乙酰辅酶A乙酰转移酶1在前列腺癌中的表达及临床意义

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(1.南华大学附属第二医院泌尿外科，湖南 衡阳 421001；2.南华大学附属第三医院泌尿外科)

·临床医学·

乙酰辅酶A乙酰转移酶1在前列腺癌中的表达及临床意义

吴磊1，罗志刚1*，徐兵2

(1.南华大学附属第二医院泌尿外科，湖南 衡阳 421001；2.南华大学附属第三医院泌尿外科)

目的探讨乙酰辅酶A乙酰转移酶1(ACAT1)在前列腺癌中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化染色，检测63例前列腺癌组织及癌旁正常组织中ACAT1的表达情况。结果ACAT1在前列腺癌组织及正常前列腺组织中的表达阳性率分别81.0%和20.6%，差异有统计学意义(P<0.05)，且与前列腺癌患者年龄、前列腺特异性抗原(PSA)水平无关(P>0.05)，但与Gleason score(GS)及肿瘤病理分期有关(P<0.05)。结论ACAT1的表达在前列腺癌组织中显著高于癌旁正常组织，与前列腺癌GS评分和肿瘤病理分期有关。ACAT1可能是早期前列腺癌的标志。

ACAT1； 前列腺癌； 标志物

前列腺癌是北美男性死亡率居第二位的癌症，西方国家发病率高，但近年来亚洲国家患者明显增多，发病率迅速上升[1]。虽然大多数前列腺癌进展缓慢，但少部分患者也会发展为侵袭性前列腺癌而导致死亡[2]。目前的检测方法包括直肠指诊和血清前列腺特异抗原(PSA)检测。然而PSA缺乏特异性，因此无法准确区分惰性和侵袭性前列腺癌。乙酰辅酶A乙酰转移酶1 (acetyl-coenzyme A acetyltransferase 1，ACAT1)是一种胆固醇催化酶，在细胞内游离胆固醇酯化为胆固醇酯的过程中发挥关键酶的作用，有研究表明，生酮途径的关键酶对肿瘤的生长有重要作用，ACAT1在侵袭性前列腺癌中升高，然而其在前列腺癌病理生理学的作用机制尚未阐明。本文旨在应用免疫组化技术探讨前列腺癌中ACAT1的表达与前列腺癌的相关性，验证ACAT1作为前列腺癌进展标志物的可行性。

1 资料与方法

1.1临床资料回顾性分析2013年4月～2015年6月来本院收治的诊断为局限性前列腺癌并行前列腺癌根治术的63例患者的临床资料。患者年龄60～70岁，平均64±1.3 岁，组织学类型全为腺癌；行DRE、CT、MRI、骨扫描及PSA等检查后，依据2010版的AJCC的TNM分期[3]确定肿瘤的病理分期。

1.2免疫组化检测手术切除肿瘤标本及距肿瘤边缘2 cm以上(镜下未见癌)的癌旁组织，采用4%多聚甲醛固定，用石蜡包埋制成蜡块，行免疫组化。将标本切片，置于载玻片脱蜡、水化，加入ACAT1多克隆抗体(1∶500，Sigma)孵育过夜。PBS冲洗10 min后，试剂盒内滴加二抗在室温下孵育30 min,PBS再次冲洗10 min后，采用DAB使底物显色，苏木精作为复染剂，脱水，封片。

1.3结果判定根据双盲原则进行计数，阳性标准:胞质细胞浆及细胞膜中出现棕黄色或棕色颗粒。随机选择5个高倍视野进行观察，每个视野对100个细胞进行计数，按各个视野中阳性细胞数的比例进行评分：≤5%计0分，5%～25%计1分，25%～50%计2分，>50%计3分；细胞染色强度按无、弱(浅黄色)、中等(棕黄色)和强(黄褐色)染色分别计0、1、2和3分。ACAT1表达以细胞阳性百分率及细胞染色强度得分之和进行判定。相加后得到最终评分。0分、1～2分、3～4分和5～6分分别列为阴性(-)、弱阳性(+)、中度阳性(++)和强阳性(+++)。

2 结 果

2.1 ACAT1在不同组织中的阳性表达ACAT1在前列腺癌组织的阳性表达率为81.0%(51/63)，癌旁正常组织的阳性表达率为20.6% (13/63)，两组相比，差异具有统计学意义(χ2=45.85，P<0.01)。癌组织及癌旁组织中ACAT1表达见表1和图1。

表1ACAT1在前列腺癌组织和正常前列腺组织的表达

组别nACAT1的表达-++++++χ2P前列腺癌组织631214191845.85<0.01正常前列腺组织6350544

2.2 ACAT1与前列腺癌临床病理参数的关系如表2所示，ACAT1表达与前列腺癌患者年龄以及外周血PSA水平无关(P>0.05)；与不同的病理分级和肿瘤病理分期存在相关性(P<0.05，表2)。

图1 ACAT1在前列腺癌组织和正常前列腺组织的表达图(400×)

Gleason评分显示，63例前列腺癌组织不同病理分级中，ACAT1的表达有统计学差异(P<0.05)，随着病理分化程度的降低，ACAT1表达增高。在不同的病理分期中，pT2中ACAT1阳性率明显低于pT3(65.0% vs 95.5%)，差异有统计学意义(P<0.01)。

表2ACAT1与前列腺癌临床病理参数的关系

因素例数ACAT1的表达-+～+++χ2P年龄(岁) ≤65234190.06>0.05 >6540832PSA浓度(ng/mL) <10203170.02>0.05 ≥1043736Gleason评分 2～49189.87<0.01 5～615312 7～10392217病理分期 pT24114276.92<0.01 pT322121

3 讨 论

ACAT是位于细胞内质网上的一种膜蛋白，是胆固醇和长链脂酰CoA合成的限速酶，它也能影响脂蛋白组装及饮食胆固醇吸收。ACAT1作为其亚型，是酮体合成的限速酶，在肿瘤研究中鲜有报道。近年来，有国外学者使用体外定量蛋白组学方法，发现在侵袭性前列腺癌中，ACAT浓度显著升高[4]。小样本临床队列研究发现ACAT1作为这个通路的限速酶，与低分化(GS≥8)和雄激素去势抵抗型前列腺癌密切相关。

目前国内外尚缺乏ACAT1与前列腺癌病人临床病理关系的详细资料，本文采用免疫组化技术对前列腺癌组织及癌旁正常前列腺组织中的ACAT1表达进行分析，对其能否作为前列腺癌进展的潜在标志物进行评估。结果显示相比正常前列腺组织，ACAT1显著高表达于前列腺癌组织中。这一研究与ACAT1 在乳腺癌组织中的表达水平明显高于其正常组织的结果一致[5-6]。临床因素分析显示，ACAT1的表达水平与Gleason score 分级和肿瘤病理分期有关，而与前列腺癌患者年龄、外周血PSA 水平无关。相比中/高分化肿瘤，ACAT1在低分化(GS≥7)前列腺癌中表达升高。同样，与器官局限性pT2肿瘤比，ACAT1在晚期pT3肿瘤中表达明显升高，而这些通常与不良预后是联系在一起的[7]。但是，ACAT1在前列腺癌中的具体作用及作用机制有待于进一步研究。在后续的研究中，本文作者将进一步验证ACAT1的功能，揭示ACAT1在前列腺癌中的作用及其作用机制。

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ClinicalSignificanceofAcetyl-CoAAcetyltransferase1inProstateCancer

WU Lei,LUO Zhigang,XU Bing

(Dept.UrinarySurgery,theSecondHospital,UniversityofSouthChina，Hengyang,Hunan421001，China)

ObjectiveTo investigate the expression of ACAT1 in prostate cancer tissue and its clinical significance．

MethodsImmunohistochemistry was used to detect ACAT1 expression in 63 cases of prostate cancer and normal tissues.

ResultsACAT1 expressed in prostate cancer tissue and normal prostate tissues were 81.0%,20.6%,respectively,the difference was statistically significant (P<0.05).The expression of ACAT1 was not correlated with age and PSA (P>0.05)，but it was correlated with Gleason score and pathological stage (P<0.05).ConclusionExpression of ACAT1 elevated significantly in prostate cancer tissues than that in normal tissues,and it was significantly correlated with Gleason score and pathological stage.ACAT1 expression could serve as an earlier potential marker of prostate cancer.

ACAT1；prostate cancer；marker

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.03.014

2016-01-28；

2016-04-20

衡阳市科学技术发展计划项目基金资助项目(ACAT1作为前列腺癌进展中的诊断及预后因子的前瞻性研究，编号：2014KJ51).

*通讯作者，E-mail:luo6398@sina.com.

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