究奠定了坚实的理论基础。通过实验研究得出烧伤膏药效明显，对临床应用有指导意义。

[1] 付殿彬，刘佳，李丽静.镇痛散部分药效学研究.亚太传统医药，2015,11(6)：34-35.

[2] 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].北京：人们卫生出版社，2003:882.

[3] 张晗，杨巧丽，李寅，等.芩榆烧伤液治疗烧烫伤的主要药效学研究.中国实验方剂学杂志，2011,17(15)：152-156.

[4] 胡海姣，张丽，黄华，等.芩榆烧伤凝胶对烫伤的药效学研究.中药药理与临床，2013,29(2)：160-163.

[5] 苏海涛，李宜姝，陆树良，等.天然蒙脱石防治烧伤后肠道细菌移位的实验研究.中华烧伤杂志，2005,21(2)：89-92.

[6] 刘玲，赵晓莉，狄留庆，等.采用体外肠道菌群实验研究防风对黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷代谢的影响.南京中医药大学学报，2015,31(2)：170-173.

Pharmacodynamical Investigation on Burn ointment for Treatment of Burn healing

GAO Li-ping LI Rong-zhen

(1.Tai'an City, Shandong Province Armed Police Fire Brigade Rear Service Department of health,Taian 271000,China; 2.Tai'an Oral Hospital,Taian 271000,China)

Objective: In the process of observation of homemade burn cream in the treatment of burn clinical pharmacodynamics effect. Methods: by establishing mice ear swelling model burn, hot plate to observe the effect of self-made burn cream pain model, through in vitro bacteriostasis experiment observe its bacteriostasis and through the preparation of Wistar burn model in rats, observe its effect on the regulation of intestinal flora in vivo. Results: the self-made burn cream can obviously improve burn model rat intestinal mucosa damage, have obvious inhibition on the growth of pathogenic bacteria, and has obvious anti-inflammatory analgesic effect (P< 0.05). Conclusion: The self-made burn cream has obvious anti-inflammatory analgesic bacteriostasis, with burn model can obviously improve the intestinal mucosa injury in rats and its mechanism may be related to correct the imbalance of intestinal flora.

homemade burn cream; intestinal flora; pharmacodynamics

高丽萍(1976—)，女，山东泰安人，主治医师，本科，从事临床治疗工作。

李荣振(1976—)，男，山东泰安人，副主任医师，本科，从事临床工作。E-mail：ok9579@163.com。

R965

A

1004-7115(2016)12-1364-03

10.3969/j.issn.1004-7115.2016.12.016

2016-10-15)