魏永义 王玉堃 (山东迅达康兽药有限公司 山东 济南 250306)
中兽药“优净”对鸡传染性支气管炎的防治作用
魏永义王玉堃(山东迅达康兽药有限公司山东 济南250306)
为验证中兽药“优净”对鸡感染传染性支气管炎的防治作用,分别进行了2个试验;预防试验中预防组攻毒前给予中兽药“优净”进行保护,然后进行攻毒,考察其对鸡血清IFN-γ的作用;治疗试验中,把患病鸡分为3组,一组空白对照,一组药物对照,一组用“优净”治疗,考察治疗效果;结果表明,优净有提高鸡血清IFN-γ的作用,治疗病鸡并降低死亡率的作用;因此,中兽药“优净”对鸡传染性支气管炎具有预防和治疗作用。
鸡传染性支气管炎防治“优净”中兽药
鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染病[1]。传染性支气管炎病毒主要损伤雏鸡的呼吸道、泌尿生殖系统和消化系统,引起不同程度的死亡,给养鸡业带来巨大的损失[2]。感染IBV-M41鸡体中的大多数CD4细胞和CD8细胞均可分泌II型IFN(IFN-γ),而IFN-γ通过诱发Th1细胞的免疫反应,可以对鸡体的细菌感染及病毒感染起到保护作用。因此,IFN-γ在人工感染雏鸡血清中的变化反应了鸡体抗病毒的作用机制,可为研究机体对病毒感染的免疫反应提供参考[3]。
中兽药“优净”是由黄连、黄芪、板蓝根、大青叶组成的中药复方制剂。具有无毒副作用、无耐药性、无残留的独特优势,有利于减少或杜绝抗病毒化学药物的使用,提高动物机体的抗病力和抵抗力[4-5],促进养殖业健康可持续发展。明显提升畜禽产品的品质,保证食品质量安全。本文通过对感染传染性支气管炎病毒的鸡群进行治疗,进一步确定该方剂治疗病毒性疾病的效果。
1.1试验药物中兽药“优净”由本课题组提供;双黄连口服液,合肥中龙神力动物药业有限公司;青霉素、链霉素,由本课题组化验室提供。
1.2治疗用试验鸡滨州某养鸡场的雏鸡,10~15日龄发病,经兽医院兽医诊断,确诊为鸡传染性支气管炎。
1.3病毒株传染性支气管炎病毒(IBV)标准毒株M41,由山东省农业科学院家禽研究所提供(临床分离并鉴定的野毒株)。
1.4预防用试验鸡供试鸡为1d无IB抗体的健康海兰褐雏鸡,购自山东省农科院家禽研究所试验场。
1.5SPF鸡胚购自青岛易邦生物工程有限公司。
1.6饲料雏鸡全价配合饲料,由山东省农业科院家禽研究所饲料添加剂厂提供。
1.7试验仪器及试剂主要仪器有离心机(上海安亭科学仪器厂)。鸡IFN-γ试剂盒为美国R&D公司产品
2.1分组及人工感染情况试验用鸡购自非IB免疫1日龄鸡群,雏鸡饲养于已消毒的鸡舍里,攻毒前,对鸡群进行编号,并随机分为4组,每组60只。第1组:健康对照组,不攻毒、不给药,隔离饲养。第2组:阳性对照组,攻毒后不喂任何药物,隔离饲养。第3组:药物对照组,于攻毒前5d,将双黄连口服液加入水中进行混饮给药。第4组:“优净”预防组,于攻毒前5d,将中兽药“优净”加入水中进行混饮给药。在试验期间,各组自由采食和饮水,但所用的饮用水、饲料、用具要严格分开,避免交叉污染。
2.2IBV种毒复壮及感染液制备IBV种毒标准株M41 (EID5010-7.0/ml)使用前用鸡胚复壮,种毒按1:1000稀释,经尿囊腔接种于10日龄SPF鸡胚,每胚0.1ml。37℃培养38h,收集鸡胚尿囊液,加入青霉素1000IU/ml、链霉素1mg/ml,以2000r/min离心15min,取上清液作为病毒感染液备用[6]。
2.3临床试验雏鸡饲养至14及19日龄时,分别给药及攻毒,每只鸡用传染性支气管炎病毒液滴鼻和点眼,余下剂量腿肌注射。接种病毒后常规隔离饲养,并进行观察及后续试验。每组选取10只分别在21、25、29日龄进行采血,采血量为10ml/只,血液4℃过夜,2500r/min离心15min,分离血清。用IFN-γ试剂盒测定血清中IFN-γ的吸光度,并计算其浓度(pg/ml),用SPSS17.0软件进行方差分析。
2.4试验结果试验中阳性对照组在攻毒48h后绝大部分鸡出现明显的咳嗽,部分鸡出现罗音、呼吸困难等症状,病鸡精神沉郁,食欲减少,对死亡鸡只进行剖检,出现鸡传染性支气管炎典型病理变化,说明攻毒成功。试验结果见表1。
表1 “优净”对鸡人工感染M41雏鸡血清中IFN-γ的作用
2.5试验结论中兽药“优净”能显著提高雏鸡血清中IFN-γ浓度,因此具有预防鸡感染传染性支气管炎的作用。
3.1试验分组鸡舍共3500只雏鸡,19~21日龄开始发病,死亡107只,将剩余的3393只发病鸡分为3组,第1组393只,不给任何药物,作为空白对照组;第2组1500只,给予病毒灵,作为阳性药对照组;第3组1500只,给予中兽药“优净”。
3.2给药方法第1组:不给药,不做任何处理;第2组:双黄连口服液,饮水给药,连续7d;第3组:中兽药“优净”,饮水给药,连续7d。
3.3考察项目(1)观察各组试验鸡发病情况,临床症状、死亡数量等。(2)每组选取10只分别在用药后第1天,第5天,第7天进行采血,采血量为10ml/只,血液4℃过夜,2500r/min离心15min,分离血清。用IFN-γ试剂盒测定血清中IFN-γ的吸光度,并计算其浓度(pg/ml),用SPSS17.0软件进行方差分析。
3.4治疗效果的判断治愈率:试验期间,治疗组病鸡经给药后精神状态、食欲恢复正常,不再出现临床症状者均判定为治愈,以此计算治愈率。治愈率=治疗后剩余鸡数量/该组试验鸡总数×100%。
3.5试验结果中兽药“优净”治疗后的第3天,病鸡的精神状况有了明显好转,症状基本消失,病死鸡数目有了大幅度降低,治疗7d后鸡舍中鸡的死亡率接近正常死亡率,而阳性药对照组仍有较高的病死率,试验结果见表2、3。
表2 中兽药“优净”对鸡传染性支气管炎的治疗效果
表3 “优净”对患病雏鸡血清中IFN-γ的作用
3.6结论通过治疗试验可得,中兽药“优净”对鸡传染性支气管炎有明显的治疗效果;通过“优净”对患病雏鸡血清中IFN-γ作用的试验可得,中兽药“优净”能明显提高鸡血清中的IFN-γ水平,增加机体的免疫力,从而起到治疗鸡传染性支气管炎的作用。
通过试验可得,中兽药“优净”对鸡传染性支气管炎有明显的预防与治疗作用,中兽药“优净”主要由黄连、黄芪、板蓝根、大青叶组成,具有清热解毒,补气固表,凉血利咽等功效,用于防治鸡传染性支气管炎符合本方的药理作用。同时,中药的绿色、无公害、无残留等特点,将其推广为家禽用抗病毒制剂,能减少抗生素的使用,降低了动物源性食品中抗生素残留,符合食品安全的要求,更能促进人们的身心健康。
[1] 郭时金, 王艳萍, 王峰等. 中兽药新制剂清瘟败毒颗粒对鸡人工感染支气管炎的防治试验[J]. 家畜生态学报. 2013,34(12): 50-53.
[2] 孙长春. 鸡传染性支气管炎的诊断与防治[J]. 畜牧与饲料科学, 2009, 30(11-12): 105-107.
[3] 王萌, 严作廷, 叶得河等. 自拟中药方剂对鸡传染性支气管炎的防治效果[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2011, 39(12): 8-13.
[4] 张庆茹. 中草药免疫促进作用的研究进展[J]. 中兽医医药杂志, 1997(5): 15-16.
[5] 符华林. 中药促进动物免疫作用的研究及展望[J]. 中国家禽, 2003(9): 5-7.
[6] 王秋菊, 杨建省. 黄芩有效成分提取及对传染性支气管炎预防效果的研究[J]. 饲料博览技术版. 2009(12): 34-36.
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