肺炎支原体肺炎患儿血清MBL和唾液酸水平的变化研究

李明勇 庞福珍 陈中件 庞黎华 徐鸯霞 奚旭阳 蒋玲珍 王颖蔚

肺炎支原体肺炎患儿血清MBL和唾液酸水平的变化研究

李明勇 庞福珍 陈中件 庞黎华 徐鸯霞 奚旭阳 蒋玲珍 王颖蔚

目的 分析肺炎支原体肺炎（MPP）患儿的血清甘露糖结合凝集素（MBL）和唾液酸水平的变化，探讨其在MPP发病机制中的作用。方法 选取MPP患儿95例为MPP组，同期参加体检的儿童60例为对照组，两组性别、年龄比较均无统计学差异（均P＞0.05）。两组均抽取外周血2ml，用ELISA法检测血清MBL水平，神经氨酸苷酶法检测血清唾液酸水平，分析比较两组MBL和唾液酸水平，探讨两者与MPP的关系。结果 MPP组急性期和恢复期血清MBL水平均显著高于对照组（均P＜0.05）；MPP组急性期唾液酸水平显著高于对照组（P＜0.05），恢复期与对照组比较无统计学差异（P＞0.05）。MPP组急性期与恢复期MBL、唾液酸水平比较均无统计学差异（均P＞0.05）。结论 MPP患儿血清MBL和唾液酸水平明显增高，可能与机体炎症反应有关。

肺炎支原体 肺炎 儿童 甘露糖结合凝集素 唾液酸

肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）是儿童常见的社区获得性疾病，病程较一般肺炎长，可有持续高热、反复咳嗽和肺外损害等表现，胸部X线片多有大片高密度影。MPP发病机制复杂，既有病原体直接侵犯，又有多种机制参与的免疫损伤[1]。甘露糖结合凝集素（MBL）是一种糖蛋白，是人类天然免疫中非常重要的一线抗感染分子，能通过不依赖抗体的方式激活补体起抗感染作用，同时还具有一定的急性时相蛋白的特征。唾液酸是一系列含9个碳原子羟基化单糖酰化衍生物的统称，是一种带负电荷的酸性单糖，具有一定的抗感染作用[2]。人体血清中的唾液酸主要以结合形态存在于血清类黏蛋白、结合球蛋白、补体蛋白等糖蛋白中[3]，MBL作为一种重要糖蛋白，也富含唾液酸，两者之间存在关联，在机体血清中表达水平的变化可能会存在一致性。本研究旨在通过分析MPP患儿血清MBL和唾液酸表达水平的变化，探讨其在MPP发病机制中的可能作用。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2014年1月至2015年6月在本院儿科住院治疗的MPP患儿95例（MPP组）。MPP诊断标准：符合中华人民共和国卫生部行业标准——肺炎诊断（标准编号WS382-2012）的基础上，同时具备肺炎支原体（MP）感染的依据（恢复期MP IgG滴度较急性期上升4倍以上或痰液MP-DNA阳性；入院时为急性期，恢复期指患儿经治疗后体温正常、咳嗽症状明显减轻2d后，或复查胸部X线片肺部炎症较治疗前明显吸收[4]）。排除明确混合其它病原体感染，或使用免疫抑制剂及免疫调节剂的MPP患儿。另择同期参加体检的60例健康儿童为对照组。MPP组男53例，女42例；年龄0.92～11（5.41±2.62）岁。对照组男31例，女29例；年龄1.5～11（4.86±2.46）岁。MPP组和对照组性别、年龄比较均无统计学差异（均P＞0.05）。

1.2 方法 MPP组患儿分别于入院时及出院前抽取外周血2ml，置生化促凝管内；室温放置0.5～1h后，2 500g离心15min，取过滤胶上层血浆，分装2管，每管200μl，置于超低温（-80°C）冰箱保存；两次抽血间隔（6.47± 1.70）d。采用ELISA法检测血清MBL，试剂盒购自荷兰Hycult Biotech公司，严格按照说明书进行操作，以复孔检测保证实验结果准确可靠。采用神经氨酸苷酶法检测唾液酸，试剂盒购自北京九强生物技术有限公司。对照组仅于体检时抽取外周血检测，方法同MPP组。

1.3 统计学处理 应用SPSS 17.0统计软件；正态分布的计量资料以表示，两组比较采用t检验；非正态分布的计量资料以中位数表示，两组比较采用Wilcoxon秩和检验；计数资料以构成比表示，两组比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 MPP组患儿临床特点和转归 MPP组患儿中，有不同程度的发热症状85例（89.5%），热程（5.69±3.42）d；有较剧烈咳嗽81例（85.3%）；肺部可闻及干、湿性啰音70例（73.7%）；急性期C反应蛋白（CRP）＞10mg/L 67例（70.5%），恢复期CRP均降至正常；胸部X线片有单侧或双侧大片状高密度影54例（56.8%），斑片状高密度影41例（43.2%），伴胸腔积液2例（2.1%）。MPP组患儿均予阿奇霉素静脉滴注治疗至少1个疗程，均治愈，住院3～17（8.66±2.38）d。

2.2 MPP组和对照组血清MBL和唾液酸水平比较 见表1。

表1 MPP组和对照组血清MBL和唾液酸水平比较

由表1可见，MPP组急性期和恢复期血清MBL水平均显著高于对照组（均P＜0.05），而急性期与恢复期比较无统计学差异（P＞0.05）。MPP组急性期唾液酸水平显著高于对照组（P＜0.05），但与恢复期比较无统计学差异（P＞0.05），且恢复期唾液酸水平与对照组比较无统计学差异（P＞0.05）。

3 讨论

MPP的发病机制复杂，包括病原体直接侵犯和感染后造成的免疫损伤[5-6]。免疫损伤很多情况下与补体的激活有关，其中凝集素途径不依赖特异性抗体产生，就能由病原微生物直接激活补体，故在抗体产生之前的感染早期就能发挥作用[7]。凝集素途径主要通过血清中MBL直接识别病原体表面糖结构，与MBL相关丝氨酸蛋白酶结合后激活补体的级联反应而发挥抗感染作用，该物质在感染急性期血清中水平可较平时上升1.5～2倍[8]，可能是对抗感染的适应性反应。MPP组患儿急性期和恢复期血清MBL水平均高于对照组，提示MBL在启动补体激活的凝集素途径中可能发挥了作用，而恢复期与急性期相比，并未如预料中的有显著下降，分析原因，可能与MPP本身病程较长，恢复期采集的标本仍未接近完全健康状态有关。研究表明，MBL先天缺陷机体对多种病原体的易感性增加[9-10]。本研究还未能阐明MBL缺陷与MPP易感性之间的关系，分析原因，可能与MBL遗传缺陷在人群中的发病率相对较低，而本研究样本量较小有关，今后若能进行大样本长期随访研究，则会对易感性分析有帮助。

唾液酸是人类很多血浆蛋白表面的组成部分，被认为是急性炎症反应的重要标记[11]。本研究显示，MPP组患儿急性期唾液酸水平显著高于对照组，提示唾液酸参与急性炎症过程。MPP患儿唾液酸水平增高与急性期机体合成富含唾液酸的CRP、MBL和其他炎性相关糖蛋白的数量明显增加有关，至于血浆糖蛋白分子表面唾液酸表达是否因炎症过程而增加，有待进一步研究。

综上所述，MPP患儿血清MBL和唾液酸水平明显增高，唾液酸可能通过MBL、CRP等炎症相关的蛋白分子表达增加来参与炎症过程，MBL和唾液酸在儿童MPP发病中的具体机制有待进一步研究。

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Serum levels of mannose-binding lectin and sialic acid in children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia

LI Mingyong,PANG Fuzhen,CHEN Zhongjian,et al.Department of Pediatrics,Tiantai People's Hospital,Taizhou 317200,China

【 Abstract】 Objective To investigate serum levels of mannose binding lectin(MBL)and sialic acid in children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia(MPP). Methods Ninety five children with MPP(MPP group)and 60 healthy children were (control group)were enrolled in the study.Serum MBL and sialic acids levels were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)and neuraminidase method respectively.MBL and sialic acid levels between the two groups were compared. Results MBL levels in MPP group at both acute phase and convalescent phase were significant higher than those in control group(both P＜0.05).Sialic acid level in MPP group at acute phase was higher than that in control group(P＜0.05),while sialic acid level at convalescent phase had no difference with that in control group(P＞0.05). Conclusion Serum MBL and sialic acid levels in MPP children are increased,which may be correlated with inflammatory reaction.

Mycoplasma pneumonia Pneumonia Children Mannose-binding lectin Sialic acid

2015-07-22）

（本文编辑：李媚）

台州市科技计划项目（11ky40）

317200 天台县人民医院儿科

庞福珍，E-mail：pfz128@163.com