辽宁地区新生仔猪猪瘟隐性感染情况的血清学调查

张建勋，刘耀川，宋淑英，董素凤，张 辉

（辽宁省重大动物疫病应急中心，辽宁 沈阳 110161）

辽宁地区新生仔猪猪瘟隐性感染情况的血清学调查

张建勋，刘耀川，宋淑英，董素凤，张 辉

（辽宁省重大动物疫病应急中心，辽宁 沈阳 110161）

猪瘟能够造成生猪养殖业巨大经济损失，隐性感染病猪成为猪群的潜在风险因素。本试验对辽宁地区15家规模化养殖场的150头1月龄未免疫仔猪进行猪瘟隐性感染情况血清学调查，为我省猪瘟防控、净化提供帮助。结果显示，我省猪瘟隐性感染率为36%，属中等偏高水平，建议调查养殖场及时对猪群进行净化处理。

猪瘟；隐性感染；感染率；净化

猪瘟为一种急性、烈性传染病，能给生猪养殖业造成巨大的经济损失。自对猪瘟实行强制免疫以来，该病已得到有效控制。但在高密度的疫苗免疫压力下[1]，猪瘟病毒出现了许多适应性的变异，低致病力、低致死性的毒株不断出现，导致迟发性、慢性、亚急性猪瘟病例不断增多[2-4]。隐性感染，持续带毒、散毒的病猪是猪群的潜在风险因素[5]。因此，对猪群中猪瘟的隐性感染情况进行调查、及时清除隐性感染病猪、净化猪群，对集约化养殖场防控猪瘟具有重要的现实意义。本研究在辽宁地区11个市、县选取15家规模化生猪养殖场，对150头1月龄仔猪的猪瘟隐性感染情况进行血清学调查，为全省防控、净化猪瘟提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 采样养殖场 在辽宁鞍山、本溪、锦州、盘锦、阜新、营口、铁岭、辽阳、绥中、葫芦岛及昌图地区，选取具有代表性的规模化生猪养殖场进行采样。地区选场情况见表1。

1.2 试验动物 每场选取不同群、1月龄、未免疫的仔猪各10头。仔猪亲代健康，无异常现象。选取的仔猪体重、体长适中，出生后表现正常。

1.3 试剂与仪器 猪瘟抗原检测ELISA试剂盒购于上海牧仁生物科技有限公司，W D-2102A全自动酶标仪。

表1 样品采集地区分布情况Table1 The hog breeding farm

1.4 血液采集 使用灭菌注射器，于仔猪前腔静脉采血10 mL，静置，待其析出血清后，将血清分装于灭菌离心管中，-20℃保存待用。

1.5 猪瘟抗原EELLIISSAA检测 猪瘟抗原检测按照试剂盒说明书进行。试验步骤为：①取50 μL样品稀释液加入酶标板各孔中；②取50 μL参照血清稀释液1加入第1孔（A1）和第2孔（B1）中；③取50 μL参照血清稀释液2加入C1和D1孔中；④取50 μL参照血清稀释液3加入E1和F1孔中；⑤取50 μL待检血清加入其它孔中，盖好酶标板，轻轻振荡混匀，室温（20～25℃）孵育180±5 min；⑥弃去孔内液体，甩干，用300 μL洗液洗涤6次。最后1次洗涤后尽量将酶标板拍干；⑦每孔加入100 μL酶标结合物工作液，盖好后室温（20～25℃）静置孵育60±5 min；⑧重复步骤⑥每孔加入100 μL底物液，室温（20～25℃）孵育15 min；⑨每孔加入100 μL终止液；⑩混匀后测定O D450值。

1.6 结果读取及有效性判定 在终止液反应15 min内测定O D450，取C1和D1孔的O D450平均值为空白值，取A1和B1孔的O D450平均值为参照血清稀释液1的O D450，取其他样品孔O D450与O D450空白值的差值为样品校正值，并根据下列公式计算参照血清稀释液3（E1和F1孔的平均值）和检测样品的阳性率（PP）。

数据有效性判定，必须同时满足：①O D450空白值＜0.350；②O D450参照血清稀释液1≥0.750；③参照血清稀释液3（E1和F1孔的O D450平均值）的阳性率（PP）＞20%。

图1 辽宁地区仔猪猪瘟隐性感染情况分布图Fig.1 The distribute chart of swine fever inapparent infection on piglet in Liaoning area

2 结果与分析

此次血清学调查结果表明，辽宁地区猪瘟隐性感染率为36%。其中，鞍山0%、本溪15%、锦州40%、盘锦40%、阜新10%、营口100%、铁岭30%、辽阳30%、绥中20%、葫芦岛50%、昌图80%。具体隐性感染情况见表2。

表2 辽宁地区仔猪猪瘟隐性感染情况Table2 The inapparent infection situation of swine fever on piglet in Liaoning area

数据分析可见，此次调查辽宁地区仔猪猪瘟隐性感染率为0～100%之间，主要分布于30%～50%之间，属于中等偏高水平。同一地区的不同规模场中，感染率不尽相同。如本溪2场的感染率分别为0%及30%，差别较大。一些地区的差别则不明显，如绥中2场的感染率分别为10%及30%、葫芦岛2场分别为40%和60%。而如锦州地区2场，隐性感染率则完全相同，均为40%。具体隐性感染率分布情况见图1。

3 讨论

猪瘟是造成养殖业巨大经济损失的疾病之一。隐性感染病猪则能长期带毒、排毒，是猪瘟病毒潜在的传染源，对猪群健康造成威胁[6]。而隐性感染的妊娠母猪则能够对这种隐性感染、长期排毒的状况起到放大的作用[7-9]。因此对猪瘟隐性感染情况进行常规性调查，对猪瘟防控、净化均有较实际的意义。

本试验对辽宁地区150头、1月龄未免疫仔猪进行猪瘟隐性感染情况调查，数据在反应该猪场猪瘟隐性感染情况的同时，也能在一定程度上反应妊娠母猪的隐性感染情况[10]，可作为猪瘟净化工作的指导依据。

本试验发现，辽宁地区猪瘟隐性感染率为36%。与国内其他地区研究结果相比，辽宁地区感染率数中等偏高水平。如山东地区调查结果，阳性率为16.2%[11]；福建地区为70.59%[12]、陕西地区阳性率为3.13%[13]、河南地区阳性率为36.9%[14]、新疆地区阳性率为78.5%[15]。而就省内调查结果而言，并未见明显的流行趋势或感染规律，各地区之间、相同地区的不同规模场之间，感染情况也较为独立。而在鞍山、本溪的饲养场中，有0%隐性感染的情况，与该场的饲养、免疫、繁育等因素有关，可以进行推广、学习。建议参与调研的饲养场，及时对隐性感染的猪进行净化，确保猪群洁净度，防止猪瘟病毒进一步扩散。

[1]朱建国，原泉水.疫区猪场猪瘟隐性感染母猪的诊断与淘汰[J].中国兽医杂志，2000，26（12）：15-16.

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[12]李晓华.龙岩市规模化猪场猪瘟流行病学调查及其控制[D].福州：福建农林大学，2010.

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[15]许追.石河子地区猪瘟病毒的免疫抗体水平监测及实验室诊断[D].石河子：石河子大学，2014.

Serological investigation on inapparent infection of swine fever on newly born piglet in Liaoning province

Zhang Jianxun,Liu Yaochuan,Song Shuying,Dong Sufeng,Zhang Hui
(Emergency center for significant animal epidemic disease of Liaoning province, Liaoning Shenyang 110161)

Swine fever causes a enormous economic losses in hog breeding industry, and the inapparentinfection pigs are the potential risk factors. In this study, 150 1 month old piglets werechosen to detect the inapparent infection situation in Liaoning area, to provide theory help forswine fever prevention and purification. The results showed that the inapparent infection ratewas 36%, suggesting the breeding farms invested eliminate the pig group as soon as possible.

Swine fever; Inapparent infection; Infection rate; Purification

S858.28

B

1672-9692(2016)03-0035-04

2016-02-02

张建勋（1973-），男，博士，畜牧师，主要从事重大动物疫病防控工作。