不同免疫学检验方法对于结核病的临床价值研究

高正洪

(江苏省靖江市人民医院检验科 214500)



·临床研究·

不同免疫学检验方法对于结核病的临床价值研究

高正洪

(江苏省靖江市人民医院检验科 214500)

目的 探讨蛋白芯片法与胶体金法对于结核病的临床价值。方法 选取该院从2015年2～11月所收治的90例确诊结核病患者作为临床研究对象，同时采用蛋白芯片法与胶体金法进行检测并比较两种检测方法的差异性，分析不同方法在结核病辅助诊断当中的临床价值。结果 结核组患者的胶体金法阳性反应率为73.3%(66/90)，显著高于对照组[7.8%(7/90)]，差异有统计学意义(P<0.05)；结核组患者蛋白芯片法的阿拉伯甘露糖脂(LAM)、蛋白16kD和蛋白38kD阳性反应率为53.3%(48/90)、22.2%(20/90)和53.3(48/90)，高于对照组5.6%(5/90)、0%(0/60)和5.6%(5/90)，差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明，结核组患者的胶体金法阳性反应率显著高于蛋白芯片法阳性反应率，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 胶体金法在结核病的辅助诊断中更有优势，其灵敏度高、操作简单，有利于推广，对于结核病的早诊断、早治疗具有较强实用性，是一种比较理想的免疫学检验方法。值得在今后临床工作中推广应用。

结核病； 诊断； 蛋白芯片法； 胶体金法

据研究报告，目前世界上大约1/3的人口被结核菌感染，而我国又是世界上结核病高负担国之一，因此对于结核病的防控诊治刻不容缓[1]。目前对于结核病的诊断，主要凭借对患者症状、体征、痰涂片培养以及影像学检查，但对于不典型肺结核的诊断仍是临床上棘手的问题。此外，影像学的检查令结核病检查变得快速、有效，大大提升了诊断效率，但无法找到结核菌确诊。痰培养需时较长，肺结核痰培养的阳性反应率不高，容易导致漏诊与误诊[2]。

结核病属于免疫介导慢性疾病，采用免疫学检验方法对抗体进行检测以辅助诊断结核病是较佳的方法。目前，蛋白芯片法与胶体金法是比较成熟的两种免疫学检验方法。蛋白芯片法是同时对结核菌阿拉伯甘露糖脂(LAM)、蛋白16kD和蛋白38kD进行检测，从而诊断结核菌的感染情况。胶体金色法则是采用葡萄球菌A蛋白(SPA)胶体金缀合物对结合IgG抗体进行标记呈色，从而判断是否感染结核菌。本研究将2015年2～11月在本院治疗的结核病患者90例作为研究对象，同时采用两种不同方法进行检测，比较两种检测方法的差异性，分析不同方法在结核病辅助诊断当中的临床价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2015年2～11月所收治的90例确诊结核病患者作为研究对象，其中男49例，女41例，年龄18～83岁，平均(46.7±11.2)岁。结核病类型：肺结核83例，结核性脑膜炎2例，结核性胸膜炎3例，骨关节结核2例。所有患者均符合人民卫生出版社2002版《内科学》的相关诊断标准[3]。另选取90例非结核病患者作为对照组，其中慢性支气管炎27例，支气管肺炎10例，急性上呼吸道感染13例，肺癌18例，淋巴结炎12例，尘肺10例。

1.2 方法[4]

1.2.1 蛋白芯片法 选择结核分枝杆菌IgG抗体检测试剂盒及 PBT-X2型芯片阅读仪(南京大渊生物技术工程有限责任公司生产)对患者血清进行检测，以3种结核菌复合群特异性抗原：LAM、蛋白16kD和蛋白38kD以检测血清之中的抗体，若任一抗体检测为阳性则判定患者为阳性。若3种抗体检测全为阴性则判断为阴性。

1.2.2 胶体金法 采用迪比多试剂盒(上海奥普生物科技有限公司生产)对患者血清进行检测，采用斑点免疫胶体金渗滤技术，对结核分枝杆菌特异性膜蛋白抗原进行分离纯化，再在硝酸纤维素膜上点样再固定，膜上的结核抗原会和人血清中的结核分枝杆菌抗体进行结合，再用葡萄球菌A蛋白(SPA)胶体金缀合物和结合之后的结核IgG抗体的呈色，若出现红色斑点，则判定患者为阳性。

1.3 统计学处理 采用SPSS19.0统计学软件包对数据进行处理，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

结核组患者的胶体金法阳性反应率为73.3%(66/90)，显著高于对照组[7.8%(7/90)]，差异有统计学意义(P<0.05)；结核组患者的蛋白芯片法检测LAM、蛋白16kD和蛋白38kD阳性反应率为53.3%(48/90)、22.2%(20/90)和53.3(48/90)，高于对照组5.6%(5/90)、0%(0/60)和5.6%(5/90)，差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明，结核组患者的胶体金法阳性反应率显著高于蛋白芯片法阳性反应率，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 蛋白芯片法和胶体金法对结核病的阳性反应率比较[n(%)]

注：与对照组比较，*P<0.05；与蛋白芯片法比较，#P<0.05。

3 讨 论

结核病指的是显微镜下或者培养后的阳性结核分枝杆菌结果，或者具有影像学和临床结核病特征，患者常有低热、夜间盗汗和咳嗽等症状。目前，结核病已占据全世界感染性疾病死亡的首要原因，严重危害人们的生命健康，根据全国性的流行病学调查，我国活动性肺结核患病率为367/10万，涂阳性肺结核患病率122/10万，菌阳患病率为160/10万[5]。在基础卫生条件薄弱和群众医疗意识不足的地区情况尤为严峻。

因此如何快速准确地诊断并予以有效的治疗，意义重大。目前，分枝杆菌培养是诊断结核病的金标准，但培养的周期长，一般需要6周才能确诊，因此影响了早期诊断和及时治疗，甚至可能造成疾病的传染[6]。影像学诊断快速有效，但若患者症状不典型，可能会造成误诊或漏诊。近年来，血清免疫学检验方法逐渐广泛应用，以补充影像学和痰涂片培养法的不足。而其中，蛋白芯片法和胶体金法是最为常用的两种方法。

蛋白芯片法是采用结核菌特异性细胞壁脂多糖抗原LAM与基因工程充足DNA技术生产纯化了的蛋白16kD和蛋白38kD特异性抗原固定在同一膜片上面，令抗原反应快速在固相膜中进行，再通过免疫金为标志物以显色于膜上，实现对结核病的检测[7]。

LAM为分枝杆菌属于细胞壁的组成部分，属于特异抗原，检验的灵敏度比较高。然而，除了结核分枝杆菌之外，还有多种分枝杆菌也含有LAM，因此其特异度不高[8]。而蛋白16kD和蛋白38kD属于结核分枝杆菌的特有抗原，和其他分枝杆菌没有交叉反应，因此特异度比较高。

胶体金法是采用斑点免疫胶体金渗滤技术，把结核分枝杆菌的特异性膜蛋白抗原进行分离纯化后，采用葡萄球菌A蛋白对结核IgG进行检测，并根据是否出现红色斑点确定是否感染结核病[9]。胶体金法具有以下优势：(1)结果稳定。由于血清中IgG的含量相对稳定，不会受到细菌活力与形态影像，因此其测验的稳定性高；(2)使用方便。胶体金法不需要贵重的检测仪器和材料，而且操作简单，一般而言十多分钟就能出结果，因此推广型比较强[10]；(3)准确率高。和蛋白芯片法比较，胶体金法的检测准确率比较高，适合用于临床检测。

本研究也表明，不同组别患者在两种方法检测的阳性反应率比较差异均有统计学意义(P<0.05)，表明不同免疫学检验方法均能有效对结核病进行诊断。而两种方法的诊断有效率比较中，胶体金法阳性反应率为73.3%(66/90)，高于蛋白芯片法的LAM、蛋白16kD和蛋白38kD阳性反应率为53.3%(48/90)、22.2%(20/90)和53.3(48/90)，表明胶体金法较蛋白芯片法有更高的诊断效果。有研究表明，若同时采用两种方法检测，并不会有效提高诊断准确率，提示在两种方法中，胶体金法是更好的选择。

综上所述，胶体金法在结核病的辅助诊断中更有优势，其灵敏性高、操作简单，有利于推广，对于结核病的早诊断、早治疗具有较强实用性，是一种比较理想的免疫学检验方法。值得在今后临床工作中推广应用。

[1]滕岩，迟伟，姜顺爱，等.蛋白芯片法与胶体金标记结核抗体法在结核病患者检测中的临床价值[J].中国民康医学,2016,27(7):80-81.

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[3]叶任高.内科学[M].5版.北京：人民卫生出版社，2002：94.

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[7]罗招凡，林向华，李竞.蛋白芯片法与金标法及抗酸染色法诊断结核病的比较[J].现代检验医学杂志，2007,22(2)：52-54.

[8]莫凤明，刘爱菊，张璐，等.血清结核杆菌抗体胶体金法的应用价值[J].检验医学与临床，2012,9(9)：1118-1119.

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.23.059

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