聚乙二醇干扰素对慢性丙肝患者血清炎症细胞因子及抗体水平的影响

郝洁，田小军，宋新文，申保生，段树鹏

(新乡医学院第一附属医院，河南卫辉453100)



聚乙二醇干扰素对慢性丙肝患者血清炎症细胞因子及抗体水平的影响

郝洁，田小军，宋新文，申保生，段树鹏

(新乡医学院第一附属医院，河南卫辉453100)

目的 探讨聚乙二醇干扰素对慢性丙肝患者血清炎症细胞因子及抗体水平的影响。方法 选择慢性丙肝患者120例，随机分为观察组、对照组各60例。两组均给予改善肝功能等基础治疗，同时口服利巴韦林250 mg、3次/d；在此基础上对照组皮下注射普通干扰素3×106IU/d，连用4周后改为3次/周；观察组皮下注射聚乙二醇干扰素α-2a 180 μg，1次/周；两组均连续治疗6个月。比较两组治疗后病毒学反应，观察两组治疗前后血清γ干扰素、γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)、IL-6、TNF-α、CRP水平，肝功能及抗体水平变化。结果 观察组快速应答52例、完全应答35例、持续应答35例，对照组分别为43、22、24例，两组快速应答、缓慢应答及持续应答率比较P均<0.05。两组治疗后血清IL-6、TNF-α、CRP、IP-10、ALT、AST、TBil、抗HCV及HCV-RNA均低于治疗前，γ干扰素水平均高于治疗前，且观察组效果更明显(P均<0.05)。结论 聚乙二醇干扰素用于慢性丙肝能更好地调节患者机体免疫功能，改善患者预后。

慢性丙型肝炎；聚乙二醇干扰素；炎症细胞因子；抗体表达

流行病学调查发现，丙肝病程大于10年者有10%～20%发生肝硬化，其中1%～7%进展为肝癌；对肝功能异常、肝组织病理学有明显坏死或纤维化的慢性丙肝患者需要积极给予抗病毒治疗[1]。普通干扰素是治疗慢性丙肝的常用药物，对HCV复制具有抑制作用，但部分患者对普通干扰素的病毒学应答不佳甚至无反应。聚乙二醇干扰素可促进干扰素抑制细胞内病毒复制及细胞增殖，同时增加淋巴细胞的特异性细胞毒性等一系列免疫调控活动，对慢性丙肝效果更佳。但目前其对炎症细胞因子及抗体水平影响的研究尚少。2012年1月～2015年2月，我们观察了聚乙二醇干扰素对慢性丙肝患者血清炎症细胞因子及抗体水平的影响。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择同期新乡医学院第一附属医院收治的慢性丙肝患者120例，男66例、女54例，年龄25～60(36.12±4.17)岁。均符合2015年中华医学会《丙型肝炎防治指南》[2]中制定的诊断标准。纳入标准：血清抗-HCV及HCV-RNA阳性；ALT或AST反复或持续升高1.5倍以上至少6个月；肝组织病理学检查明确炎症坏死或中度以上纤维化。排除标准：明确合并其他病毒性肝炎者，近6个月行抗病毒或免疫抑制治疗者，失代偿期肝硬化者，罹患结缔组织病、恶性肿瘤者，血小板<5×1012/L者，血红蛋白<80 g/L者。随机将患者分为观察组、对照组各60例。两组临床资料具有可比性。

1.2 治疗方法 两组均给予免疫调节、抗炎保肝、抗纤维化及对症支持治疗，同时口服利巴韦林250 mg，3次/d。对照组在此基础上皮下注射普通干扰素(重组人干扰素α-2b注射液)3×106IU/d，连用4周后改为3次/周；观察组皮下注射聚乙二醇干扰素α-2a 180 μg，1次/周。两组均连续治疗6个月。

1.3 相关指标观察

1.3.1 病毒学反应 治疗第4、12、24周时清晨抽取空腹静脉血，检测血清病毒学反应。治疗4周时HCV-RNA转阴(<50 IU/mL)为快速应答，其余为缓慢应答。完全应答指治疗4周时HCV-RNA阳性，但治疗12周时转阴(<50 IU/mL)；部分应答指治疗12周时HCV-RNA阳性，但比治疗前下降≥2 log10IU/mL；无应答指治疗12周时HCV-RNA下降<2log10IU/mL。持续应答指停药24周HCV-RNA仍保持阴性。

1.3.2 血清炎症细胞因子 治疗前及治疗6个月清晨抽取空腹静脉血2 mL，3 000 r/min离心5 min，取血清，-80 ℃冰箱保存待检。采用ELISA法检测γ干扰素、γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)、IL-6、TNF-α及CRP水平，试剂盒购自北京EIAab生物科技有限公司，操作步骤严格按照试剂盒说明书。

1.3.3 肝功能及抗体水平 取1.3.2中保存的血清，检测肝功能指标[ALT、AST、总胆红素(TBil)]。采用荧光定量PCR仪及rt-6000酶标仪检测HCV-RNA，采用人抗-HCV ELISA定量试剂盒检测抗-HCV，以OD值表示。

2 结果

2.1 两组病毒学反应比较 观察组快速应答52例，缓慢应答8例，对照组分别为43、17例；两组比较P均<0.05。观察组完全应答35例、部分应答17例、未应答 8例，对照组分别为22、22、16例，两组完全应答率比较P<0.05。观察组中持续应答35例，对照组为24例，两组比较P<0.05。

2.2 两组血清炎症细胞因子水平比较 见表1。

2.3 两组肝功能及抗体水平比较 见表2。

表1 两组血清炎症细胞因子水平比较±s)

注：与同组治疗前比较，*P<0.05；与对照组治疗后比较，#P<0.05。

表2 两组肝功能及抗体水平比较±s)

注：与同组治疗前比较，*P<0.05；与对照组治疗后比较，#P<0.05。

3 讨论

慢性丙肝可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。有研究发现，患者感染HCV后不能自行清除，病情最终可发展为终末期肝病[3]。临床上血清HCV-RNA阳性的丙肝患者无论ALT水平升高还是正常，均需行抗病毒治疗。有研究发现，80%以上ALT水平正常的丙肝患者有不同程度的肝损伤，19%的患者可出现中度以上的纤维化，且有10%的患者出现桥接纤维化或肝硬化[4]。抗病毒治疗的目的是清除或长期抑制体内的HCV，以改善或减轻肝损害、阻止进展为肝硬化，提高患者的生活质量[5]。干扰素是治疗慢性丙肝的常用药物，但普通干扰素疗效持续时间短，且不良反应较多。聚乙二醇干扰素是将支链结构的聚乙二醇附着在干扰素分子上，不影响与细胞膜上的干扰素受体结合，还能改变干扰素的药代动力学，延长半衰期。目前主要用于慢性乙肝及丙肝的治疗。

聚乙二醇干扰素可延缓干扰素的体内吸收及消除过程，促进干扰素抑制细胞内病毒复制，同时可增强巨噬细胞吞噬活动、增加淋巴细胞的特异性细胞毒性等一系列免疫调控活动。因此，聚乙二醇干扰素有利于增强机体的病毒学反应[6]。本研究观察组快速病毒学应答、完全应答及持续病毒学应答均高于对照组，进一步证实了上述观点。

HCV感染可激活巨噬细胞分泌多种细胞因子，其中IL-6是由单核巨噬细胞、Th2细胞等分泌的多肽类物质，不仅参与炎症细胞因子的活化，刺激肝细胞合成急性期蛋白，参与炎症反应，在炎症反应中起核心调节作用[7]。TNF-α通过增强中性粒细胞趋化作用损伤肝细胞，并促进肝脏成纤维细胞增殖，导致肝纤维化的发生[8]；此外，TNF-α还能通过参与细胞间信号传递起免疫调节作用[9]。CRP是典型的细胞炎症因子，可活化巨噬细胞、T细胞，通过参与免疫应答损伤肝细胞[10]。γ干扰素具有免疫调节作用，可参与病毒性肝炎感染免疫活化、病理学改变的发生、发展过程[11]。IP-10与其受体CXC3结合后可引导CTL迁移至感染的肝组织，进而引起肝细胞的大量损伤[12]。聚乙二醇干扰素通过增加体内γ干扰素水平，促进T细胞增殖，抑制IP-10的趋化作用[13]；还可降低IP-10水平，进而降低其对肝脏的损伤[14]。本研究两组治疗后血清IL-6、TNF-α、CRP及IP-10水平均降低，γ干扰素水平升高，且观察组效果更明显。表明聚乙二醇干扰素能更好地抑制炎症反应的发生。

肝功能是丙肝病情的主要观察指标。抗-HCV对人体无保护作用，亦是目前丙肝的主要观察指标之一。HCV-RNA是HCV的遗传物质，是反映体内感染HCV的直接指标。本研究两组治疗后ALT、AST、TBil、抗-HCV及HCV-RNA均明显降低，且观察组降低更明显。说明聚乙二醇干扰素可更好地抑制体内的HCV，改善或减轻肝损伤。

综上所述，聚乙二醇干扰素用于慢性丙肝能更好地调节机体免疫功能，改善患者预后。

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