右归饮对去卵巢血管钙化大鼠谷氨酸NMDA受体mRNA表达的影响

黎波，刘凯，何虹材，谢若琳，孙宏*

(1.江西中医药大学附属医院，江西 南昌 330006;2.黑龙江中医药大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150001;3.江西中医药大学，江西 南昌 330004)



实 验 研 究

右归饮对去卵巢血管钙化大鼠谷氨酸NMDA受体mRNA表达的影响

黎波1，刘凯2，何虹材3，谢若琳3，孙宏2*

(1.江西中医药大学附属医院，江西 南昌 330006;2.黑龙江中医药大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150001;3.江西中医药大学，江西 南昌 330004)

目的:观察右归饮对去卵巢血管钙化谷氨酸NMDA受体mRNA表达的影响。方法：40只SD雌性大鼠随机分为假手术组，模型组，低剂量组，高剂量组以及辛伐他汀组，采用华法令加注射维生素D3制备血管钙化模型，并于造模后中药低剂量组、高剂量组分别给予右归饮浓缩液5.35 g/(kg·d)、16.05 g/(kg·d)灌胃，辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬水溶液5.25 mg/(kg·d)灌胃。假手术组和模型组给予等量生理盐水，共12周。于实验结束时采集血浆标本测定雌二醇和血脂的情况并应用FQ-PCR法检测谷氨酸离子受体mRNA表达。结果：模型组大鼠雌二醇、甘油三酯含量及NR1、NR2a、NR2b mRNA相对表达量明显降低，低密度脂蛋白含量明显升高，与假手术组比较，有统计学意义(P<0.05)；中药高剂量组和低剂量组可提高雌二醇、甘油三酯以及NR1、NR2a、NR2b mRNA的表达，与模型组比较，有统计学意义(P<0.01)，低剂量组、高剂量组和辛伐他汀组的LDL含量下降，与模型组比较，有显著性差异(P<0.05)。结论：右归饮可抑制去卵巢血管钙化的形成，可能与提高雌二醇水平以及上调NR1以及NR2a、NR2b mRNA表达有关。

右归饮;血管钙化;去卵巢;谷氨酸离子受体

研究发现在血管钙化中存在与骨形成相关蛋白，如碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥蛋白、Runx2和基质囊泡，羟基磷灰石矿物晶体，其钙化机理涉及钙/磷失衡、基质降解或修饰、细胞凋亡、抑制钙化失衡、促软骨形成、成骨样细胞的分化等方面；血管钙化作为一个类似于骨形成的主动、可逆转而且可被调节的生物学过程逐渐被学者认同[1-3]。证据表明,神经递质兴奋性氨基酸谷氨酸信号通路在骨重塑中发挥重要作用，N-甲基-D-天冬氨酸功能型谷氨酸受体(N-methyl-D-aspartate Receptor, NMDAR)存在于破骨细胞、成骨细胞、骨细胞和骨髓单核细胞中，抑制NMDAR(NR)将阻止成骨细胞、破骨细胞的早期分化，成骨细胞NR的封闭或敲除将影响骨的发育和形成，并主导骨形成的长时程增强或抑制作用[4-5]。因此，为了观察血管钙化过程中NR mRNA的变化以及右归饮对其的影响，本研究建立去卵巢肾虚血管钙化模型，观察右归饮对血管钙化过程中雌激素、血脂成分以及NR1、NR2a、NR2b相关基因表达的影响，明确其风险因素的地位，以探讨其保护血管的可能机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康SPF级 SD雌性大鼠40只，体质量(225±25)g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，实验动物许可证号SCXK(湘)2011-0003。

1.2 试验药物及制备

右归饮：熟地黄9 g，炒山药6 g，山茱萸3 g，枸杞6 g，炙甘草6 g，杜仲6 g，肉桂6 g，制附子9 g，取25剂的量，水煎，头煎加10倍水，煎煮2 h，过滤，滤渣加8倍水，煎煮1 h，过滤，滤渣加6倍水，煎煮1 h。合并滤液，减压(65℃)浓缩至800 ml，生药浓度为1.594 g/ml，4℃保存备用。

30%的华法令注射液：华法令(sigma，BJ121010351A，CAS号129-06-6)，称取6 g华法令，加生理盐水200 ml，混匀至清澈透明，密闭4℃避光保存备用。

2%戊巴比妥钠的制备：精确称取2 g戊巴比妥钠加蒸馏水100 ml溶解即可，临用前制备。默克集团(Merck)国内分装。

维生素K1注射液(天津药业集团新郑股份有限公司，批号1301082)；维生素D3注射液(上海通用药业股份有限公司，批号121029)；辛伐他汀片(山东鲁抗医药集团赛特有限责任公司，批号121010)。

辛伐他汀水溶液混悬剂的制备(浓度0.8 mg/ml)：称取羧甲基纤维素钠2.5 g，另取注射用水250 ml置于500 ml烧杯中，逐渐加入羧甲基纤维素钠粉剂，放入磁力搅拌器搅拌90 min，液体中少许絮状物，置入超声清洗器中打散10 min，成透明溶液；另外将辛伐他汀片20片研成粉，加入小烧杯中，加入注射用水20 ml，将此倒入羧甲基纤维素钠溶液中，置入超声清洗器中打散约10 min即成白色均匀的混悬液，补足注射用水至500 ml，密闭4℃保存备用。

1.3 试剂与仪器

实时荧光定量PCR仪(BIO-RAD)、分光光度计(Thermo)；TriPure Isolation Reagent(罗氏公司，Cat.No.11667165001)； cDNA 合成试剂盒(Cat.No.AOPR-0200)以及荧光定量试剂盒(Cat.No.AORT-0050)(广州复能基因有限公司)。

1.4 模型制备

去卵巢血管钙化模型：SD雌性大鼠双侧去卵巢后饲养1周后参考文献[6]制作血管钙化模型，两组均给予维生素K115 mg/(kg·d)，皮下注射，持续至第6天；第3天开始，血管钙化模型组另给予皮下注射维生素D330×105U /(kg·d)持续至试验第5天和华法令注射液150 mg/kg，每12 h序1次，背部皮下注射华法令，持续至第6天，试验第7天造模完成。

1.5 动物分组及处理

40只大鼠随机分为5组：假手术组，模型组，中药低剂量组、高剂量组以及辛伐他汀组,每组8只。给药剂量参照文献[7]于造模结束后给予药物干预，共12周。其中假手术组，模型组给予相同体积生理盐水灌胃，每天1次；低剂量组、高剂量组给予右归饮蒸馏水提取物，按低剂量给予5.35 g/(kg·d),高剂量组16.05 g/(kg·d)灌胃;辛伐他汀组给予辛伐他汀水溶液混悬剂按照5.25 mg/(kg·d)灌胃[8]。于相关药物干预第12周后，给予2%戊巴比妥钠腹腔麻醉(40 mg/kg)后开胸心脏采血并获取主动脉到髂动脉组织。

1.6 观察指标及方法

1.6.1 血清和血浆标本的采集

雌二醇(E2)以及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)的检测：采用非抗凝管获得5 ml后，由我院检测中心采用全自动生化仪检测。室温下静置，待有血清析出时移至离心机中以3000 r/min离心10 min，分离出血清。按照相关试剂盒要求，采用酶标仪检测血清中的TC、TG、LDL、HDL 浓度。

1.6.2 FQ-PCR检测

NR2a、NR2b、NR1 mRNA的表达：严格按试剂盒说明操作。内参基因GAPDH的引物序列 GAPDH F:CACGGCAAATTCAACGGCACAGT, R:TGGGGGCATCGGCAGAAGG; NR1 的引物序F:TGTGCGGGACAACAAGCTCCA, R:ATGCCGATGCCAAAGCCGGA；NR2a 的引物序列F: GCTACGGGCAGACAGAGAAG R:GTGGTTGTCATCTGGCTCAC；NR2b引物序列F: GCTACAACACCCACGAGAAGAG R: GAGAGGGTCCACGCTTTCC。

1.7 统计学分析

2 结果

2.1 各组大鼠血清血脂含量比较

结果：模型组TG下降明显，LDL升高，与假手术组比较，有显著性差异(P<0.05)，高剂量组能提高TG，与模型组比较，有显著性差异(P<0.05)；低剂量组、高剂量组和辛伐他汀组LDL含量下降，与模型组比较，有显著性差异(P<0.05)；辛伐他汀组LDL含量下降，与假手术组比较，有显著性差异(P<0.05),结果见表1。

2.2 各组大鼠E2含量及NR mRNA表达的比较

结果：模型组E2含量下降明显，与假手术组比较,差异明显(P<0.05)，低剂量组、高剂量组可提高E2的含量，与模型组比较，有显著性差异(P<0.05)；辛伐他汀组并未提高E2含量，与模型组比较，无明显差异，结果见表2。

模型组NR2a、 NR2b 以及NR1 mRNA的表达下降明显，与假手术组比较，有显著性差异(P<0.01)，低剂量组、高剂量组可显著提高NR mRNA的表达，与模型组比较，有显著性差异(P<0.05)，与假手术组，有显著性差异(P<0.05)；一方面说明模型大鼠NR2a、NR2b 以及NR1 mRNA表达量下降，而右归饮中药具有显著上调NR2a、NR2b 以及NR1 的基因表达量并表达超过了正常水平。辛伐他汀组亦可提高模型组NR2a、NR2b以及NR1 mRNA的表达，有显著性差异(P<0.05)，结果见表2。

表1 各组大鼠血清血脂含量比较

注：与假手术组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05。

表2 各组大鼠雌激素及NR mRNA表达的比较±s)

注：与假手术组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05。

3 讨论

血管钙化的调节因素涉及基质囊泡钙盐晶体成核或生长、细胞死亡(凋亡)或成骨样细胞激活、分化(血管平滑肌细胞表型转化)以及来自骨髓破骨细胞的激活，炎症反应、雌激素缺乏以及血脂代谢异常等均影响其进程。正常血管表达有钙化抑制相关物质，任何能够触发血管钙化抑制剂表达不足的因素均可触发和促进血管钙化进程[9-10]，动脉钙化中氧化脂质促进血管细胞向成骨细胞分化和骨矿化[11]；雌激素缺乏同时，机体产生较大的适应性变化，甲状旁腺素、维生素-D、降钙素等激素的分泌主要对骨组织的钙磷代谢产生较大影响，并且触发血管钙化的多个启动因子，如去卵巢大鼠雌激素缺乏低钙摄入导致骨质疏松和动脉中层钙化并影响骨碱性磷酸酶的活性，而高钙摄入不影响骨碱性磷酸酶活性[12]。OPG/RANKL/RANK系统是成骨细胞和破骨细胞之间相互作用的信号通道，在雌激素缺乏血管钙化中，RANKL通过调节骨形态发生蛋白-2和钙化抑制因子matrix Gla protein(MGP)表达，以及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)促进血管钙化的形成，并通过在受体依赖性雌激素抵消[13]。可见雌激素对血管钙化具有重要的作用。本研究观察到去卵巢血管钙化模型大鼠雌激素含量明显下降，并伴有血清甘油三酯下降。与假手术组比较P<0.05，差异明显，而胆固醇和低密度脂蛋白变化无差异。说明血脂成分在此钙化模型中影响不大，而雌激素的下降可能充当一定的角色。

谷氨酸信号通路中，成骨细胞代谢性受体(Metabotropic Glutamate Receptor ,mGluR)与相关磷酸酯酶C信号(PLC信号级联)[磷酸酯酶C(PLC)-胞浆钙离子-蛋白激酶C(PKC)级联信号]对成骨细胞生成以及成骨前体细胞分化有关[14]，mGluRs与NRs间的对话与骨组织选择性表达NR2亚型有关，谷氨酸通过NR参与了局部骨吸收的调节[15-17]，并且通过mGluRs受体进行反馈调节[18]，另外NR活化后钙内流激活nNOS 信号系统(neural nitric oxide synthase，nNOS)，并影响破骨细胞存活及破骨细胞吸收功能。NR的功能主要是由NRl和NR2亚基构成的四聚体结构有关，NRl是NR的基本亚基，是实现通道的功能所必须的，NR2起辅助NR形成多元化结构的作用；另外NR1、NR2a和NR2b可以组成同源二聚体，并存在于杂合NR中，在谷氨酸信号通路中，NR的激活可以上调成骨祖细胞Runx-2的表达并促使其增殖和向成骨细胞分化。对于血管中谷氨酸信号的作用研究不多，证据表明大脑血管内皮细胞中mGluR发挥作用。最初的工作只是表明脑血管内皮细胞和心肌细胞表达有mGluR的表达[19- 20]，进一步研究不但证明脑血管内皮细胞表达有I型mGluR而且具有抑制损伤引起的凋亡，通过mGluR维持膜不对称性抑制微血栓的形成[21-23]；另外，在脑膜微血管中存在mGluR1、 mGluR2/3、 mGluR4a、mGluR5和mGluR7[24]；在小鼠原发性脑血管内皮细胞中发现有NR1的表达并通过原位杂交技术发现大脑皮质动脉有NR2C，并调节血管的舒张功能[25]；在临床研究中，72 h内监控血液中 NR2a/2b抗体能够早期鉴别缺血性脑卒中(以及TIA发作)和脑出血[26]；而且血清中NR2a抗体水平与多个卒中危险因素相关并可作为脑卒中的一个预测因子[27]，mGluR5是β-catenin核锚定和调节同型半胱氨酸导致的血管内皮细胞功能障碍的主要开关[28]。本研究发现大鼠血管组织存在NR1、NR2a、NR2b的基因表达，在血管钙化组织中其含量明显降低，补肾中药右归饮可以提高血管钙化模型大鼠NR1、NR2a、NR2b的基因表达水平并同时提高血清雌二醇含量(与模型组比较差异明显，P<0.05)，而且提高甘油三酯接近正常(与模型组比较差异明显)，而辛伐他汀组可以提高NR1、NR2a、NR2b的基因表达水平，但其不能升高血清雌二醇，进一步降低LDL的含量，与假手术组比较差异明显(P<0.05)，这可能与右归饮多重调节功能有关，而辛伐他汀只能单一降低血脂组份。

中医学理论认为“天癸”渐绝标志着肾虚证形成，而肾阳虚证涉及神经—内分泌—免疫以及神经—内分泌—骨代谢两大基因调控路线的紊乱[29]。女性原发性骨质疏松患者雌激素依据肾气虚证、肾阴虚证、肾阳虚证逐渐降低[30]，男性冠心病肾阳虚证雌二醇明显降低[31]，表明雌激素缺乏后所表现的骨质疏松和冠心病等临床证候与中医的肾虚证密切相关。而雌激素缺乏可引起骨重建的偶联失衡影响钙化进程，去卵巢大鼠可以在一定程度模拟雌激素缺乏的肾阳虚证，文献报道[29]补肾中药可提高雌激素等性激素水平以及性腺雌激素受体含量[32-33]。本次实验发现，去卵巢血管钙化大鼠，雌激素不但下降明显，而且补肾中药右归饮可以提高雌二醇并提高NR1、NR2a、NR2b的基因表达，提示右归饮对于肾虚血管钙化病变具有一定的作用，在一定程度上验证了肾主骨生髓的理论，与文献报道类似。众所周知，雌激素缺乏会导致高代谢骨量丢失从而诱发骨质疏松，同时也发现雌激素缺乏大量并存血管钙化的现象，并与冠心病相关[34]，这种现象尚不能用用“骨生长漂移学说”合理解释。因此，本实验推测，作为异位组织骨形成再现的血管钙化，应该存在一个更加精细的钙沉积平衡紊乱的适应性调节，这也许跟有谷氨酸信号通路中NR1与NR2a/NR2b形成相关聚合体的改变有关，这有待于进一步的原位杂交定位实验来验证。

[1] Demer LL, Tintut Y. The leading edge of vascular calcification[J].Trends Cardiovasc Med，2015，25(4):275-277.

[2] Abedin M, Tintut Y, Demer LL.Vascular calcification: mechanisms and clinical ramifications[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol，2004，24(7):1161-1170.

[3] Hjortnaes J, Butcher J, Figueiredo JL,et al. Arterial and aortic valve calcification inversely correlates with osteoporotic bone remodelling: a role for inflammation[J].Eur Heart J,2010,31(16):1975-1984.

[4] Spencer GJ, McGrath CJ, Genever PG. Current perspectives on NMDA-type glutamate signalling in bone[J].Int J Biochem Cell Biol, 2007,39(6):1089-1104.

[5] Robert W. Cowan, Eric P. Seidlitz, Gurmit Singh. Glutamate Signaling in Healthy and Diseased Bone[J].Front Endocrinol (Lausanne),2012,3:89.

[6] 李寰，武胜昔，贾国良，等.维生素D3和华法令诱导的大鼠动脉钙化模型特点[J].中国临床康复，2005，9(11)：120-122.

[7] 徐叔云.药理实验方法[M].北京：人民卫生出版社，2002:203-204.

[8] 卢维晟，王一尘，方根强，等.高钙摄入和辛伐他汀对大鼠主动脉和骨组织脂、钙代谢的影响[J].心脏杂志，2006，18(1)：43-47.

[9] Weissen-Plenz G,Nitschke Y,Rutsch F.Mechanisms of arterial calcification: spotlight on the inhibitors[J]. Advances in Clinical Chemistry,2008(46):263-293.

[10] Rutsch F,Terkeltaub R.Deficiencies of physiologic calcification inhibitors and low-grade inflammation in arterial calcification: lessons for cartilage calcification[J].Joint Bone Spine,2005, 72(2):110-118.

[11] Demer LL, Tintut Y, Parhami F.Novel mechanisms in accelerated vascular calcification in renal disease patients[J].Curr Opin Nephrol Hypertens,2002,11(4):437-443.

[12] Agata U, Park JH, Hattori S, et al.The effect of different amounts of calcium intake on bone metabolism and arterial calcification in ovariectomized rats[J].J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo),2013,59(1):29-36.

[13] Osako MK, Nakagami H, Koibuchi N, et al.Estrogen inhibits vascular calcification via vascular RANKL system: common mechanism of osteoporosis and vascular calcification[J]. Circ Res,2010,107(4):466-475.

[14] Jilka RL.Molecular and cellular mechanisms of the anabolic effect of intermittent PTH[J].Bone,2007,40(6):1434-1446.

[15] Chenu C, Serre CM, Raynal C, et al.Glutamate receptors are expressed by bone cells and are involved in bone resorption[J].Bone,1998,22(4):295-299.

[16] Espinosa L, Itzstein C, Cheynel H, et al.Active NMDA glutamate receptors are expressed by mammalian osteoclasts[J]. J Physiol,1999,518(Pt1):47-53.

[17] Itzstein C, Espinosa L, Delmas PD, et al.Specific antagonists of NMDA receptors prevent osteoclast sealing zone formation required for bone resorption[J]. Biochem Biophys Res Commun,2000,268(1):201-209.

[18] Gu Y, Publicover SJ. Expression of functional metabotropic glutamate receptors in primary cultured rat osteoblasts. Cross-talk with N-methyl-D-aspartate receptors[J]. J Biol Chem,2000,275(44):34252-34259.

[19] Krizbai IA, Deli MA, Pestenacz A, et al.Expression of glutamate receptors on cultured cerebral endothelial cells[J]. J Neurosci Res,1998,54(6):814-819.

[20] Gill SS, Pulido OM, Mueller RW, et al. Immunochemical localization of the metabotropic glutamate receptors in the rat heart[J]. Brain Res Bull,1999,48(2):143-146.

[21] Chong ZZ, Kang JQ, Maiese K. Apaf-1, Bcl-xL, Cytochrome c, and Caspase-9 Form the Critical Elements for Cerebral Vascular Protection by Erythropoietin[J]. J Cereb Blood Flow Metab,2003,23(3):320-330.

[22] Lin SH, Maiese K. Group I metabotropic glutamate receptors prevent endothelial programmed cell death independent from MAP kinase p38 activation in rat[J]. Neurosci Lett,2001,298(3):207-211.

[23] Lin SH, Maiese K. The metabotropic glutamate receptor system protects against ischemic free radical programmed cell death in rat brain endothelial cells[J]. J Cereb Blood Flow Metab,2001,21(3):262-275.

[24] Gillard SE, Tzaferis J, Tsui HC, et al.Expression of metabotropic glutamate receptors in rat meningeal and brain microvasculature and choroid plexus[J].J Comp Neurol, 2003，461(3):317-332.

[25] LeMaistre JL, Sanders SA, Stobart MJ,et al.Coactivation of NMDA receptors by glutamate and D-serine induces dilation of isolated middle cerebral arteries[J].J Cereb Blood Flow Metab,2012,32(3):537-547.

[26] Dambinova SA, Khounteev GA, Izykenova GA,et al.Blood test detecting autoantibodies to N-methyl-D-aspartate neuroreceptors for evaluation of patients with transient ischemic attack and stroke[J].Clin Chem,2003,49(10):1752-1762.

[27] Weissman JD, Khunteev GA, Heath R, et al. NR2 antibodies: risk assessment of transient ischemic attack (TIA)/stroke in patients with history of isolated and multiple cerebrovascular events[J].J Neurol Sci,2011,300(1-2):97-102.

[28] Beard RS Jr,Reynolds JJ,Bearden SE.Metabotropic glutamate receptor 5 mediates phosphorylation of vascular endothelial cadherin and nuclear localization of β-catenin in response to homocysteine[J].Vascul Pharmacol,2012,56(3-4):159-167.

[29] 沈自尹,黄建华,陈伟华.以药测证对肾虚和肾阳虚大鼠基因表达谱的比较研究[J].中国中西医结合杂志,2007,27(2):135-137.

[30] 何成奇,谢薇,熊素芳，等.女性原发性骨质疏松肾虚三证与性激素变化关系的临床研究[J].华西医学,2003,18(1):14-15.

[31] 丘瑞香,吴国珍,金明华.性激素对肾虚患者阴阳平衡的调节作用[J].中国中医基础医学杂志,1999,5(3):46.

[32] 张新民,沈自尹,王文健,等.补益中药对老龄雄性大鼠下丘脑神经递质—性腺轴机能作用的研究[J].复旦学报(医学版),1991,18(5):5-15.

[33] 邵敏,刘庆思,庄洪,等.补肾中药对骨质疏松大鼠性激素影响的实验研究[J].中国骨质疏松杂志,1999,5(4):23.

[34] Chen SJ, Lin CS, Lin CL, et al.Osteoporosis Is Associated With High Risk for Coronary Heart Disease: A Population-Based Cohort Study[J].Medicine (Baltimore)，2015，94(27)：e1146.

Effect of Youguiyin on NMDA Receptors Expression of Vascular Calcification in Rats with Ovaries

LI Bo1,LIU Kai2，HE Hong-cai3,XIE Ruo-lin3,SUN Hong2*

(1.TheAffiliatedHospitalofJiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330006,China; 2.TheSecondAffiliatedHospitalofHeilongjiangUniversityofChineseMedicine,Harbin150001,China; 3.JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330004,China)

Objective:To study the possible mechanism of Youguiyin on regulating the expression of glutamate NMDA receptors mRNA in vascular calcification in ovariectomized rats. Methods:Totally forty SD rats were randomized into a sham group,a model group,a low-dose group, a high-dose group and a simvastatin group, with 8 in each group. The artery calcification models were established by subcutaneously injecting warfarin and vitamin D3for one week; the low-dose and high-dose groups were gavaged with 5.35 g/(kg·d),16.05 g/(kg·d)concentrated solution of Youguiyin,and the simvastatin group received 5.25 mg/(kg·d)suspensions of simvastatin.The sham group and model group were given equal amount of physiological saline with totally 12 weeks.The contents of serum estradiol and lipid(including TC,TG,LDL and HDL) were detected in all groups,with the expression of glutamate NMDA receptors mRNA by FQ-PCR.Results:Compared with the sham group, the contents of estradiol and triglycerides and the expressions of NR1, NR2a,NR2b mRNA were significantly up-regulated in the model group(P<0.05),and the content of low density lipoprotein was significantly increased (P<0.05);compared with the model group, the contents of estradiol，triglyceride levels were significantly increased and the expressions of NR1, NR2a,NR2b mRNA were significantly up-regulated in the high dose group and low dose group(P<0.01).The content of LDL was significantly decreased in the high dose group and low dose group and simvastatin group.Conclusion:Youguiyin may protect the arteries by inhibiting the formation of artery calcification.Its mechanism may be relevant to enhancing estrogen levels and up-regulating the expressions of NR1,NR2a,NR2b mRNA in vascular calcification in ovariectomized rats.

Youguiyin;Vascular calcification;Ovariectomy;Ionotropic glutamate receptor

江西省自然科学基金项目(No.20114BAB205082)

黎波(1972-),男,副教授,副主任中医师,博士,主要从事中医药防治动脉硬化研究工作。

孙宏*(1982-),女, 主要从事中西医结合防治心脑血管疾病研究工作。

2015-12-11

R285.5

A

1002-2406(2016)05-0034-05

修回日期：2015-12-30