张雪萍
摘 要】 目的 包埋为人工操作,包埋过程容易出现较多问题,如何规范包埋流程,提高包埋质量。方法 对科室近一年来包埋操作步骤发生的常见问题统计分析,找出包埋遇到的常见问题以及改进的方法。结果 包埋步骤主要易出现八大类常见问题,影响了制片质量。结论 将包埋中遇到的常见问题总结归纳,规范包埋流程,可以提高病理制片的质量,提高病理诊断的效率。
【关键词】 包埋 操作 问题及解决方法
常规的石蜡包埋过程包括固定,脱水,透明,浸蜡和包埋五个步骤。包埋前的前四个步骤现大多数医院都在全自动脱水机内完成,仅包埋这一步骤为人工操作,操作步骤较多,在包埋过程容易出现较多问题,会直接影响到病理制片的成功,影响到病理诊断的效率。回顾分析近一年来包埋操作步骤发生的常见问题, 将包埋中遇到的常见问题总结归纳,规范包埋流程,可以提高病理制片的质量,提高病理诊断的效率。
1 材料
近一年经全自动脱水机规范化处理完毕组织,收集标本总计3680例,因包埋步骤影响制片成功标本共55例,判定为不合格包埋的标准为包埋过程造成制片失败,影响病理诊断的标本。
2 方法
取出包埋模型手控出蜡(注入少量的石蜡)→挟入组织块(小的多块组织应放在一起,大块组织应压平,管状和皮肤组织应竖起来包埋)→再压上包埋盒→包埋盒上再注入适量石蜡→将其置于冷冻台→当冷冻台上的包埋块表面出现凝结时移入冰箱→然后取出蜡块修削去周边的余蜡→按顺序排列好于4°C冰箱或冰格中冻起来备用。
3 结果
包埋操作步骤出现常见问题见表,最主要为两大因素:包埋框内蜡不充足切片砍掉和标本不在同一平面上。
4 讨论
包埋步骤主要易出现以上八大类问题,经总结实质可以归纳为:标本丢失,标本污染,操作不当和标本制片不全。
标本丢失:包括标本部分残留在钢片上、包埋框内有标本残留 、包埋框翻转造成标本飞溅.。标本部分残留在钢片上容易造成标本丢失,当组织含黏液较多时常见。因此操作者每次开启包埋盒揭钢板丢弃前,都要注意观察开启钢片的内面是否贴有组织,发现残留组织立即放回对应包埋盒,避免标本丢失。
包埋框内有标本残留大多是剥离蜡块时间不适宜,用蛮劲硬拨而残留,还有少数是因错过了最佳加蜡时机出现蜡物分离现象,使标本全部残留在包埋框底部而没有和包埋盒合为一体。包埋框内有标本残留在切片时标本量损失,遗漏的残留标本如有病变将造成重大医疗事故,所以在敲蜡块时应注意观察每个包埋框,确认没有有组织残留。如果发现应立即将标本全部收集重新包埋。
包埋框翻转造成标本飞溅,因包埋框存放在加热容器内,取出时包埋框上有液态石蜡的浸润很滑,操作者戴普通手套不防滑,容易使标本框翻转造成标本飞溅、丢失。包埋时操作者一定要将包埋框握稳握紧,有条件科室可以使用加厚防滑手套包埋。
标本污染: 主要是包埋框内混有杂质。包埋框内混有杂质有三种情况:1用刚抠下蜡块的冷包埋框直接包埋,框内的残留物与标本混在一起。2夹标本的镊子在夹取碎组织后没有清洁干净使包埋框内混进杂质。3还有包埋石蜡使用时间长后沉淀的杂质混入包埋框。因此在包埋时发现包埋框内有异物或浑浊,应将包埋框清洁后再包埋,或直接更换清洁无杂质的新包埋框包埋;包埋夹取组织的镊子要勤换,做到一镊一标本,尤其在镊子夹取碎组织后一定要清理干净,避免交叉污染;包埋石蜡一定要保持纯净,定期过滤。
操作不当:为包埋框内蜡不充足导致切片砍掉和标本包埋方向不正确。包埋框内加蜡不充足使得组织与塑料盒之间结合不牢,切片时蜡块有空心感,容易跳刀或将蜡块砍掉,因此加蜡量要充足。但也不要过多,因蜡块与包埋框剥离时间会相应延长,降低了工作效率也增加了成本。因此向包埋框内加蜡时量适宜为最好。
标本的包埋方向不正确,因操作者对组织结构不熟悉,制出的切片在显微镜下看不到组织的各个层面影响诊断,需要找对方位重新包埋制片再诊断。囊壁和消化道等组织包埋时一定要注意组织方位,应将组织块直立拉平、不要卷曲。[1]
标本制片不全:包括标本包埋后不在同一平面上和包埋框型号选取不合理。标本包埋后不在同一平面上,小标本和碎组织主要是因为标本加蜡后在冷台上时间太短,部分组织还未在包埋框底部固定好,再次加蜡就将标本冲走,使得标本漂到各处不在同一平面上;大标本主要是标本经固定脱水后偏硬、形状扭曲,固定在包埋框底部时没有压平。以上两种情况,在切片时组织均切不完全,容易漏诊。所以标本加蜡后在冷台上时间要合适。将多粒小标本和碎组织彼此靠近、方向一致的维持在同一平面,待蜡出现微凝时,匀速加蜡适量;将大标本切面朝下置于包埋框正中时一定要放好压平,使得标本平整固定在包埋框底部。胃、肠切缘等组织,脱水后常会扭曲,不在同一平面上,应该先用双手将之扭正,然后再包埋。[2]
包埋框型号选取不合理,小标本使用大包埋框包埋,切片时容易将小标本切掉,且不能捞取规定数量切片;大标本使用小包埋框包埋,切片时容易造成标本切不全,影响诊断。所以包埋框型号尽量与标本尺寸相符,差距不要太大。
包埋过程造成制片失败,影响病理诊断,经分析找出如何规避或是改进的方法,规范包埋流程,可有效减少差错的发生,可以提高病理制片的质量,提高病理诊断的效率。
参考文献
[1]王伯,李玉松,张远强,等.病理学技术[M].北京:人民卫生出版社,2000::61
[2]丁伟,王德田,等简明病理学技术[M]. 杭州:浙江科学技术出版社,2014.2