白细胞酯酶检测代替涂片细胞学计数评价痰液标本质量

周发为，喻 红

武汉大学基础医学院(湖北 武汉 430071)



白细胞酯酶检测代替涂片细胞学计数评价痰液标本质量

周发为，喻 红*

武汉大学基础医学院(湖北 武汉 430071)

目的 比较白细胞酯酶检测和传统涂片细胞计数评价痰液标本质量，并探讨其临床应用价值。方法 2015年6月—2016年3月湖北民族学院附属民大医院各临床科室共4 571份细菌培养痰液标本，根据临床是否检测白细胞酯酶分为两组。临床未筛检组2 068份痰液标本，在微生物实验室涂片染色细胞计数，并用两种试剂检测白细胞酯酶。临床筛检组2 503份痰液标本，用一种试剂检测白细胞酯酶，结果为阳性者的标本送至检验科，在微生物实验室涂片细胞计数，结果为阴性的重新采集，比较两组标本质量。结果 临床未筛检组2 068份痰液标本，涂片细胞计数合格率为31.0%，白细胞酯酶检测阳性率(即合格率)为32.2%，两种方法评价痰液标本质量差异无统计学意义(P>0.05)；两种国产白细胞酯酶检测试剂之间差异无统计学意义(P>0.05)。临床筛检组，涂片细胞计数，痰液标本合格率为76%，与临床未筛检组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ①白细胞酯酶检测用于评价痰液标本质量，与传统的痰液涂片细胞计数有相同的效果；②白细胞酯酶检测用于评价痰液标本质量，是一种经济、快速、简便易行的方法，适宜在临床推广。

白细胞酯酶；痰液；显微镜检查

合格痰液标本细菌培养对下呼吸道感染疾病的诊断有重要意义。但一般情况下，痰液标本由患者自己采集，很多患者不能正确留取痰液，严重影响了痰液致病菌的检出[1]。目前，评价痰液标本是否合格，国内外都采用痰液涂片革兰染色后细胞计数，即计数每个低倍视野中白细胞和鳞状上皮细胞数量，来判断痰液标本是否合格。但该方法有不足，一是确认标本不合格后，信息反馈给临床，患者再留取痰液标本，整个周期较长。二是涂片革兰染色镜检过程比较复杂，影响工作效率。近年来, 许多学者将尿液分析用的白细胞酯酶试纸用于腹水[2-3]、脑脊液[4]、尿液[5]、阴道分泌物[6]、骨骼系统疾病相关分泌物[7]和关节液[8-9]等细菌感染的快速诊断，该试纸条通过检测标本中白细胞酯酶而间接反映标本中白细胞数量,可在床旁操作,在1～2 min内即可得到结果。下呼吸道细菌感染，多形核白细胞(polymorphonuclearneutrophil,PMN)在病灶聚集而释放大量白细胞酯酶，来自下呼吸道的合格痰液标本，含有白细胞酯酶。本研究通过对痰液标本白细胞酯酶检测与传统痰液涂片细胞计数两种方法的比较,旨在探讨简便易行的评价细菌培养痰液标本质量的方法。

1 资料与方法

1.1 一般资料 湖北民族学院附属民大医院2015年6月—2016年3月共4 571份细菌培养痰液标本, 分别来自不同的临床科室。患者年龄(53.4±20.2)岁，男∶女为2 635∶1 936。4 571份细菌培养痰液标本分为两组，即临床未筛检组和临床筛检组，2015年6月至2015年10月2 068份痰液标本为临床未筛检组，2015年11月—2016年3月2 503份痰液标本为临床筛检组。临床未筛检组：临床采集痰液标本后，不检测白细胞酯酶，直接送检验科，再检测白细胞酯酶和涂片细胞计数。临床筛检组：临床采集痰液标本后，及时检测白细胞酯酶，结果为阳性的直接送检；若为阴性，则重新采集痰液标本，该组痰液标本在实验室仅涂片细胞计数。

1.2 痰液涂片革兰染色 痰液涂片干燥后，根据《全国临床检验操作规程》(第3版)，进行革兰染色。在显微镜下观察，计数多个低倍视野白细胞和上皮细胞数。根据《全国临床检验操作规程》(第3版)中《下呼吸道标本的处理》，多个低倍视野鳞状上皮细胞<10个、白细胞>25个为合格痰液标本。

1.3 白细胞酯酶检测 为避免不同厂家的干化学试纸条敏感性和特异性存在明显差异，临床未筛检组同时应用桂林优利特和长春迪瑞公司生产的尿干化学试纸条(包含白细胞酯酶检测)检测痰液白细胞酯酶；临床筛检组采用同一种试纸条检测白细胞酯酶，白细胞酯酶阳性则视为合格痰液标本。操作方法和结果判断均严格按照各自操作说明书进行。

1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0统计软件进行分析，计数资料比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1两种不同方法评价痰液标本质量比较 临床未筛检组2 068份痰液标本，在实验室涂片细胞计数和检测白细胞酯酶，两种检测方法比较差异无统计学意义(χ2=0.21，P>0.05)，见表1。

表1 痰液标本细胞计数和白细胞酯酶检测结果

2.2 前后痰液标本合格率比较 临床未筛检组2 068份痰液标本，直接以传统的细胞学计数为是否合格判断依据。临床筛检组2 503份痰液标本，白细胞酯酶检测为阳性视为合格，并送检，再以细胞学计数进行评价。两组差异有统计学意义(χ2=35.6，P<0.05)，见表3。

表3 两组痰液标本合格率比较

3 讨论

下呼吸道细菌感染是常见病、多发病，其诊断主要依赖于实验室痰液细菌培养，培养出致病菌并发出鉴定和药敏报告，指导临床抗生素的使用。临床采集合格的痰液标本是分离出致病菌的关键。当前，由于不熟悉标本采集要求，以及对患者宣教不到位等因素的影响[10]，全国各医院实验室都面临痰液标本采集合格率很低下的情况，有报道从30.3%到34.0%[11]。有些患者的痰液标本就是唾液[10]，以至于不能分离培养出致病菌，严重影响了下呼吸道细菌感染患者的及时治疗。传统的方法评价痰液标本质量，采用的是涂片革兰染色，鳞状上皮细胞<10个/低倍视野、白细胞>25个/低倍视野的标本，视为合格标本。这种评价方法有诸多不便之处。

白细胞酯酶是PMN，即中性粒细胞释放的羧酸酯酶，在发生炎症时，多形核白细胞在病灶聚集而大量释放白细胞酯酶。细菌及真菌、霉菌感染均可见明显多形核白细胞。下呼吸道感染时，白细胞会明显增加，并释放出白细胞酯酶到痰液中。近年来，国内外广泛将白细胞酯酶检测应用于快速鉴别尿液、脑脊液、胸水、腹水和关节液等样本细菌感染，说明在这些标本中，白细胞酯酶与细菌的相关性非常高。下呼吸道细菌感染，痰液含有大量病原菌，白细胞和白细胞酯酶的量也相应增多。本研究显示，痰液白细胞酯酶检测合格率与涂片细胞计数合格率有高度的符合性。在研究中，我们通过比较，不同厂家生产的白细胞酯酶试纸条，对痰液白细胞酯酶检测结果没有差异，这与其他人员研究一致[12]。

经过统计，临床未筛检组和筛检组的合格率有明显区别。由此可以说明，采集患者痰液标本后检测白细胞酯酶，结果可以作为评价痰液标本是否合格的依据。如果痰液标本不合格，可以指导患者按照采集要求，重新留取痰液，直到合格为止。这样既符合分析前质量保证的要求，也为及时诊断和救治患者提供了保障。

痰液白细胞酯酶检测，操作简单、方便快捷，不需要借助任何设备。经过简单的培训后，护理人员就能正确的操作和判断，这为该技术的推广提供了保证。同时，白细胞酯酶试纸条可以保存在室温下，在有效期内使用就能确保检测结果可靠。市场上，每份白细胞酯酶试纸条价格在1元左右，不会明显增加痰液标本检测的成本。因为白细胞酯酶检测结果靠肉眼判断，不同的操作人员的判断结果可能有小的差异，但检测结果在两个及以上“+”时，这种差异就可以忽略不计。

综上所述，白细胞酯酶检测评价痰液标本质量，与传统的痰液涂片革兰染色细胞计数相比，简便易行，有同样的效果，适合在采集患者痰液标本后，及时评价是否合格，值得在临床推广使用。但痰液涂片革兰染色细胞计数是经典的方法，可以用来定期评价白细胞酯酶检测结果是否有偏差；如果有试剂过期、试剂保存不当或操作人员没有经过培训等异常情况，可以及时发现并纠正。

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责任编辑：牟冬生

Comparison of Leukocyte Esterase Test with Conventional Smear Cytological Examination for Evaluation of Sputum Specimens

Zhou Fawei,Yu Hong*

(TheBasicMedicalSciencesSchoolofWuhanUniversity,Wuhan430071,China)

Objective To compare Leukocyte Esterase test with conventional smear cytological examination for evaluation of sputum specimens and explore its clinical values.Methods 4571 sputum samples in the Affiliated Hospital of Hubei University for Nationalities (June 2015 to March 2016) were divided into two groups.The non-screening Group (2 068 sputum specimens) was gram-stained at the microbiological laboratory and examined for Leukocyte Esterase by two detection reagents.The screening Group (2 503 sputum specimens) was examined for Leukocyte Esterase.The positive specimens were sent to the laboratory.The negative specimens were collected again.The specimens′ qualities of the two groups were compared.Results The qualified rate of sputum specimens was 31.0% by conventional smear cytological examination and positive rate was 32.2% by Leukocyte Esterase test in the non-screening Group.There were no statistical differences between the two methods for evaluation of sputum specimens (P>0.05).The qualified rate of sputum specimens was 76% by conventional smear cytological examination in the screening Group.There were statistically significant differences between the two groups (P<0.05).Conclusions ①The Leukocyte Esterase test and conventional smear cytological examination have the same effects for evaluation of sputum specimens.②The Leukocyte Esterase test for evaluation of sputum specimens is simple, economic and effective,so it is worth to be widely applied.

leukocyte esterase;sputum;microscopy

周发为(1971- )，男，湖北鹤峰人，副主任技师，研究方向：细菌耐药机制；*

R

A

1008-8164(2016)04-0045-03

2016-08-23