复发性翼状胬肉中VEGF表达情况的临床研究

郑兰育

【摘要】 目的：探讨VEGF在原发性翼状胬肉组织、复发性翼状胬肉组织和正常球结膜组织中的表达情况。方法：选取2015年4月-2016年4月无锡第二人民医院眼科的翼状胬肉患者胬肉病理组织共40例作为试验组，其中原发性翼状胬肉30例，复发性翼状胬肉10例，另选取正常球结膜组织10例作为对照组。采用HE染色的方法观察正常球结膜、原发性翼状胬肉患者和复发性翼状胬肉患者的组织学形态，比较三种组织形态差异。采用免疫组化方法对各组标本进行染色，利用IPP图像软件系统测定标本中VEGF表达情况的平均光密度值，采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果：30例原发性翼状胬肉患者的VEGF表达值为（0.0082±0.0004），10例正常球结膜患者VEGF表达值为（0.0037±0.0016），10例复发组翼状胬肉患者VEGF表达值为（0.0232±0.0014），将三组测量结果通过非参数秩和检验比较，差异有统计学意义（F=240.211，P<0.01）。复发组翼状胬肉患者VEGF表达值比原发组翼状胬肉患者增高，差异有统计学意义（P<0.01），原发组翼状胬肉VEGF表达值与正常组VEGF表达值相比增高，差异有统计学意义（P<0.01）。结论：VEGF在复发组翼状胬肉患者中高表达，表明VEGF参与了翼状胬肉疾病的复发过程。

【关键词】 复发性翼状胬肉； 血管内皮生长因子

【Abstract】 Objective：To investigate the expression of VEGF in primary pterygium，recurrent pterygium and normal conjunctiva.Method：From April 2015 to April 2016，40 cases of pterygium in Wuxi NO.2 Peoples Hospital were selected as the experimental group，including 30 cases of primary pterygium，10 cases of recurrent pterygium，another 10 cases of normal conjunctival tissue were selected as control group.HE staining was used to observe the histological morphology of normal conjunctiva，primary pterygium patients and recurrent pterygium patients，and to compare the differences between the three groups.The samples were stained with immunohistochemical method. The average light density of VEGF expression was measured by IPP image software system， and the SPSS 17 software was used for statistical analysis.Result：30 cases of primary pterygium was VEGF expression value of（0.0082±0.0004），10 cases of normal conjunctiva in patients with VEGF expression value of（0.0037±0.0016），10 cases of recurrence of pterygium patients the expression of VEGF was（0.0232±0.0014），three groups of measurement results by nonparametric rank sum test，the difference was statistically significant（F=240.211，P<0.01）.The expression of VEGF in patients with pterygium recurrence group than primary pterygium were significantly increased，the difference was statistically significant（P<0.01），primary pterygium group and normal group VEGF expression values of VEGF expression values increased，the difference was statistically significant（P<0.01）.Conclusion：VEGF was highly expressed in the recurrent group，which indicated that VEGF is involved in the recurrence of pterygium.

【Key words】 Recurrent pterygium； Vascular endothelial grow factor

First-authors address：Wuxi NO.2 Peoples Hospital，Wuxi 214000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.30.010

翼状胬肉是眼科常见的疾病，罗中伶等[1]调查东莞市横沥镇40岁及以上户籍人口翼状胬肉的患病率为24.85%，其在临床上表现为睑裂部球结膜组织侵袭性生长至角膜的伪肉组织，病变多数发于鼻侧，侵犯角膜缘后进一步增大，病情严重者可越过瞳孔区而遮盖患者视野。复发性翼状胬肉患者，胬肉组织常常充血发炎，再次手术复发率进一步增加，给患者的工作和生活带来许多麻烦，本试验通过比较原发性翼状胬肉、复发性翼状胬肉、正常球结膜组织中VEGF表达情况，探讨VEGF在翼状胬肉发生、发展以及复发过程中的作用，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年4月-2016年4月无锡第二人民医院诊断为翼状胬肉，并经术后病理证实明确为胬肉组织40例为试验组，男11例，女29例，年龄39～79岁，平均（60.60±10.07）岁。原发性翼状胬肉30例，男7例，女23例，年龄38～77岁；复发翼状胬肉10例，男4例，女6例，年龄40～67岁；选取行斜视矫正术患者球结膜组织作为对照组（标本采集均取得患者同意），男3例，女7例，年龄38～69岁。三组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性，见表1。所有入选患者术前均排除眼外伤史，排除眼部活动性病史。所有入选患者均取得患者本人同意，并经由本院伦理委员会批准。

1.2 方法 实验所需的仪器由无锡第二人民医院病理科提供，抗VEGF单克隆抗体由北京中衫金桥生物公司提供，即用型SABC试剂盒购自上海博正生物公司。术前0.03%聚维酮碘眼部冲洗，术中取下的胬肉组织，经20%福尔马林，固定6～8 h，切片后进行相关HE染色和免疫组化染色。

1.3 测量 采用image-proplus进行图像分析，对VEGF阳性区域进行光密度测量，比较试验组和对照组阳性区域光密度值。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0进行相关统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验，三组VEGF表达值比较采用非参数K-S检查进行统计分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HE染色 镜下见球结膜主要由上皮层和基质层构成，上皮层以非角化的复层鳞状上皮组织为主，基质层以疏松的结缔组织为主，基质层中见少量毛细血管、淋巴细胞等炎性细胞，见图1。翼状胬肉上皮层增生显著，基质层见大量纤维血管组织，同时伴大量炎性细胞浸润，见图2。复发性翼状胬肉组织较原发性翼状胬肉组织增生厚度更加明显，炎性细胞数量更多，基质层的毛细血管杂乱排列，见图3。

2.2 免疫组化染色 VEGF的阳性表达区域表现为棕黄色颗粒沉着于翼状胬肉的上皮细胞层及血管内皮细胞，而在结膜组织阳性表达部位仅见于上皮基底层细胞有轻微表达，见图4～6。30例原发性翼状胬肉患者的VEGF表达值为0.0082±0.0004，10例正常球结膜患者VEGF表达值为0.0037±0.0016，10例复发组翼状胬肉患者VEGF表达值为0.0232±0.0014，将三组测量结果通过非参数秩和检验比较，差异有统计学的意义（F=240.211，P<0.01）。复发组翼状胬肉患者VEGF表达值比原发组翼状胬肉患者增高，差异有统计学的意义（P<0.01），原发组翼状胬肉VEGF表达值与正常组VEGF表达值相比增高，差异有统计学意义（P<0.01）。

3 讨论

在翼状胬肉患者病理组织中，血管内皮细胞生长因子具有调整控制血管组织形成的作用[2-3]，这种细胞因子可以使血管通透性进一步增加，导致血浆及血细胞渗漏，同时血管内皮细胞生长因子还起到增加血管内皮细胞进行迁移、游走以及新生血管组织形成的作用[4]。本文的研究与以往的研究相同，血管内皮细胞生长因子在翼状胬肉中的表达程度远远高于在正常的球结膜部位[5]，这可以充分说明血管内皮细胞生长因子参与了翼状胬肉发病过程[6]，目前血管内皮细胞因子主要有主要发现三种类型的受体[7]，血管内皮细胞生长因子只有在受体VEGFR-2相互结合后才可以起到增加血管壁的通透性的作用，同时可以通过观察VEGFR-2在不同组织中的不同表达程度来间接判断该组织的血管新生能力，文献[8]研究表明血管内皮细胞生长因子具有诱导血管组织及纤维细胞组织增殖的作用，翼状胬肉主要是由血管组织和纤维组织构成，血管内皮细胞生长因子在翼状胬肉中的高表达进一步证明了这种观点。在复发组翼状胬肉患者中，血管内皮细胞生长因子表达程度明显高于原发性翼状胬肉组，由此笔者推测复发组翼状胬肉患者血管新生能力高于原发性翼状胬肉患者，血管内皮细胞因子可能参与了翼状胬肉的复发过程，正常球结膜组织在病理情况下血管内皮细胞的高表达促进了结膜组织的增生以及新生血管组织的形成[9]，在复发组翼状胬肉患者中基质层含有更多的新生血管组织，而新生血管的产生与组织损伤、缺血后自我修复密切相关，由此笔者推测翼状胬肉术后复发的这部分患者可能与术后异常增多的血管内皮细胞生长因子相关。

在本研究中与其他已有的报道中都可以发现在翼状胬肉患者上皮下组织中含有较多的新生血管成分，这种新生血管成分在复发性翼状胬肉患者中表现更为突出，血管内皮细胞生长因子是当前引起组织新生血管形成的较强的细胞因子，它可以使微血管组织的通透能力明显增加，诱导血管内皮细胞组织发生分裂能，同时使组织因子产生增加，血管内皮细胞因子在病变组织中的含量可以应用于判断该组织新生生血管活性的指标，复发组翼状胬肉患者血管内皮细胞因子的表达值增高，可以反映出复发组翼状胬肉患者血管内皮细胞增殖能力较强[10]，这同时也证明再次行翼状胬肉手术后其复发率可能进一步增加，再次行翼状胬肉手术前必须加强抗感染时间，必要时予以联合应用抗代谢增殖药物[11-13]，复发性翼状胬肉组织局部注射抗VEGF药物治疗可能是一种较好的选择[14-15]。

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（收稿日期：2016-06-28） （本文编辑：郎威）